单胞藻软琼脂克隆固体培养基保藏技术

单胞藻藻种的保藏,国内外一般采用液体低温保藏技术,这种方法保种时间短。改用单胞藻软琼脂克隆固体培养基保藏技术,能够使营养成分缓慢地释放;软琼脂固体培养基的表面覆盖0.3 cm厚度的单胞藻培养液,可防止固体培养基水分的挥发;使单胞藻藻种在低温(8~10°C)环境中能够保藏较长的时间(2~3年)。     

常用海洋单细胞藻种的固体培养基保藏技术

单细胞藻种液经200IU／ml硫酸庆大霉素和200IU／ml青霉素处理，接种到不同营养成分的固体培养基，在自然光照，5℃－10℃的低温条件下可以保藏1－2年。     

金藻、角毛藻等藻种的固体培养基保藏技术

球等鞭金藻3010、3011、湛江叉鞭藻、Coccolithus藻、牟氏角毛藻等单细胞藻种在以硝酸钠为氮源的固体培养基上不能够正常生长，在以尿素为氮源的固体培养基上生长良好，藻种易提纯保种。     

饵料藻种提纯生产性开发研究

本文主要论述采用琼脂平板培养基法、水滴分离法和稀释分离法等，对国内贝类人工育苗常用的单细胞饵料生物进行分离。金藻、塔孢藻（或扁藻）、硅藻和小球藻等均可在琼脂培养基上形成单体藻落，适时采取基面上形成的单体藻落，接入培养液中，即可达到纯种分离的目的。同时对目前藻种渡夏提出了保存的方法。     

扇贝育苗生产中的单胞藻饵料培养实用技术

单胞藻饵料在扇贝育苗生产中占有很重要的地位。在扇贝育苗中,目前尚未有完善的人工饵料和其他代用饵料,可以说有无单胞藻饵料直接关系到扇贝育苗的成败。本文是根据作者近十年在育苗场承担单胞藻饵料培养技术指导的实际工作经验归纳、总结而成。（－）选种及一组扩大选种一般在亲贝入地前2－3个月进行。种类要根据不同扇贝育苗时间来确定。以海湾扇贝（ArgoPeCtenirradians）育苗为例：海湾扇贝亲贝太地一般在三月初,由于此时水温较低,一级扩大培养一般先选一些低温种类如新月菱形藻（NitZSChiclisterium,硅藻类）。8701（l。hrysi…     

蛋白核小球藻浓缩制品低温保藏技术研究

本研究以离心和重悬工艺获得的蛋白核小球藻(Chlorella pyrenoidosa)浓缩藻膏(8×10¹⁰ cells/mL)和浓缩藻液(1×10⁸ cells/mL)为研究对象,系统评价了巴氏杀菌以及保藏温度[室温(25℃)和4℃]对短期避光保藏下细胞相对活性和营养保持率的影响。结果显示,巴氏杀菌处理会引起2种蛋白核小球藻浓缩制品褐变,室温保藏会加速其腐败。浓缩制品可在4℃低温下直接保藏15 d,浓缩藻膏中总叶绿素、总类胡萝卜素和蛋白质含量分别为保藏前的97.20%、100.00%和98.20%;浓缩藻液中总叶绿素、总类胡萝卜素和蛋白质含量无变化,均与保藏前的含量相同。本研究还建立了荧光探针法检测蛋白核小球藻细胞活性的最优条件:细胞浓度为2.6×10⁵ cells/mL,二醋酸荧光素工作浓度为60μmoL/L,染色时间为30 min。结果显示,4℃条件下直接保藏15 d后,浓缩藻膏和浓缩藻液的细胞相对活性分别为保藏前的48.26%和61.36%。本研究建立的蛋白核小球藻浓缩制品的低温保藏技术,为微藻新鲜浓缩制品的下游水产应用提供了重要技术支撑。     

螺旋藻藻种保藏方法

１固体保藏法１．１固体培养基配制方法　将培养基各常量成分按一定顺序加入水中溶解后，加微量元素，再加２％的琼脂凝固剂，溶化后，分装入直径为 １５ｍｍ左右的玻璃试管内。培养基高 ３．５～４． ５ ｃｍ。试管口塞好棉花塞，捆成把。试管顶端用牛皮纸或其他有一定防水能力的纸捆好。放入电热式蒸汽消毒器内灭菌，灭菌压力为０． １ＭＰａ，灭菌３０分钟。灭菌后取出试管，试管口端放在一定高度的物体上，让试管内培养基呈一定斜面，上端不能接触试管口，下端不能离开试管底。使斜面长度适中，太长，斜面薄，时间长，易干裂；斜面太短…     

坛紫菜丝状体种质保存技术的研究

采用液体培养基、固体培养基以及胶囊化冷冻法保存坛紫菜丝状体种质，探讨了不同保存条件对其生存的影响。结果表明：液体培养基保存丝状体，在低温5℃，培育30d时，藻丝的增重率为-0．67％；温度为10℃，有利于延长更换培养液的时间，即使120d不换培养液，丝状体也能正常生长。固体培养基保存丝状体，在5℃时固体平板上的细菌生长慢、数量少，但藻丝无法适应低温条件，逐渐死亡；丝状体在10℃固体平板上生长缓慢，但保存100d以上仍然正常生长，达到了长期保存的目的：在胶囊化低温保存中，丝状体存活率较高，而且随着保存时间的延长，成活率没有显著的变化，保持在75％以上。     

短期内大规模培养单胞藻的方法

<正> 在对虾、河蟹、贝类育苗中,离不开单胞藻的培养,特别是贝类育苗中,需求量更大。有些单位经常出现单胞藻供不应求,饵料短缺的现象。本人根据多年的经验以新月菱形藻为例介绍在短期内大规模培养单胞藻的方法,以供大家参考。 新月菱形藻对温度,盐度适应范围很广。在5～28℃,含盐量为18‰～61.5‰的范围内     

海带发酵液的制备及其对单胞藻生长的作用

用酿酒酵母（Saccbaromyces cerevlsiae）和醋酸醋杆菌（Acetobacter aced）发酵海带,将发酵液作为添加剂加入盐藻（Dunaliellasalina）、新月菱形藻（Mtzsehia closteztuma）基本培养液（F／2培养液）中,定期计数以检测其生长状况。结果表明：海带发酵液对盐藻和新月菱形藻2种单胞藻生长具有促进作用。发酵液体积分数分别为2．5％和5％时,盐藻生长状况相似,而新月菱形藻则是在发酵液体积分数为2．5％时生长旺盛。     

单胞藻超滤浓缩技术的研究

采用超滤技术对球等鞭金藻进行浓缩,比较不同操作压力对浓缩机滤水率及单胞藻活性的影响。操作压力分别为0.02、0.06、0.10、0.16、0.20 MPa对单胞藻进行浓缩,并对不同浓缩时间的浓缩藻进行再培养。结果表明,浓缩机的滤水率随着压力的增大而增大;当压力为0.16 MPa时,滤水率最高,浓缩密度最大,且不影响浓缩藻的细胞活性。     

合浦珠母贝对不同种类及浓度的单胞藻摄食与消化效果研究

从单胞藻粒径大小、表面结构、生化组成及饵料浓度等角度开展了合浦珠母贝(Pinctada fucata)对不同种类及浓度的单胞藻摄食与消化效果研究。投喂粒径大小相近的牟氏角毛藻(Chaetoceros muelleri)和湛江叉鞭金藻(Dicrateria zhanjiangensis)混合藻,粒径大小不同的亚心形扁藻(Platymonas subcordiformis)和海水小球藻(Marine chlorella)混合藻,用细胞计数法检测剩余混合藻中各单胞藻浓度。分别投喂以上4种不同浓度梯度的单胞藻,观察比较粪便中单胞藻消化状况。结果显示,合浦珠母贝对粒径大小相近的单胞藻没有表现出明显的选择性摄食(P0.05),对粒径较大的单胞藻摄食率明显高于粒径较小的单胞藻(P0.05);随着投喂单胞藻浓度的升高,合浦珠母贝对单胞藻的消化程度降低。     

球等鞭金藻8701的耐低温机理

对耐低温品系球等鞭金藻８７０１在低温下与活性氧清除和伤害有关的几个生理生化指标进行了研究，探讨了其耐低温机理，并与该藻种的低温敏感品系球等鞭金藻３０１１进行了比较，结果表明，（１）球等鞭金藻８７０１在低温下（８℃）培养一周，其超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性略有下降，但仍保持极高的酶活性，因此能够及时清除低温胁迫产生的过量活性氧，使其细胞内保持较低的膜脂过氧化水平和较低的电解质外渗率,（２）球等鞭金藻３０１１在低温下胁迫一周，其细胞内的膜脂过氧化水平和电解质在率大大高于球等鞭金藻８７０１，这与其ＳＯＤ活性较低，并且在低温下其活性大幅度下降有关，（３）与ＤＯＤ相比，两种不同品系球等鞭金藻的过氧化物酶（ＰＯＤ）对减轻其低温伤害，提高其耐低能力，不起主要作用。     

亚心形扁藻超滤浓缩技术研究

为了研究在亚心形扁藻(Platymonas subcordiformis)进行浓缩时,不同操作压力对单胞藻饵料浓缩机滤水率、藻细胞浓缩密度和藻细胞活性的影响,采用超滤技术,在操作压力分别为0.02、0.06、0.10、0.16、0.20 MPa的条件下,利用单胞藻饵料浓缩机对亚心形扁藻进行浓缩,并对不同浓缩时间的浓缩藻进行再培养。结果表明,随着压力的增加,浓缩机滤水率和藻细胞浓缩密度逐渐增大,压力为0.20 MPa时,浓缩机的滤水率最大、浓缩密度最大,浓缩8 h后,藻细胞密度最大,为(4.98±0.14)×10⁶ cells/mL;浓缩后藻细胞繁殖速度较快,超滤对藻细胞活性影响较小。     

我国大菱鲆苗种生产现状及存在问题（下）

(二)生物饵料培养与强化技术 1.植物饵料的培养技术:我们在轮虫培养、轮虫的营养强化和早期仔鱼培育过程中都要使用单胞藻,目前最常用的单胞藻是小球藻和等鞭金藻,Howell(1979)认为:在大菱鲆育苗过程中使用等鞭金藻,仔鱼的成活率比较     

单胞藻培养中敌害生物的防治

<正> 单胞藻是鱼、虾、蟹幼体的基础饵料,是贝类幼体的优良开口饵料。在单胞藻的大量生产中经常会由于敌害生物的污染和危害,造成生产不稳定,不能保证育苗生产中活饵料的持续供应,从而影响经济苗种的产量。笔者通过几年的实践,总结出几点经验,仅供参考。 1 保种期间 1.1 藻种必须“纯”:大部分生产单位的藻种是由一些科研单位购入,为确保“纯种”,应该再次进行藻种分离,使后期的培养有较大的保     

黄边糙鸟蛤幼虫对9种单胞藻的摄食与消化研究

为确定黄边糙鸟蛤(Trachycardium flavum)幼虫生长发育时期的合适饵料,研究了幼虫对9种单胞藻的摄食与消化效果。用浓度为105个·m L-1的9种单胞藻分别饲喂2、6、10、14和18日龄幼虫,1 h后观察幼虫摄食情况,对已摄食单胞藻的幼虫过滤冲洗后转移至过滤海水中观察其消化效果。结果表明,幼虫在所有日龄都能摄食小球藻(Chlorella vulgaris)、微绿球藻(Nannochloropsis oculata)、绿色巴夫藻(Pavlova viridis)、湛江叉鞭金藻(Dicrateria zhanjiangensis)和球等鞭金藻(Isochrysis galbana),6日龄开始摄食杜氏盐藻(Dunaliella salina),14日龄摄食亚心形扁藻(Platymonas subcordiformis)和三角褐指藻(Phaeodactylum tricornutum),18日龄摄食牟氏角毛藻(Chaetoceros muelleri);但对小球藻和微绿球藻较难消化,水体中单胞藻投喂过多使单胞藻不消化或不完全消化。因此,在幼虫培育中应选择容易摄食和消化的绿色巴夫藻、湛江叉鞭金藻和球等鞭金藻作为开口饵料并遵循少量多次的投喂原则。     

大西洋鲑循环水养殖水体异养细菌组成的研究

采集养殖池水样,选取Zobell 2216E琼脂培养基、溶菌肉汤琼脂培养基、硫代硫酸盐柠檬酸盐胆盐蔗糖琼脂培养基、脑心浸液琼脂培养基、胰蛋白胨大豆琼脂培养基、营养琼脂培养基6种常见固体培养基进行细菌分离培养,以平板菌落计数法和菌落外观形态特征辨别及16SrRNA基因测序方法进行异养菌计数和种类组成分析。结果显示:(1)养殖池水体异养菌可分为4大类,分别属于变形菌门(包括α-、γ-变形菌纲)、厚壁菌门、拟杆菌门、放线菌门,其中以γ-变形菌纲为优势菌群。按属分类大多为假交替单胞菌属和弧菌属。(2)不同培养基分离菌落数量2216E培养基溶菌肉汤琼脂培养基胰蛋白胨大豆琼脂培养基脑心浸液琼脂培养基营养琼脂培养基硫代硫酸盐柠檬酸盐胆盐蔗糖琼脂培养基,且2216E培养基菌落数极显著高于其余5种培养基(P0.01);2216E培养基所分离细菌的种类最多,分属于12个属,假交替单胞菌属为优势类群,占比50%,弧菌属仅占3.13%;脑心浸液琼脂培养基、溶菌肉汤琼脂培养基、胰蛋白胨大豆琼脂培养基所分离细菌均以弧菌属为优势菌群,分别占33.33%、60%、25%;硫代硫酸盐柠檬酸盐胆盐蔗糖琼脂培养基所分离细菌仅分属于1个属,即弧菌属;营养琼脂培养基无弧菌,但有假单胞菌分离出。     

锯缘青蟹幼体饵料培养技术

锯缘青蟹规模育苗生产过程中,对其适口饵料的培养事关重要,是优质健康苗生产成活率高低的一个关键所在。几年来,我们通过青蟹幼体(指从蚤状幼体→大眼幼体→稚蟹育成)培育的适口饵料培养技术的探索和研究,基本掌握了与育苗相关联、相配套的藻类、轮虫、卤虫、桡足类等优质生物饵料的培养条件及水质调控等关键技术,现作一简述,供从事该项苗种生产的同行参考。一、材料与方法1.单胞藻种:一般取自宁波大学藻种室(经过提纯),一级培养采用1000～5000毫升三角烧瓶或广口瓶;二级培养采用30000毫升尼龙袋;三级培养采用藻种室单胞藻培养池,每只池面积…     

单胞藻静置保种技术研究

首次采用静置保种法在高温期和低温期对扁藻、小球藻、金藻８７０１、金藻３０１１及小硅藻进行培养，生长情况良好。用此法保种培养的单胞藻饵料，分别在１４０ｍ＾２育苗水体中育出三倍体太平洋牡蛎苗种３０００多万粒和加拿大海湾扇贝苗种２０００多万粒。设想用此法驯化胞藻耐高温、低温及其它恶劣环境的能力。