猪流行性腹泻病毒株的建立与应用

猪流行性腹泻病毒ＰＤＥ－Ｇ１病毒株是从广东省表现为流行性腹泻病的某猪场的病猪病料中分离获得。在每毫升维持流中加６０微克胰酶，将ＰＥＤＶ分离接种于Ｖｅｒｏ传代细胞上培养２４－４８小时，Ｖｅｒｏ细胞吾现细胞融合、形成合胞体等特征的细胞病变。经动物回归、电子显微镜观察、血清学方法、理化性质测定以及病毒核酸鉴定等方法检验，确定分离物为冠状病毒科中的猪流行性腹泻病毒。     

杆状病毒表达猪传染性胃肠炎病毒钉状蛋白在血清学诊断上的应用

用从猪传染性胃炎病毒（ＴＧＥＶ）强毒Ｍｉｌｌｅｒ株（Ｍ５Ｃ）克隆建立的一株的重组杆状病毒（Ｒ２－２）表达的重组ＴＧＥＶ钉状糖蛋白（Ｓｐｉｋｅ，Ｓ）建立了一种阻断酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）来检测猪群中抗ＴＧＥＶ抗体。实验表明，用重组病毒Ｒ２－２接种昆虫传代细胞系Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ（ｓｆ９），所表达的重组蛋白量在接种后第７２小明达到最高值；该重组蛋白能与抗ＴＧＥＶ Ｓ蛋白Ａ     

三种ELISA方法检测苹果褪绿叶斑病毒和苹果茎沟病毒的比较

苹果褪绿叶斑病毒（ＡＣＬＳＶ）和苹果茎沟病毒（ＡＳＧＶ）是感染苹果和其它一些果树的重要病毒。作者应用ＰＡＳ－ＥＬＩＳＡ法成功地检测了苹果组培苗中的这两种病毒。为了简化操作步骤,试验了ＤＡＳ－ＥＬＩＳＡ和改良ＤＡＳ－ＥＬＩＳＡ法,并与ＰＡＳ－ＥＬＩＳＡ的检测结果比较。试验结果表明,ＤＡＳ－ＥＬＩＳＡ能检测出ＡＳＧＶ,却不能检测出ＡＣＬＳＶ,与此同时,这两种病毒均可用改良ＤＡＳ－ＥＬＩＳＡ检测。ＤＡＳ     

用ELISA法快速检测沙门氏菌

我们试验一种新的快速检测沙门氏菌的方法，这种方法是使用酶联免疫吸附（ＥＬＩＳＡ），直接从增菌培养液中检测沙门氏菌。在检测的９４个鱼粉（肉骨粉）样品中，我们同时使用快速检测法和常规细菌学检测法，结果是阳性符合率为９２％，阴性符合率为１００％，总符合率９８％以上。使用快速检测法，最快可以在２７ｈ有结果，而常规的细菌学检测方法最快要７２ｈ才有结果，大大缩短了检测的时间。     

水分胁迫对冬小麦愈伤组织质膜ATP酶和5′—核苷酸酶活性？…

以不同抗旱性冬小麦品种花８４（抗旱）和冀麦２４（不抗旱）幼胚来源的愈伤组织为实验材料,用不同浓度的ＰＥＧ－６０００分别模拟不同强度的水分胁迫（１０％ＰＥＧＷ／Ｖ,－０．８７ＭＰａ;２０％ＰＥＧＷ／Ｖ,－１．９２ＭＰａ）,进行２４ｈ短期液体培养基培养（胁迫）,测定其质膜ＡＴＰ酶和５′－核苷酸酶活性的变化。试验结果表明,在两品种中,两 麦的活性随胁迫强度的增加均呈现“先降后升”的变化,即轻度胁迫时,酶     

番茄环斑病毒单克隆抗体细胞株的建立及检测方法的研究

用纯化的番茄环斑病毒（ＴｍＲＳＶ）免痊Ｂａｌｂ／ｃ小白鼠，取脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞融合。筛选出６株分泌ＴｍＲＳＶ单克隆抗体（ＭｃＡｂ）杂交瘤细胞株。抗体免疫球旦白分属于１ｇＧ２ａ，ＩｇＧ３和１ｇＭ。用免疫电镜诱捕法检测，６个ＭｃＡｂ与加拿大分离物反应均为阳性，其中ＣＥ３，ＣＧ８，９Ｇ９不与西德分离物反应。属于１ｇＧ３的单抗具有与Ａ旦白结合的特性。     

灰斑古毒蛾核型多角体病毒结构多肽及核酸的研究

多角体蛋白结构多肽分析结果表明，ＯｅＮＰＶ多角体中可能有碱性蛋白酶存在；纯化病毒粒子ＳＤＳ－ＰＡＧＥ胶板用考马斯亮蓝和银染法分别检出１８和２２种多肽，分子量范围１．０８×１０４～１２．２×１０４Ｄ，其中５种主要多肽；核衣壳检出５条多肽，主要多肽分子量为３１０００±６５０Ｄ；ＰＡＳ法未检出ＯｅＮ－ＰＶ各结构多肽中有糖蛋白存在；ＯｅＮＰＶ－ＤＮＡ经ＥｃｏＲＩ、ＨｉｎｄⅢ、ＢａｍＨＩ单酶解分别产生９、１２、１０个片段，经ＥｃｏＲＩ／ＨｉｎｄⅢ双酶解产生２０个片段，求得ＯｅＮＰＶ－ＤＮＡ的平均分子量为６５．８×１０６Ｄ，ＯｅＮ－ＰＶ－ＤＮＡ大多呈缠绕卷曲线形分子，少数为环状分子，平均长度１９．７μｍ。     

梨中AVERMECTIN B1残留的酶联免疫吸附测定

本文建立了检测梨中Ａｖｅｒｍｅｃｔｉｎ Ｂ１的间接竞争酶联免疫吸附测定法（ＥＬＩＳＡ）。以结合物４″－Ｏ－（单）琥珀酰Ａｖｅｒｍｅｃｔｉｎ Ｂ１－ＢＳＡ免疫家兔，制备特异性针对Ａｖｅｒｍｅｃｔｉｎ Ｂ１的多克隆抗体。梨样本经甲醇提取后用ＥＬＩＳＡ检测。在６．０￣６０ｍｇ／ｋｇ添加浓度范围内，Ａｖｅｒｍｅｃｔｉｎ Ｂ１的回收率为８６％￣１０５％，变异系数（ＣＶ）为４％￣８％。样本检测限为０．１ｍｇ／     

黄瓜花叶病毒运动蛋白基因及其缺失突变体在大肠杆菌中的表达和表达产物的纯化

利用ＣＭＶＦｎｙ 株系ＲＮＡ３ 全长ｃＤＮＡ 克隆, 构建了运动蛋白（ＭＰ） 基因５′端缺失突变体和３′端缺失突变体的原核表达载体。ＳＤＳ－ ＰＡＧＥ 分析表明, 经ＩＰＴＧ 诱导, ＭＰ 基因及其２ 种缺失突变体均能在大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３） ｐＬｙｓＳ中高效表达。利用分离包含体的方法, 提纯了全长的及Ｃ 端缺失的ＭＰ。光密度扫描分析表明, 提纯产物的纯度达９６ ．６ ％ 。     

中国棉铃虫核型多角体病毒VHA273毒株的克隆及基因组物理图谱

利用ＨＺ－ＩＢ３细胞对中国棉铃虫核型多角体病毒（ＨａＮＰＶ）ＶＨＡ２７３毒株进行了三轮空斑纯化，得到一个克隆株Ｈ９。电镜观察表明，此克隆株Ｈ９为单粒包埋核型多角体病毒（ＳＮＰＶ）。Ｈ９的基因组ＤＮＡ经限制性内切酶ＢｇｌＩ，ＨｉｎｄⅢ，ＰｓｔＩ，ＸｈｏＩ，ＥｃｏＲＩ，ＢａｍＨＩ，ＫｐｎＩ，ＢｓｔＥⅡ完全酶切后分别产生１０，１３，７，６，２７，１１，６和１２条片段，以λＤＮＡ／ＥｃｏＲＩ－ＨｉｎｄⅢ双酶切片段和ＨｉｇｈＭｏｌｅｃｕｌａｒＷｅｉｇｈｔＤＮＡＭａｒｋｅｒｓ为标准作工作曲线，求出了各限制性内切酶片段的大小。实验测得ＨａＮＰＶ－Ｈ９基因组的大小为１２９．９６ｋｂ，分子量为８５．７７×１０６，表明Ｈ９不同于其它已报道的ＨａＳＮＰＶ。利用单、双酶混合酶切分析和部分酶切分析，通过逻辑推导，完成了Ｈ９基因组ＤＮＡ的ＰｓｔＩ和ＸｈｏＩ各单酶解片段的重叠和延伸，最终构建了Ｈ９基因组ＤＮＡ的ＰｓｔＩ、ＸｈｏＩ的物理图谱     

福建西番莲病毒病的发生及其病原黄瓜花叶病毒亚组鉴定

１９８８－１９９５年对福建西番莲病毒的发生为害进行调查,发现在西番莲栽培区病毒病普遍发生,发病率通常在３０－４０％,严重的达９０％以上,田间症状主要表现为叶片环斑、皱缩、花叶、环斑花叶、死面和果实木质化等。从田间病株采集４０份样本,经电镜观察和采用Ａ蛋白夹心ＥＬＩＳＡ（ＰＡＳ＿ＥＬＩＳＡ）,用西番莲化木质病毒ＰＷＶ）,西番莲黄花叶病毒ＰＦＹＭＶ）、紫果西番莲花叶病毒（ＧＭＶ）、烟草花叶病毒（ＴＭＶ     

甘薯无病毒苗培育技术研究

１９９１￣１９９６年,甘薯茎尖离体培养采用ＭＳ为基本培养基,添加６－苄基氨基嘌呤（６－ＢＡ）０．５ｍｇ／Ｌ＋萘乙酸（ＮＡＡ）０．２ｍｇ／Ｌ＋腺素（Ａｄ）５ｍｇ／Ｌ,培育出１２个甘薯品种的脱毒苗,茎尖培养成苗率５０．０％￣９５．６％,成苗期４３￣６０ｄ。切取的茎尖大小与脱毒效果呈显著的负相关（ｒ＝－０．９８７５）,茎尖带１个叶原基时,ＳＰＦＭＶ脱毒率为３８．１％,培养基中添加适量的植物病毒钝化剂可使     

枣尺蠖核型多角体病毒增殖制备的研究

枣尺蠖核型多角体病毒增殖制备的研究邢同（山东省无棣县棉花生产办公室，２５１９００）ＳＴＵＤＩＥＳＯＮＴＨＥＰＲＥＲＡＲＡＴＩＯＮＯＦＴＨＥＮＵＣＬＥＡＲＰＯＬＹＨＥＤＲＯＳＩＳＶＩＲＵＳＯＦＳＵＣＲＡＪＵＪＵＢＡ［ＬＥＰ．：ＧＥＯＭＥＴＲＩＤＡＥ］Ｘ...     

应用单克隆抗体检测香蕉束顶病

应用香蕉束顶病毒（ＢＢＴＶ）的单克隆抗体（ＭｃＡｂ）建立了检测香蕉束顶病的间接ＥＬＩＳＡ方法，其检测香蕉病组织汁液的最大稀释度为１：１２８０，健康香蕉组织汁液无非特异性反应。用间接ＥＬＩＳＡ方法检测了采自广东、广西９个市（县）的香蕉产区的８０个大田香蕉束顶病样本和２５个荫棚香蕉试管苗样本，其中大田样本ＢＢＴＶ的带毒率为７６．５％，试管苗样本的带毒率为８．０％。香蕉束顶病株不同部位ＢＢＴＶ含量检测表     

德国2000年蜂蜜农药残留监控情况

类别被检测物质仪器方法检测限（μｇ /ｋｇ）检测样品数（个）杀虫剂氟氯苯菊酯氟胺氰菊酯双甲脒蝇毒硫磷高效液相色谱气 -质、气相色谱 (ＥＣＤ)气相色谱 (ＥＣＤ)气 -质、气相色谱 (ＥＣＤ)＜２＜１０＜６５＜３３９０９０９０７３杀螨剂溴螨酯乙酯杀螨醇气 -质、气相色谱 (ＥＣＤ)气 -质、气相色谱 (ＥＣＤ)＜３３＜３３９０７３杀菌剂ｃｙｍｉａｚｏｌ气 -质＜３８０９０磺胺类抗菌物质 磺胺嘧啶磺胺二甲嘧啶磺胺二甲氧嘧啶磺胺甲氧哒嗪液质联机液质联机液质联机液质联机＜２０＜２０＜２０＜２０９０抗生素链霉素土霉素金霉素脱氧土霉…     

抚宁县玉米矮花叶病造成玉米严重减产

抚宁县玉米矮花叶病造成玉米严重减产玉米矮花叶病（ＭＤＭＶ）在河北省抚宁县逐年加重，１９９５年全县１万ｈｍ２春玉米普遍发病。病株率在２０％以上的重病田占８．７％，病株率５％～２０％的占５０．６％。作者在沈单７号玉米矮花叶病显症（玉米拔节期）时用红漆涂茎...     

灰斑古毒蛾核型多角体病毒毒力的生物测定及田间防治

本文报道了灰斑古毒蛾核型多角体病毒（ＯｅＮＰＶ）毒力的生物测定和田间防治试验的结果。ＯｅＮＰＶ对２～３龄幼虫的ＬＣ５０为６．９３×１０４ＰＩＢ／ｍＬ。浓度为６×１０７ＰＩＢ／ｍＬ、６×１０６ＰＩＢ／ｍＬ、６×１０５ＰＩＢ／ｍＬ的ＬＴ５０分别为４．６天、５．１天和６．０天。不同龄期的幼虫对ＯｅＮＰＶ的敏感性存在明显差异，低龄虫更为敏感。田间喷施６×１０６～６×１０８ＰＩＢ／ｍＬ的ＯｅＮＰＶ水悬液１０天的防效达８２．４０％～８６．０７％。病毒悬液中添加１％甲基纤维素和０．０５％ＭｇＳＯ４可提高田间防治效果     

一种新型病毒检测技术

一种新型病毒检测技术（河北农业技术师范学院河北昌黎０６６６００）刘品贤有关植物病毒的诊断和鉴定方法是很多的，常用的有免疫扩做法、凝聚法、酶联免疫鉴定法（ＥＬＩＳＡ）、荧光抗体法、直接荧光诊断法（ＤＦＤ）、免疫吸附电镜法等。应用上述方法对病毒进行检测，...     

莠去津在土壤及作物中残留量测定

本文建立了一种土壤和作物中痕量莠去津的高效液相色谱分析方法,比较了超声波提取与振荡提取的回收率,研究了弗罗里硅土净化效果。以甲醇：水（８０／２０,Ｖ／Ｖ）为流动相,检测波长２３５ｎｍ,在ＯＤＳ柱上实现了莠去津与杂质的良好分离。方法简单,分析速度快,测定费用低,检测限为２４ｎｇ／ｇ,回收率为９５％～９７％。     

湖北省白肋烟病毒病调查及其鉴定

１９９５～１９９６年调查表明,湖北省五峰、建始、恩施县（市）白肋烟主产区为花叶和黄花病毒病流行区。１９９５年花叶类型发病率为１０％～９０％,平均３０％以上;黄化类型１０％～３０％,平均２０％左右,蚀纹病在３县（市）零星发生。１９９６年各产区病害比１９９５年轻,以花叶病害为主。经血清鉴定明确,花叶类型病害、黄化类型病害和蚀纹病分别由黄瓜花叶病毒（ＣＭＶ）、马铃薯Ｙ病毒（ＰＶＹ）和烟草花叶病毒（ＴＭＶ）引起。ＣＭＶ为侵染白肋烟的主要病毒。这是湖北省白肋烟病毒病调查与病毒鉴定的首次报道。