有水与无水保活运输对大菱鲆生理应激及鱼肉品质的影响

探究珍珠龙胆石斑鱼 (Epinephelus fuscoguttatus ♀×E. lanceolatus ♂) 最佳暂养温度,可为该鱼的保活流通提供理论依据。以0.5~1.0 ℃·h⁻¹的速率将石斑鱼的暂养水温降至24、20、18和16 ℃,观察降温过程中石斑鱼的生理反应,测定暂养过程中的水质变化及鱼体保活时间、非特异性免疫和抗氧化等指标。结果显示,在24~16 ℃时石斑鱼的存活时间随暂养温度的降低呈上升趋势,水温维持在16 ℃时,水体中总氨氮 (TAN) 质量浓度增速较缓,鱼体存活时间最长 (109 h)。不同水温下暂养48 h后,鱼体非特异性免疫和抗氧化能力均受到不同程度的影响。与暂养前相比,16 ℃组石斑鱼血清非特异性免疫指标中补体蛋白3 (C3)、球蛋白 (GLB) 和总蛋白 (TP) 质量浓度显著上升,其余指标均无显著变化;肝脏组织中超氧化物歧化酶 (SOD) 和过氧化氢酶 (CAT) 活性显著升高,谷胱甘肽过氧化物酶 (GPx) 活性显著降低,但明显高于其他温度组,丙二醛 (MDA) 水平显著低于其他温度组。16 ℃暂养不仅能保持较好的水质,同时也能降低鱼体代谢水平,维持机体内环境稳态,从而降低氧化应激反应造成的损伤,适合作为珍珠龙胆石斑鱼的暂养和运输温度。     

低温下大菱鲆有水和无水保活过程中生理生化变化的研究

研究了3±0.1℃保活条件下大菱鲆有水和无水状态下的成活率和生理生化指标的变化.结果表明,(1)大菱鲆有水保活72h成活率达到100%,无水保活60 h成活率为95%.(2)保活过程中大菱鲆肌肉中的ATP含量明显下降,而且无水保活的大菱鲆肌肉中ATP含量低于有水保活的.(3)保活过程中,大菱鲆血液指标MCV、BUN、CR和UA有随保活时间增加而升高的趋势,血液指标GLU、CHE有随时间增加而下降的趋势.有水保活的大菱鲆血液中BUN、CR、UA和GLU显著低于无水保活.通过对大菱鲆血液的生理生化指标分析,保活过程中大菱鲆死亡的原因之一是代谢产物不能有效排出,体内氨氮类有害物质含量过高.     

鱼袋保活中团头鲂存活率和肌肉品质的变化

为促进活鱼电商物流的发展,本试验采用鱼袋保活运输团头鲂,研究了保活条件对存活率的影响,以及保活过程中血液应激指标、肌肉品质的变化。结果显示：当运输环境温度为10 ℃,鱼水质量比为1∶3,运输中使用水为曝气自来水时,鱼体存活率最高。在保活过程中,团头鲂血液的应激指标均呈现波动性变化趋势。但是,整体上,皮质醇、尿素和丙二醛含量先增加后降低;乳酸脱氢酶含量先降低后增加;超氧化物歧化酶含量逐渐降低;过氧化氢酶、天冬氨酸转移酶和肌酐含量逐渐增加。在肌肉品质方面,白度值、剪切力、滴水损失整体上呈现先增加后降低的趋势;与0 h相比,保活72 h后粗蛋白、乳酸和糖原含量分别下降了19.0%、27.2%和50.0%;鲜味和苦味核苷酸类物质以及鲜度值K整体上均呈现逐渐增加的趋势;肌纤维间隙随保活时间的延长而逐渐增大。研究表明,在保活过程中,鱼体受到持续的应激,肌肉品质劣变。本研究可为鱼类的电商活运提供理论依据。     

热应激对大菱鲆心肌损伤及细胞凋亡的影响

为解析热应激对大菱鲆心脏损伤及其机制,实验从组织形态、生理生化反应及凋亡基因表达等多个水平,分别使用H.E染色法、电镜观察法、酶活性检测法、qPCR检测基因表达法开展了本研究。结果显示,随着温度升高,心肌纤维肿胀,断裂,间质宽度增加,炎性细胞浸润,线粒体结构破坏等组织损伤现象加重,但在24°C-24 h时组织损伤明显减轻;CK活性随着热应激加剧显著升高;LDH、SOD活性,MDA含量在24°C时达到峰值,表明大菱鲆遭受到热应激,心肌防御酶发挥抵抗作用,维持机体稳态。qPCR显示,大菱鲆心肌细胞Bax基因和Caspase-3基因变化趋势一致,随着热应激的加剧,表达量降低,而Bcl-2基因逐渐升高。表明在热应激程度较轻时,大菱鲆心肌通过降低Bax、Caspase-3基因表达,促进抗凋亡基因Bcl-2的表达,减少心肌细胞丢失来减少热应激损伤。当热应激加剧至28°C时,热应激超过自身生理调节阈值,损伤加重,机体防御系统自身也受损,造成大菱鲆心脏结构严重损伤甚至机体死亡。研究表明,随着温度升高,大菱鲆心肌损伤加重,机体通过调节心肌防御酶活性以及使细胞凋亡,最大限度维持稳态,减少组织损伤。超过24...     

盐度对大菱鲆幼鱼生长和肌肉营养成分的影响

将平均体质量为(7.16±0.07)g的大菱鲆幼鱼分别饲养在不同盐度(12、18、24、30和36)的水体中60 d,以探讨盐度对幼鱼特定生长率、生长激素、成活率、摄食率、饲料效率和肌肉营养成分的影响。结果表明:大菱鲆幼鱼在盐度分别为18、24、30和36的水体中均生长良好,成活率为100%,特定生长率分别为1.97、1.87、1.87和2.00 %/d;在盐度为12的水体中,幼鱼的成活率和特定生长率均显著低于盐度30组(对照组)(P<0.05),分别为80.77%和1.45 %/d。生长激素为0.41～1.66 ng/mL时,盐度18和36组均显著高于盐度30组(P<0.05),而盐度12组显著低于盐度30组(P<0.05)。饲料效率为1.12%～1.38%时,盐度18、24和36组均显著高于盐度30组(P<0.05),而盐度12组显著低于盐度30组(P<0.05)。摄食率为1.19～1.28 %/d时,盐度12和24组均显著低于盐度30组(P<0.05),其它盐度组之间均无显著差异(P>0.05)。幼鱼特定生长率随血清生长激素和饲料效率的升高而增大,与盐度的相关性不显著。幼鱼肌肉中的粗蛋白质含量随水体盐度的升高而降低,除盐度12和18组之间无显著性差异外(P>0.05),其余各盐度组之间均存在显著性差异(P<0.05);盐度12组幼鱼肌肉中的粗脂肪低于其它盐度组,灰分显著高于其它盐度组(P<0.05),其余各盐度组之间粗脂肪和灰分均无显著性差异(P>0.05);各盐度组之间幼鱼肌肉中的水分均无显著性差异(P>0.05)。综上所述,适当降低盐度可改善大菱鲆幼鱼生长和肌肉品质,其适宜盐度为18。     

运输对水生动物生理生化的影响及活体运输方法的研究进展

综述了运输对水生动物生理生化指标的影响及其相关指标的变化规律,同时对几种水生动物的活体运输方法进行了总结.     

复合益生菌对大菱鲆生长指标、血液生理生化指标的影响

探讨复合益生菌对大菱鲆生长指标和血液生理生化指标的影响,结果表明复合益生菌作为饲料添加剂可以有效提高大菱鲆的增重率、特定生长率、饲料利用率,一定程度上影响了大菱鲆全鱼及背部肌肉的粗成分,但并没有影响大菱鲆血液生理生化指标。     

运输密度对团头鲂肌肉特性的影响

有水运输是实现团头鲂(Megalobrama amblycephala)跨地域调配的主要方式,运输密度是该方式的关键参数之一。本研究以团头鲂为原料,采用超高效液相色谱仪、质构仪、光学电镜等设备研究运输密度(鱼水质量比1∶1.0、1∶1.5、1∶2.0和1∶2.5)对团头鲂肌肉特性的影响,探寻在保证团头鲂品质情况下的最优运输密度。结果显示：随着运输密度的升高(1∶2.5～1∶1.0),鱼肌肉的pH和肌糖原呈现先降低后升高,乳酸逐渐增加,三磷酸腺苷、5′-二磷酸腺苷、5′-一磷酸腺苷含量无显著性变化。运输密度为1∶1.5时,鱼肌肉的白度值、剪切力、持水性最低,苦味物质(次黄嘌呤核苷、次黄嘌呤)总含量最高,细胞外间隙最大、破碎率最高。而当运输密度增加至1∶1.0时,鱼肌肉的白度值、剪切力、持水性有所升高、苦味物质总含量显著下降,肌肉细胞外间隙缩小、破碎率降低。综合肌肉品质和运输成本,鱼水比为1∶1.0是较适宜的运输密度。     

热应激处理对不同发育时期大菱鲆胚胎的影响

<正>对大菱鲆5个不同发育时期:桑椹期、低囊胚期、原肠晚期、胚孔关闭期和尾芽期分别进行热应激处理。设计温度为40℃和30℃,热应激处理3分钟。结果表明:40℃处理3分钟,所有胚胎在处理后全部死亡;30℃处理3分钟,无胚胎在处理后死亡,但是尾芽期胚     

水解蛋白替代鱼粉对大菱鲆生长及生理代谢的影响

分别以水解鱼粉及水解大豆浓缩蛋白全部替代饲料中的鱼粉,投喂体质量(58.50±0.65) g的大菱鲆(Scophthalmus maximus)幼鱼56 d,研究水解蛋白替代鱼粉对其生长及生理代谢的影响。结果表明:水解蛋白替代鱼粉降低了试验鱼的生长性能,提高了饲料系数,但对成活率无显著性影响;各组鱼的脏体比、肝体比和肠体比均无显著性差异;水解蛋白提高了肌肉中的水分含量,降低了粗蛋白含量;水解蛋白提高了血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活力,降低了总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、甘油三酯(TG)、胆固醇(TCHO)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量,而对血清中生长激素(GH)、三碘甲状腺原氨酸(T3)、己糖激酶(HK)含量没有显著性影响。水解鱼粉显著提高了血清中皮质醇(COS)、丙酮酸激酶(PK)含量,降低了补体3(C3)含量;水解大豆浓缩蛋白提高了免疫球蛋白M(IgM)含量,降低了去甲肾上腺素(NE)、丙酮酸激酶(PK)含量。研究表明,水解蛋白完全替代鱼粉会降低试验鱼的生长性能,造成肝脏功能受损,改变鱼体内分泌。     

Effect of triploidy on muscle cellularity and flesh quality of turbot (Scophthalmus maximus)

Production of triploid turbot is a relevant goal for the aquaculture industry due to the benefits associated with their sterility and growth. In order for a better understanding of the final quality of the species, muscle cellularity and quality parameters of the flesh were studied in seven diploid and seven triploid turbot after sexual maturation. White muscle cellularity was evaluated throughout white muscle cross‐sectional area from the epaxial left muscle section of each fish. To ascertain the flesh quality, several physico‐chemical parameters (moisture, ash, protein, total fat, fatty acids and minerals) were analysed, and textural mechanical properties (springiness, hardness, chewiness, cohesiveness, gumminess and adhesiveness) were determined objectively with a texturometer. Muscle cellularity was different between both groups, such that muscle fibre density was higher for diploid specimens (P < 0.001) and muscle fibres diameters were higher for triploids (P < 0.001). Both ploidy groups showed no significant differences in moisture, ash, protein and total fat content (P > 0.05). All textural properties analysed showed no significant differences between both ploidy groups (P > 0.05). In both ploidy groups, fibre density and fibre diameter showed no significant correlations (P > 0.05) with textural parameters such as springiness, cohesiveness, chewiness and adhesiveness. Ploidy did not affect fatty acid composition, with the exception of eicosapentaenoic acid (C_20:5ω3) which was higher in the triploid group. No significant differences (P > 0.05) existed between diploid and triploid turbot in content of all minerals analysed. According to our results, the ploidy status determines significant variations on muscle cellularity but does not influence the flesh quality of the turbot.     

环境胁迫对大菱鲆C-型凝集素功能的影响

大菱鲆C-型凝集素(SmLec1)是一种重要的免疫因子,本实验通过分析其活性特点以及环境胁迫对其表达调控的影响,探讨其在大菱鲆先天免疫应答过程中的潜在功能以及养殖环境中的应用。实验利用原核表达系统进行重组表达,并通过纯化获得19 ku重组目的蛋白;活性分析结果显示,SmLec1对所选6种细菌的凝集作用存在差异,其中对鳗弧菌和爱德华氏菌具有明显的凝集作用;在选取的8种糖类中,木糖、果糖、蔗糖、乳糖和甘露糖能够抑制SmLec1的凝集活性;在理化因子(pH、温度)中,pH7和温度37°C时对SmLec1的凝集活性产生抑制;鳗弧菌感染实验显示,感染6 h时肝组织的SmLec1表达量明显上升,在12 h时达到最高值,随后有所下降;温度胁迫时肝组织的SmLec1 m RNA表达量受到温度的影响显著,在19°C开始升高,22~27°C呈降低趋势,其他组织变化不显著。盐度胁迫对SmLec1在各盐度的表达量变化不显著。研究表明,SmLec1能够抑制鳗弧菌的感染,其表达受到温度的影响,本研究为进一步明确SmLec1蛋白的抗菌机理和探索对大菱鲆疾病的免疫学防治途径提供科学依据。     

大菱鲆脂质代谢相关基因PPARs的组织表达及其对高温胁迫的响应

为研究大菱鲆过氧化物酶体增殖物激活受体家族(PPARs)的组织分布和高温胁迫下PPARs在肾脏中的表达情况。实验采用荧光定量PCR(qPCR)技术检测PPARs基因3种亚型在大菱鲆不同组织中的表达情况以及高温胁迫下大菱鲆肾脏中PPARs的表达情况。qPCR结果显示,大菱鲆PPARs 3种亚型的组织分布存在显著差异。PPARα1和PPARα2在心脏中的表达量显著高于其他组织;PPARβ在大菱鲆的各个组织中普遍表达;PPARγ在大菱鲆的鳃中出现了显著性的高表达。大菱鲆肾脏中PPARs的mRNA水平随着温度升高呈现出不同的响应模式。PPARα随温度升高表达水平先显著降低,后有所升高;PPARβ的表达量在14、20、23和25℃时差异不显著,当温度升高至大菱鲆的致死温度28℃时,表达量出现了显著性的升高;PPARγ在14℃时表达水平很低,但随着温度的升高不断增加。研究表明,大菱鲆中存在PPARα、PPARβ和PPARγ3种亚型,而且三者可能以组织特异性的方式参与脂质代谢的调节,首次指出PPARs 3种亚型在温度胁迫中的表达变化,对PPARs的研究将推动鱼类脂代谢研究,揭示鱼类PPARs在脂质代...     

皂角苷对大菱鲆血细胞的溶血作用

通过显微观察初步测定了不同浓度皂角苷(2.5、5、12.5、25、50、125 mg/L)融解大菱鲆红细胞的时间及其对白细胞的裂解作用;比较了4℃与20℃条件下,不同浓度皂角苷(2.5、5、12.5、25、50 mg/L)在体外对大菱鲆血细胞的溶血活性;用不同浓度的皂角苷溶液浸浴大菱鲆,得出皂角苷对大菱鲆的半致死浓度;同时分析了不同浓度皂角苷(0、5、25、45 mg/L)浸泡大菱鲆后血液中乳酸脱氢酶(LDH)活力变化。结果显示,显微观察实验中红细胞溶血时间与皂角苷浓度呈对数负相关(R2=0.982 5),皂角苷对大菱鲆白细胞也具有细胞裂解作用;50mg/L的皂角苷在20℃条件下5 min即可导致血细胞100%溶血,而4℃时处理相同时间仅为42.2%;皂角苷对大菱鲆的24 h半致死浓度(24h LC50)为64.85 mg/L。本研究的结果从细胞水平上初步评价了皂角苷的溶血毒性,为其安全使用提供了理论支持。     

Centromere-linkage in the turbot (Scophthalmus maximus) through half-tetrad analysis in diploid meiogynogenetics

Seventy nine microsatellite markers selected across all linkage groups (LG) from a previous turbot genetic map were studied in a diploid meiogynogenetic family for centromere mapping using half-tetrad analysis. Significant deviations from Mendelian segregation were observed at 25% loci analyzed. The clustering of distorted loci at specific LGs, suggested the existence of genes of different deleterious effects. The lack of Mendelian segregation distortion at 1 day and 10 days post-hatching larvae at these loci precluded an explanation based on aberrant meiotic segregation. Heterozygote frequency distribution in gynogenetic offspring showed close to 50% values above 0.667, which suggested high chiasma interference in turbot. Complete interference appeared as the best fitting function when estimating centromere position. However, Kosambi and Haldane functions performed better at specific LGs as a consequence of the variable crossover pattern of centromere-distant markers among LG. Great concordance between half-tetrad data and the positions previously reported in the turbot map was observed. Most centromeres were localized with an error around or below 5 cM and closely linked markers exist now in 8 LGs. Centromere location was mostly in accordance with previous karyotypic information.     

硒对铜胁迫下大菱鲆幼鱼生长、抗氧化能力及相关基因表达的影响

为探讨硒对铜胁迫下大菱鲆幼鱼生长、抗氧化能力及相关基因表达的影响,以初始体质量为(24.85±0.10) g的大菱鲆为研究对象,通过在饲料中添加五水硫酸铜和亚硒酸钠,配制铜、硒含量分别为(0、0,1 000、0,1 000、2,1 000、4 mg/kg) 4种等氮等能的实验饲料,命名为D1、D2、D3和D4组。养殖实验持续84 d。结果显示:①各组间实验鱼成活率无显著差异;增重率、特定生长率和蛋白质效率均在D2组显著低于D1、D3和D4组;摄食率和饲料系数呈相反趋势,在D2组显著高于其他3组。②幼鱼全鱼和肝脏粗脂肪含量呈先下降后上升趋势;而背肌粗蛋白和粗脂肪含量在各组之间无显著性差异。全鱼、脊椎骨和肝脏中Cu含量在D2组达到最高值;Zn含量则在D4组达到最高值;肝脏中铁含量呈下降趋势,在D3和D4组显著低于D1和D2组。③D2组显著降低了幼鱼血清总抗氧化能力(T-AOC)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性;丙二醛(MDA)含量则呈相反趋势,在D2组显著高于D3和D4组;总超氧化物歧化酶(T-SOD)和铜—锌超氧化物歧化酶(CuZn-SOD)活性均在D4组达到最低值。④血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性均在D2组显著高于其他3组;而血糖浓度、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)活性均在D2组达到最低值,显著低于D1组。⑤肝脏金属硫蛋白(MT) mRNA相对表达量在D4组达到最高值,显著高于其他3组;谷胱甘肽转移酶(GST)和溶菌酶(LZM) mRNA相对表达量均在D2组显著低于其他3组;热休克蛋白70 (HSP70) mRNA相对表达量则在D2组显著高于其他3组。综上所述,在本实验条件下,饲料中添加硒(2～4 mg/kg)可缓解高铜(1 000 mg/kg)胁迫导致的鱼体生长缓慢等症状,并可调控鱼体的抗氧化能力、生理代谢及相关基因表达量,进而对鱼体在高铜胁迫下的内环境稳态恢复具有一定的促进作用。     

大菱鲆高温胁迫应答主效QTL候选基因的表达特性分析

为研究大菱鲆高温胁迫下相关应激基因的表达影响,采用Real-time PCR对本课题组已定位到的大菱鲆高温胁迫应答主效QTL中的4个候选基因(p53、UBE2H、ZNF469和MAGI2基因)在不同温度胁迫下的肝脏、鳃、脾脏、皮肤4个组织中的表达量进行检测。以大菱鲆正常生活水温14°C为对照组,20°C、23°C、25°C和28°C为实验组,进行数据分析。结果显示,4个基因在各个组织中均有表达,且表达量具有组织和温度特异性。其中UBE2H的表达量在4个组织中均呈现出先上升后下降的趋势,在肝脏、脾脏、皮肤组织中20°C时急剧上升并达到峰值且差异显著;在鳃组织中23°C时达峰值,差异显著。p53在4个组织中的表达量均有先上升后下降的趋势,但在鳃和皮肤组织中28°C时表达量急剧升高达到峰值且差异显著。ZNF469和MAGI2在4个组织中均在20°C时大量表达,并远高于其他温度。研究表明,在大菱鲆高温胁迫应答过程中p53基因与DNA修复和细胞凋亡密切相关,而UBE2H基因参与的泛素-蛋白酶体途径对p53基因具有反馈调节作用,是维持细胞稳态的关键基因;ZNF469和MAGI2在作为鱼类应答高温胁迫的生物标志物方面具有重要研究价值。     

大菱鲆体表粘液细胞组化研究及高温胁迫对其类型和分布的影响

以体重(150±10)g,体长(18±2)cm的大菱鲆为研究对象,利用阿利新蓝-过碘酸希夫氏试剂(AB-PAS,AB染液pH2.5,pH1.0)染色方法,研究高温23和(27±0.5)℃胁迫对大菱鲆体表黏液细胞分布与类型的影响。结果显示,在温度不断升高的外界刺激下,体表皮肤不同部位粘液细胞的分布与数目发生着显著的变化,与对照组[常温(16±0.5)℃]相比,Ⅱ型粘液细胞增幅最大,Ⅳ型次之,Ⅰ型变化不显著,而Ⅲ型增幅呈现出无规律性。研究认为,体表粘液中含丰富的溶菌酶、酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)等水解酶类,其酸性环境可以溶解寄生物从而保护机体,但是,随着水温不断增加,病原微生物活力提高,对鱼体构成威胁,而Ⅱ型和Ⅳ型粘液细胞均为使AB呈阳性的酸性粘多糖,随温度的升高其分泌的酸性粘液成分而显著增加,可有效地防止病原菌侵入,为体表粘液的免疫防御功能提供证据。