假丝酵母（Candida）固体发酵的条件及发酵动力学

对影响热带假丝酵母（Ｃａｎｄｉｄａｔｒｏｐｉｃａｌｉｓ）ＺＡＵ－１菌株固体发酵的因素进行了试验．结果表明：最适发酵温度为３０—３５℃，培养基最适ｐＨ４—６，最佳含水量４７％—４８％，种子接种量为１０％，增湿通气有利于该酵母的固体发酵．此外，对通气、温度及湿度在发酵过程中的变化规律进行了分析；并讨论了该酵母固体发酵的动力学特征．     

利用假丝酵母进行棉仁饼固体发酵的培养基筛选

以棉仁饼为原料,热带假丝酵母ＺＡＵ－１为菌种,采用固体发酵技术,对无游离棉酚的酵母饲料进行了研究,探讨了不同原料对酵母饲料发酵的影响,筛选出较合理的固体发酵培养基：棉仁饼６０％,大米蛋白粉２５％,麸皮１０％,饴糖２％,酒糟１％,ＭｇＳＯ４５Ｈ２Ｏ０．２５％,ＫＨ２ＰＯ４０．７５％,ＦｅＳＯ４７Ｈ２Ｏ０．８０％,ＺｎＳＯ４７Ｈ２Ｏ０．２０％,ＭｎＳＯ４Ｈ２Ｏ０．０６％,ＣｕＳＯ４５Ｈ２Ｏ０．０４％和ＣｏＣｌ２６Ｈ２Ｏ０．０２％．     

利用假丝酵母进行棉仁饼固定发酵的培养基筛选

以棉仁饼为原料,热带假丝酵母ＺＡＵ－１为菌种,采用固体发酵技术,对无游离棉酚的酵母饲料进行了研究,探讨了不同原料对酵母饲料发酵的影响,筛选出较合理的固体发酵培养基：棉仁饼６０％,大米蛋白粉２５％,麸皮１０％,饴糖２％,酒糟１％,ＭｇＳＯ４·５ＨＯ０．２５％,ＫＨ２ＰＯ４０．７５％,ＦｅＳＯ４·７Ｈ２Ｏ０．８０％,ＺｎＳＯ４·０．２０％,ＭｎＳＯ４·Ｈ２Ｏ０．０６％,ＣｕＳＯ４·５Ｈ２Ｏ０．０４％和     

粗状假丝酵母产酶能力及发酵条件的优化

对一株产脂肪酶粗状假丝酵母(ACCC20231)产酶特性进行了研究.结果表明,在培养基初始pH值6.0、30℃下培养31 h该菌出现最高酶活.对其发酵培养基成分进行优化,确定最适培养基组成为麦芽粉2%,蛋白胨1%,(NH4)2SO4 0.1%,MgSO4 0.5%,以1%棉子油作为诱导剂,优化后该菌株产酶能力明显提高,达6.2 U·mL-1.     

解脂假丝酵母菌发酵条件的研究

[目的] 寻求解脂假丝酵母菌的最佳发酵条件,研究提高酵母的产脂能力。[方法] 以解脂假丝酵母为菌种,在温度为30℃,摇床转速为120r/min的条件下分别进行了单因素试验和正交试验,探讨了pH值、碳源、氮源、葡萄糖浓度、金属微量元素等因素对假丝酵母产脂能力的影响,筛选最佳液体培养基。[结果] 单因素试验表明,2%葡萄糖、FeSO4、ZnSO4、MnCl2 pH 6.5等因素显著地提高了解脂假丝酵母的油脂产量。正交试验表明,解脂假丝酵母（Candida Yeast-2）的最佳液体培养基确定为： MnCl2 0.02%、FeSO4 0.03%、（NH4）2SO4 0.3%、葡萄糖3%、pH 6.5,用索氏提取法提取的脂肪含量为36%,较刚筛选出来的25%提高了11%。[结论] 解脂假丝酵母的生长与产脂并不同步,由此推测菌体增殖与油脂合成之间不存在竞争关系。     

一株产朊假丝酵母10 L罐发酵工艺优化

[目的]优化产朊假丝酵母10 L罐发酵条件,提高产朊假丝酵母发酵产率.[方法]在10 L发酵罐中研究溶氧量和pH控制方式对产朊假丝酵母分批发酵的影响.[结果]当装液量为7L且通气量控制在8 L/min、搅拌转速达到300 r/min即可满足产朊假丝酵母生长对溶氧的需求.通过流加碱的方式控制发酵pH环境,结果显示,流加氨水控制pH在5.5时最佳.[结论]通过优化发酵溶氧量和pH,产朊假丝酵母干重产量提高了54;,优化成效明显.     

蛋白酶对假丝酵母Candida sp.99-125脂肪酶生物合成过程的影响

在利用豆粕为氮源生产脂肪酶的过程中,假丝酵母同化豆粕会产生蛋白酶,而蛋白酶在水解豆粕的同时,亦会水解诸如脂肪酶等其他蛋白类物质。发酵第4d时,蛋白酶活力达到最高值6.5U/ml,同时脂肪酶活力增长缓慢。在5U/ml的纯蛋白酶粉体系中,分别加入5000U/ml、10000U/ml的脂肪酶粉,反应4h后脂肪酶活力分别为2500U/ml、3900U/ml;在2个含有较高活力的蛋白酶的已除菌的发酵液体系中,40℃下自水解4h,脂肪酶活力损失分别为20.7%和21.2%。发酵前添加外源蛋白酶水解豆粕,可抑制假丝酵母产生蛋白酶,解除其对脂肪酶的影响,发酵周期可缩短4d。     

克鲁丝假丝酵母原生质体形成与再生条件的研究

研究了菌龄，酶浓度，酶作用时间，脱壁促进剂，渗透压稳定剂对克鲁丝假丝酵母（C.krus)原生质体形成与再生的影响，通过单因子试验，综合考虑形成率与再生率后，确定选用对数生长中期的菌体，以17%蔗糖为渗透压稳定剂，0.1%β-巯基乙醇进行预处理，2%蜗牛酶30℃作用60min为制备克鲁丝假丝酵母原生质体的最佳条件。     

1株热带假丝酵母发酵木糖产乙醇的特性研究

对1株热带假丝酵母Candida tropicalis在不同的发酵条件下发酵木糖产乙醇的特性进行研究。结果表明:溶氧浓度对乙醇的产量和产率有很大影响,适中的溶氧浓度有利于菌体生长和乙醇的积累;较高的起始菌体浓度和尿素添加量对乙醇的生产积累有促进作用;在碳源和氮源充足的情况下,延长发酵时间,乙醇的产量最高达到25.58 g/L的稳定状态,菌体生长也趋于平稳,浓度为6.54×108/mL。     

假丝酵母的诱变育种

[目的]通过诱变育种提高假丝酵母油脂的含量。[方法]以假丝酵母为出发菌种,利用紫外诱变、微波诱变及紫外和微波复合诱变分别对出发菌株进行诱变,筛选出生物量和吸光度均较大的菌株。[结果]酵母菌经紫外和微波诱变其生物量均比对照提高。在酵母产脂高产菌株的筛选中,微波与紫外线复合诱变是一种比较有效的方法,获得一高产酵母菌株Candida Yeast-1,其生物量比出发菌株提高率为43.3%,菌体油脂的吸光度比出发菌株提高率为32.1%。用索氏提取法测定其脂肪含量,脂肪含量提高了17.2%。[结论]对假丝酵母进行紫外、微波及复合诱变均能有效地提高其产脂率。     

快速分离鉴定白假丝酵母

通过对白假丝酵母进行分离培养,并且通过形态特征、生态特征对其进行初步的鉴定,结果表明:白假丝酵母在26℃,pn值为5．0-5．5时生长最佳,为今后的研究提供了基础理论依据。     

发酵性丝孢酵母产生油脂条件的优化研究

通过摇瓶培养优化试验,对发酵性丝孢酵母菌体生长与产油脂相关影响因素进行了单因子试验,确定了发酵性丝孢酵母最佳生长及产脂条件:葡萄糖质量分数12%,碳氯比75,乙醇体积分数0.2%,接种量10%,发酵时间4 d,温度27℃,产脂培养基初始pH值5.8,震荡培养150 r·min~(-1),300 mL三角瓶装液量25 mL,优化后可得生物量31.26 g·L~(-1)发酵液,油脂含量60.20%,产油率迭15.81%.     

响应面法优化热带假丝酵母ypy06植酸酶发酵条件的研究

从海南洋浦近海分离到1株产植酸酶的酵母菌株,经鉴定为热带假丝酵母（Candida tropicalis）,利用Plackett-Burman设计对其发酵条件进行了筛选。结果表明,豌豆粉浓度、硫酸铵浓度和初始pH对酶产量具有显著的影响;利用响应面法对3个因子进行了优化,获得了最佳发酵条件：豌豆粉1.0%,葡萄糖2.0%,硫酸铵1.7%,氯化钠1.0%,初始pH 5.2,培养72 h,植酸酶产量达到727.5 U/mL。     

热带假丝酵母与深红酵母对Cd的吸附效果

25-37℃时,深红酵母对Cd2+的吸附随温度升高而增加.25℃时,每克深红酵母菌(湿重)吸附Cd2+6.81mg(即6.81mg·g-1),37℃时上升到8.78mg·g-1.假丝酵母吸附Cd2+受温度的影响与深红酵母相似.环境pH<4时,两酵母菌对Cd2+的吸附均较少并随pH升高而缓慢增加;当45时,对Cd2+的吸附量开始减小.吸附动力试验结果显示,吸附主要发生在开始的半小时内.在37℃,pH=5,菌龄48h,吸附1h的条件下,深红酵母吸附量为8.86mg·g-1,假丝酵母则达15.02mg·g-1.     

产朊假丝酵母富硒条件的优化及发酵罐培养

用富硒产朊假丝酵母制备饲料添加剂饲喂家畜家禽可获得富硒农产品。为获取富硒产朊假丝酵母,以产朊假丝酵母为出发菌株,优化摇瓶培养条件(摇瓶装液量、接种量、亚硒酸钠添加量、添加时间和培养液初始p H),通过L₉(3⁴)正交试验,获得最佳发酵工艺,即：装液量为35 mL,初始p H为6.5,接种量8%,培养时间为12 h,亚硒酸钠添加量为15μg/mL,此时最终发酵液中总有机硒含量最高,为9 792.732μg/L,菌体有机硒含量为1 400.362μg/g。用获得的高生物量富硒产朊假丝酵母制作饲料添加剂,通过补料培养,获得生物量为19.128 g/L,发酵液中总有机硒量为10 089μg/L。     

产朊假丝酵母增殖发酵培养基的优化研究

[目的]对产朊假丝酵母培养基进行优化,以提高其产率.[方法l通过单因素试验,研究不同碳源、氮源、无机盐对产阮假丝酵母产量的影响,对产朊假丝酵母发酵培养基成分进行筛选和优化研究,在此基础上,利用响应曲面法对主要影响因素进行回归分析.[结果]获得最优的增值发酵培养基组成为蛋白胨36.32g/L,蔗糖76.17 g/L,磷酸二氢钾1.98 g/L,硫酸镁1.5 g/L,硫酸铵1 g/L.[结论]产朊假丝酵母在优化后的培养基下OD值可达0.916,菌体于重可达11.15 g/L,比对照组提高了2.08倍.     

产朊假丝酵母原生质体制备的研究

利用产朊假丝酵母（Ｃａｎｄｉｄａｕｔｉｌｉｓ）２．２８１株研究了原生质体的制备。结果表明,该菌经复合剂０．１４ｍｏｌ·Ｌ－１β－ＭＥＴ、０．０４ｍｏｌ·Ｌ－１ＥＤＴＡ予处理;蜗牛酶浓度为７０ｍｇ·（１０ｍＬ）－１;并于３０℃酶解１２０ｍｉｎ;是制备原生质体的理想条件     

UdhA和博伊丁假丝酵母xylI基因共表达对木糖醇发酵的影响

[目的]研究可溶性吡啶核苷酸转氢酶基因(UdhA)和醛糖还原酶基因(xylI)共表达对木糖醇发酵的影响。[方法]将来源于博伊丁假丝酵母醛糖还原酶xylI基因克隆到pET28a(+)上,并在BL21(DE3)中表达,通过SDS-PAGE对表达产物的分子量和酶活进行测定。随即将xylI基因连接lacP启动子,构建pWYZ-2质粒并将其转化到E.coli AI07菌株。进一步将来源于E.coli W3110的UdhA基因克隆到pWYZ-2质粒实现与xylI共表达,所构建pWYZ-4质粒转化到E.coli AI07菌株,比较了E.coli AI07/pWYZ-2和E.coli AI07/pWYZ-4木糖醇发酵结果。[结果]在BL21(DE3)/pET28a(+)体系诱导表达的醛糖还原酶分子量为39kD,木糖还原酶酶活为3.30 U/mL。E.coli AI07/pWYZ-2菌株发酵48 h,木糖醇产量为19.90 g/L;E.coli AI07/pWYZ-4发酵36 h,木糖醇产量达到19.91 g/L,较菌株AI07/pWYZ-2生产强度提高了33.25%。[结论]通过将UdhA基因与xyl...     

产朊假丝酵母尿酸酶的纯化和特性研究

产朊假丝酵母尿酸酶经2次DEAE-cellulose 52层析后比活性提高20倍以上, SDS-PAGE分析发现其含一种约33.0 kD多肽, Sephadex G-200层析发现此天然尿酸酶分子量约134.0 kD. MALDI-TOF-MS分析比活性＞7.0 U/mg样品没有检测到单一肽链, 而丰度最高成分为67.7 kD, 次高成分为131.4 kD. 此酶最适pH值接近8.8, 在pH 7.4时可保留50%以上活性, 37 ℃时4 h内稳定, 米氏常数为(32.8±3.1)μmol/L(n=10), 黄嘌呤的抑制常数为(4.8±0.2)μmol/L(n=3);用蒸馏水透析后失活90%以上, 且随后加NaCl处理后酶活性不能恢复. Cu2+ 和Fe3+在1.0 mmol/L时对此酶有明显抑制作用. 这些结果表明此尿酸酶需通过分子工程改造才能用作治疗高尿酸血症相关疾病的药物.     

产朊假丝酵母尿酸酶的纯化和特性研究

产朊假丝酵母尿酸酶经2次DEAE-cellulose 52层析后比活性提高20倍以上, SDS-PAGE分析发现其含一种约33.0 kD多肽, Sephadex G-200层析发现此天然尿酸酶分子量约134.0 kD. MALDI-TOF-MS分析比活性＞7.0 U/mg样品没有检测到单一肽链, 而丰度最高成分为67.7 kD, 次高成分为131.4 kD. 此酶最适pH值接近8.8, 在pH 7.4时可保留50%以上活性, 37 ℃时4 h内稳定, 米氏常数为(32.8±3.1)μmol/L(n=10), 黄嘌呤的抑制常数为(4.8±0.2)μmol/L(n=3);用蒸馏水透析后失活90%以上, 且随后加NaCl处理后酶活性不能恢复. Cu2+ 和Fe3+在1.0 mmol/L时对此酶有明显抑制作用. 这些结果表明此尿酸酶需通过分子工程改造才能用作治疗高尿酸血症相关疾病的药物.