LFS、N6-BA和KT在罗汉果组织培养中不同的生物效应

为改进罗汉果组培技术，以脱毒植株带腋芽茎段作外植体，MS为基本培养基，分别添加LFS、N^6-BA和KT进行单因子对比试验。结果：（1）LFS 0．2mg／L可以促进外植体腋芽迅速萌动生长，成苗率可达90％以上，愈伤组织发生少。在继代培养中，LFS 0．2mg／L能直接诱导不定根的发生，无需添加任何生长素。（2）BA 0．2mg／L和KT0．2mg／L则使外植体长大量愈伤组织，腋芽萌发迟缓，成苗率不足30％。BA 0．2mg／L和KT0．2mg／L在继代培养中，都抑制不定根的发生。     

用灵发素(LFS)建立翅子罗汉果组织培养技术

目的:建立翅子罗汉果的组织培养技术;方法:以翅子罗汉果野生植株的单节茎段作外植体,MS为基本培养基,在统一添加NAA0.1后,再分别添加LFS,BA,KT0.3进行诱导;结果:(1)只有MS NAA0.1 LFS0.3能诱导腋芽萌发并建成根苗齐全的再生植株,25 d萌发率≥90%;其它培养基只诱导外植体形成大量愈伤组织,腋芽不萌发;(2)用MS LFS0.3进行继代培养,周期25~30 d,增殖倍数3.7;(3)再生植株移栽成活率90%~100%。结论:在常用的CTKs中,至今仅发现LFS能够诱导翅子罗汉果单节茎段获得再生植株。     

灵发素(LFS)直接诱导建成巴西人参再生植株的研究

目的:建立简单高效生产巴西人参再生植株的技术。方法:以单节茎段作外植体,MS固体培养基为基本培养基,分别添加LFS 0.1～1.0 mg/L,以添加常用浓度的BA和NAA作对照。结果:(1)MS+LFS 0.1～1.0 mg/L均可迅速诱导外植体腋芽萌发和不定根发生,直接建成根、苗齐全的再生植株。(2)MS+LFS 0.3 mg/L效果最好,培养15 d外植体发芽率与发根率皆达100%。用该培养基继代培养20 d,增殖倍数达17.8,相当对照的2～3倍,几乎无愈伤组织。这些再生植株可继续扩繁,亦可直接出瓶移栽。(3)MS+BA和MS+BA+NAA常用培养基无论是对外植体诱导培养,还是继代培养,都只能得到无根苗,并形成大量愈伤组织,必须增加"生根"程序诱导生根才能移栽。结论:MS+LFS 0.1～1.0 mg/L的单一培养基都可以直接诱导并建成完整的巴西人参再生植株,显著简化培养基的配制和再生植株的生产程序,以MS+LFS 0.3 mg/L生产效率最高。     

南方红豆杉愈伤组织诱导初探

为了研究南方红豆杉愈伤组织诱导的影响因素,选取不同外植体、不同外源激素、不同光照条件进行研究。结果表明：（1）茎段是诱导红豆杉愈伤组织的最佳外植体,出愈时间快,愈伤组织黄绿色,质地疏松;而叶片则出愈时间慢,愈伤组织黄白色,质地紧密。（2）2,4-D与NAA的协同促进作用明显,当2,4-D/NAA为1/5时,诱导效果最好,而比值较大时不利于愈伤的诱导。（3）黑暗培养能够明显促进愈伤组织发生,褐化现象减轻。     

濒危植物半枫荷Semiliquidambar cathayensis组织培养快繁技术研究

以当年生半枫荷带有腋芽的茎段和幼叶作为外植体,开展组织培养试验研究。结果表明,半枫荷叶片在初代培养基MS+BA 2 mg/L+NAA 0.5 mg/L上愈伤组织诱导率为92%,芽诱导率为16.7%;腋芽在初代培养基MS+BA 1 mg/L+NAA0.1 mg/L上腋芽诱导率为58%,茎段能直接诱导出芽,是半枫荷快繁的主要外植体。新生芽在继代增殖培养基MS+6 BA0.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L上芽增殖系数为3.93,增殖培养基以MS+6 BA(1～0.5)mg/L+NAA(0.01～0.05)mg/L较好;丛生芽生根培养基以1/2 WPM+NAA 2 mg/L+活性炭0.2%为宜,生根率可达90%以上;松林腐殖土加珍珠岩(4∶1)比较适合半枫荷的生长,移栽成活率为100%,苗木长势好,叶色绿,可提供大量半枫荷优质种苗。     

北川花魔芋愈伤组织与试管微球茎离体诱导研究

为解决我国地理标志性农产品北川花魔芋良种繁育体系的缺乏、种芋带病等难题,促进产业的发展,研究了不同外植体、不同激素及浓度配比对花魔芋愈伤组织诱导、试管微球茎形成的影响.结果表明:诱导愈伤组织的最佳外植体为幼嫩叶柄,在MS+ 1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA培养基上,愈伤组织诱导率可达48.3％;经继代培养可获得3种不同愈伤组织类型,其中Ⅲ型愈伤组织具有最佳增殖频率,增殖频率为90.8％;以Ⅲ型愈伤组织诱导产生试管微球茎时,最适培养基为MS+2mg/L 6-BA+-0.5 mg/L NAA+-5％蔗糖,培养4周后,可获得大量生长良好且带芽点的试管微球茎.     

不同植物激素对黄檗叶片愈伤组织诱导效应

以黄檗无菌苗叶片为外植体,研究了生长素NAA、2,4-D、细胞分裂素6-BA以及二类不同植物激素组合对黄檗愈伤组织诱导和生长的影响。结果表明,单独使用6-BA不能诱导出黄檗叶片的愈伤组织,单独使用NAA和2,4-D 对愈伤诱导率不高,最高分别是53.33%和73.33%且愈伤质量差。当生长素与细胞分裂素配合使用时,以BA 1.5 mg/L+ 2,4-D 2.0 mg/L激素组合愈伤组织诱导率高达100%,生长最旺盛。     

杜仲无菌苗组织培养的快速繁殖技术

杜仲是中国特有的珍贵树种,具有重要的医药价值和经济价值。针对杜仲组织培养多存在易污染,不定芽、不定根诱导难等问题。本研究以杜仲无菌苗为材料,研究了最适外植体,不定芽诱导、增殖培养和促进生根的最适基本培养基、植物生长调节剂的种类和浓度。研究结果表明,以杜仲无菌苗茎尖为外植体,以MS为基本培养基,添加0.5 mg/L或1.0 mg/L 6-BA、同时添加0.5 mg/L NAA最适合愈伤组织诱导;单独使用0.5 mg/L的6-BA时虽然愈伤组织诱导率较低,但不定芽诱导率最高,为88.9%,适合进行后续不定芽的增殖试验。以WPM为基本培养基,添加IBA 1.0 mg/L时,生根数最多,生根率达88.9%,且根系较长。研究结果将为实现杜仲组织培养的工厂化生产、杜仲基因工程等提供技术参考。     

不同生长调节物质对丹参愈伤组织诱导效应的研究

以丹参（Salvia miltiorrhiza Bunge）无菌苗的茎、叶为外植体,接种于附加2,4-D、NAA、6-BA及其组合的MS固体培养基上。结果表明：单独使用三种植物生长调节物质在一定浓度范围内均能产生愈伤组织;配合使用外源生长素和细胞分裂素,能获得出愈率高、生长快、质量好的愈伤组织;最佳组合的诱导培养基为MS+2,4-D2.0mg/L+6-BA1.0mg/L;2,4-D对丹参愈伤组织的诱导有促进作用;但当2,4-D的浓度在4 mg/L以上时,对愈伤组织的生长有抑制作用。     

不同生长调节物质对丹参愈伤组织的诱导效应

以丹参(SalviamiltiorrhizaBunge)无菌苗的茎、叶为外植体,接种于附加2,4-D、NAA、6-BA及其组合的MS固体培养基上。结果表明:单独使用三种植物生长调节物质在一定浓度范围内均能产生愈伤组织;配合使用外源生长素和细胞分裂素,能获得出愈率高、生长快、质量好的愈伤组织;最佳组合的诱导培养基为MS 2,4-D2．0mg／L 6-BA1．0mg／L;2,4-D对丹参愈伤组织的诱导有促进作用;但当2,4-D的浓度在4mg／L以上时,对愈伤组织的生长有抑制作用。     

珍稀濒危植物沙冬青的组织培养

试验以珍稀濒危植物沙冬青无菌苗的子叶、茎段为外植体材料,研究不同激素配比的培养基对不同外植体愈伤组织培养、丛生芽增殖及生根培养的影响,并筛选适宜各阶段培养的最佳培养基配方。结果表明,子叶是诱导沙冬青愈伤组织的最好外植体,在6-BA 0.5 mg/L、2,4-D 0.5 mg/L时,其愈伤组织诱导率达到最大值81.8%;在6-BA 2.0 mg/L、NAA 0.5 mg/L时丛生芽增殖率达到最大值90.2%,且丛生芽数量多、茎干健壮、生长旺盛,说明较高浓度的细胞分裂6-BA对丛生芽增殖具有明显的促进作用;在以1/2MS为基本培养基,加入NAA 1.0 mg/L时,生根率达到最大值70.4%,且生根时间最早,主根明显、粗壮且根毛数量多;适当调节培养基中无机盐的浓度提高生根率是将来沙生植物组织培养中研究的重点和难点。     

小盐芥下胚轴再生体系的建立

以小盐芥下胚轴为外植体,研究了不同激素与不同浓度组合对愈伤诱导和不定芽分化的影响。结果表明,MS 6-BA 2,4-D组合能诱导出愈伤,诱导率为100%。MS 6-BA NAA组合既能诱导出愈伤又能分化不定芽,愈伤诱导率为100%,激素不同浓度不定芽分化率不同,最佳分化培养基为MS 2.5mg/L 6-BA 0.1mg/L NAA,不定芽分化率为43%。生根培养基为1/2MS,生根率为74%。     

铁皮石斛组织培养及快繁技术研究

为建立铁皮石斛快繁技术体系,给生产提供参考,研究了铁皮石斛组织培养过程中的灭菌方法、腋芽诱导、原球茎的诱导、增殖与分化的最佳培养基配方。以铁皮石斛成熟茎段为外植体,探讨1/2MS培养基或MS培养基中添加不同浓度的激素对铁皮石斛组织培养过程中各生长、分化阶段的影响。研究表明,腋芽诱导最适宜培养基的配方为MS+ 6-BA 2.0 mg/L+ NAA 0.5 mg/L,诱导率达91.28%,平均芽数达2.34;原球茎诱导的最适宜培养基为1/2MS+ 6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L,诱导率可达66.67%;原球茎增殖最佳培养基为1/2MS+ 6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L,原球茎分化最适宜培养基为1/2MS+ NAA 1.0 mg/L+ 6-BA 3.0 mg/L+ KT 1.0 mg/L,最适宜生根的培养基配方为1/2MS+NAA 2.0 mg/L+ AC 0.5 g/L。     

粗肋草‘中国红’植株再生体系的建立

为建立相对稳定、高效的‘中国红’粗肋草植株再生体系,本研究以‘中国红’粗肋草的嫩茎腋芽原基、嫩叶为外植体,对诱导愈伤组织的初代培养基、芽增殖分化培养基的激素种类和配比以及生根培养方法等进行筛选优化。结果表明:适宜建立‘中国红’粗肋草体细胞胚发生途径再生体系的外植体为腋芽原基;最佳诱导愈伤组织的初代培养基为1/2MS+2,4-D 0.2 mg/L+6-BA 0.5 mg/L,愈伤组织诱导率分别为:腋芽原基83.3%,嫩叶为23.9%;适合腋芽原基愈伤组织分化培养基的激素配比为6-BA/IAA组合,愈伤组织分化率为65.7%~67.6%、主要以体细胞胚性途径形成再成芽、芽增殖系数5.3~5.8;适宜的生根接种、培养方式为体细胞胚植株断根促根培养,生根苗生根率99.2%。本研究已初步建立和优化以腋芽原基为外植体的稳定‘中国红’粗肋草体细胞胚发生途径的植株再生体系,可进一步改良优化,为今后‘中国红’粗肋草工厂化及规模化生产提供理论和技术指导。     

色素万寿菊杂交母本未授粉子房培养

以色素万寿菊雄性不育株未授粉子房为外植体,比较研究子房发育期、高低温处理和生长调节剂组合对愈伤组织诱导和分化的影响。结果显示:发育6~10 d,花丝刚好露出花萼,顶部呈圆柱状的花蕾愈伤组织诱导效果最好,为79.2%;低温预处理3 d,高温培养5 d有利于愈伤组织诱导;MS+2,4-D 0.5 mg/L+NAA0.5 mg/L+6-BA 0.5 mg/L+KT 0.5 mg/L为愈伤组织诱导最佳培养基,诱导率高达85.8%;NAA 1.0 mg/L+6-BA3.0 mg/L为不定芽分化适宜培养基,分化率达77.6%;1/2MS+NAA 0.2 mg/L为生根适宜培养基,生根率93.5%。本研究可为建立高效单倍体培养体系以及单倍体育种技术提供基础性资料。     

太行菊组织培养研究

对太行菊生长期间茎顶芽和带腋芽的茎段进行组培试验。结果表明,对外殖体应用0.1%的HgCl2进行表面灭菌,5min处理茎顶芽和8min处理茎段的死亡率和感染率较低。外殖体组织分化有直接生成愈伤组织、小植株体,愈伤组织和不定芽同时生成三种形式。     

海南肾茶的组织培养快速繁殖

【目的】研究肾茶组织培养快繁的最佳材料、最佳激素配比、最佳培养基及练苗移栽技术,以满足产业化生产肾茶对种苗的需求。【方法】以海南产肾茶幼嫩茎段的茎尖、茎节、茎间、叶片等为外植体,以MS为基本培养基,比较不同浓度和不同种类的生长激素对不定芽的萌发、愈伤组织增殖及丛生芽生根的影响。【结果】得知外植体消毒方法可采用70%的乙醇和0.1%的HgCl2溶液分时段来进行;最佳材料是茎尖;适宜的诱导培养基为MS+ NAA0.1mg/L +6-BA1.0 mg/L,继代增殖培养基为MS+ NAA0.5mg/L+6-BA1.0mg/L或2,4-D0.5mg/L+6-BA 1.0mg/L,生根培养基为1/2MS+ CM10%+NAA0.1mg/L;【结论】成功建立了海南肾茶组织培养快繁技术体系,掌握了练苗和移栽的相关技术。     

狭叶四照花茎段的离体培养与植株再生

建立高效的狭叶四照花组培快繁体系。以狭叶四照花茎段腋芽为外植体,研究基本培养基和植物生长调节剂对不定芽诱导、不定芽增殖及生根诱导的影响。不定芽诱导过程中,9个组合处理对不定芽诱导均有促进作用,其中WPM+1.0 mg/L 6-BA+0.05 mg/L KT+0.1 mg/L NAA为最佳组合,萌发率达到86.29%;最适宜不定芽增殖培养基为WPM+1.0 mg/L 6-BA +0.2 mg/L NAA,增殖系数4.07;最适宜芽苗生根培养基WPM+1.0 mg/L IBA,生根率达78.94%,生长状态优于其他处理。本实验建立的组培快繁体系,适合狭叶四照花的植株再生。     

树莓品种‘Kivigold’快繁技术体系建立

以树莓（Rubus idaeus）品种‘Kivigold’带腋芽茎段为外植体,研究消毒剂HgCl2（0.1%）不同的消毒时间对外植体培养的影响,对不定芽增殖培养基和生根培养基中适宜的激素种类及浓度、生根苗移栽驯化中适宜的基质进行了筛选。结果显示,树莓品种‘Kivigold’外植体的最佳消毒时间为10 min,初代培养时只需添加6-BA即可满足外植体萌发和生长的需要;在不定芽增殖过程中,细胞分裂素主要影响不定芽的增殖,而生长素主要影响不定芽的生长,以质量浓度低于1.5 mg/L的6-BA以及质量浓度低于0.5 mg/L的NAA较为适宜,3种碳源中蔗糖更有利于不定芽的增殖和生长;经过进一步的筛选,确定适宜于‘Kivigold’不定芽增殖和生长的培养基为MS+1.00 mg/L 6-BA +0.10 mg/L NAA（含20 g/L蔗糖和5.9 g/L琼脂,pH 5.8）,适宜于‘Kivigold’不定芽生根的培养基为1/2 MS+0.10 mg/L NAA（含20 g/L蔗糖和5.9 g/L琼脂,pH 5.8）;在移栽驯化中最适宜的栽培基质为泥炭土:珍珠岩=1:1,移栽成活率可达到93.33%。     

樱桃再生体系研究

摘要: 以樱桃枝条为材料,研究了樱桃离体培养及再生体系,探讨了不同激素组合对樱桃愈伤组织的产生、分化、增殖以及生根的影响,对樱桃再生体系进行优化,筛选出适合樱桃枝条腋芽诱导的培养基为MS+BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L;无菌芽各种外植体形成愈伤组织、分化和增殖的培养基为MS+BA0.5mg/L+2-4D0.5mg/L;壮苗培养基为MS;生根的培养基为1/2MS+NAA1.0mg/