福建省香石竹斑驳病毒的鉴定及其脱除

１９９５－１９９８年调查了福建香石竹主要种植地的病毒病，经症状观察，生物学鉴定，电镜观察和间接ＥＬＩＳＡ法检测，明确了香石竹斑驳病毒是福建省田间流行的主要病毒种类，带毒率为３０．８％－７２．４％，脱毒技术的研究结果表明，热处理，茎尖培养脱毒效果均不够理想，而茎尖培养加药物处理，在培养基中加病毒必克２ｍｌ．Ｌ＾－１，５ｍｌ．Ｌ＾－１，１０ｍｌ．Ｌ＾－１，ＣａｗＭＶ脱除率分别达３５．７％，４６．７％，     

香石竹斑驳病毒(CarMV)的研究进展

香石竹斑驳病毒(CarMV)是侵染香石竹的主要病毒之一,严重影响香石竹切花产量与品质,影响其经济价值和进出口贸易。目前对香石竹斑驳病毒已有大量研究,为系统了解该病毒,笔者从CarMV的病原学、血清学和分子生物学,CarMV病害发生与检测及CarMV防治方法等方面综述了CarMV的研究现状。     

香石竹斑驳病毒的初步研究Ⅰ病毒的生物学及病理学变化

 香石竹斑驳病毒在供试的5科13种植物中,能侵染3科5种植物,在苋色藜、昆诺阿藜、菠菜、千日红上产生枯斑,系统侵染中国石竹,中国石竹是最理想的繁殖寄主。该病毒的钝化温度为80℃,稀释限点为10^-5～10^-6,体外存活期为60d.电镜观察纯化病毒是直径为28nm的球状粒子,观察病叶超薄切片,可看到在木质部导管中存在呈晶状排列或散生的病毒粒子,在细胞质中病毒则排列在鞘状膜的结构中。     

花生斑驳病毒的鉴定

从花生种传病苗、花生病株以及花生种植区的大豆病株上分离到三个病毒分离物。经基本性状的测定,证实它们是同一病毒。汁液摩擦接种可侵染八种豆科、藜科和茄科植物,在苋色藜接种叶上产生局部褪绿斑。由桃蚜、豆蚜和禾谷缢管蚜以非持久性方式传病。体外抗性测定,失毒温度为55—60℃,稀释限点10~(-3)—10~(-4),体外存活期1—2天。可通过花生种子传病。病毒粒体线条状,有风轮状和束状内含体。并根据血清学的琼脂双扩散和免疫电镜的测定结果,将这三个病毒分离物鉴定为花生斑驳病毒(PMV)。     

组织直接印迹ELISA检测香石竹病毒

植物病毒的酶联免疫吸附分析检测技术的反应可以在硝酸纤维膜上进行,称为ｄｏｔ－ＤＥＬＩＳＡ。为进一步简化实验步骤,改膜上点样为病组织直接印迹,以后则参照间接ＥＬＩＳＡ程序进行。讨论了使用辣根过氧化物酶标记抗体存在非特异性反应的可能性及克服办法。     

香石竹斑驳病毒外壳蛋白基因的原核表达及抗血清制备

 香石竹斑驳病毒（Carnation mottle virus,CarMV）是侵染香石竹的主要病毒。本研究从已鉴定的CarMV毒源植物中提取总RNA, 克隆外壳蛋白（cp）基因后构建pET30a CP重组质粒,并转入BL21（DE3）pLysS进行原核表达。通过对诱导温度、初菌浓度、IPTG的浓度等表达条件进行优化,目的蛋白在37℃, IPTG 终浓度为10mmol/L的条件下,诱导表达6h后获得最高表达量。采用割胶的方法纯化cp蛋白,纯化后的目的蛋白免疫小鼠获得了特异性抗血清。经Western blot检测,结果表明所制备的抗血清与诱导表达的重组蛋白及接种CarMV的香石竹样品均发生特异性结合。利用所制备抗血清对昆明地区的48个香石竹样品进行抽检,结果表明香石竹样品的带毒率为79.2%。本研究为大规模抗血清生产、检测应用和深入研究该病毒cp基因与寄主的互作奠定基础。     

辣椒叶脉斑驳病毒研究进展

综述辣椒叶脉斑驳病毒(ChiVMV)的生物学特性、基因组、检测方法等方面的研究进展,并针对国内外当前研究中存在的问题作了相关讨论和展望。     

福州香石竹叶斑病病原鉴定

对福州建新镇花卉基地新发现的一种香石竹叶部病害进行病原菌分离、致病性测定及病原形态观察等鉴定．结果表明，该病害为香石竹叶斑病，病原菌为ＡｌｔｅｒｎａｒｉａｄｉａｎｔｈｉＳｔｅｖｅｎｓａｎｄＨａｌ，属半知菌亚门，丝孢纲，丝孢目，暗色菌科，交链孢属．香石竹叶斑病在福建省系首次报     

甘薯羽状斑驳病毒RT-PCR检测

根据已报道的甘薯羽状斑驳病毒（SPFMV）外壳蛋白（CP）基因的核苷酸序列设计并合成特异性引物,建立SPFMV的RT-PCR检测程序。特异性和重复性实验结果表明,该方法能够检测SPFMV,具有很好的特异性和重复性。并对PCR产物进行测序鉴定,结果与报道的序列同源性为88.3%和98.6%,证实所扩增的片段是病毒基因的部分片段。     

昆明香石竹病毒病的研究

 调查昆明附近所种植的香石竹,发现不少植株都感染了病毒病.经过症状观察、电镜观察等,共鉴定了香石竹斑驳病毒病(CarMV)、香石竹潜隐病毒病(CLV)、香石竹蚀环病毒病(CERV)、香石竹坏死斑点病毒病(CNFV)、香石竹脉斑驳病毒病(CaVMV)等5种病毒病.     

昆明地区菊花病毒病的调查与鉴定

 从昆明地区菊花种植较为集中的花卉基地和公园采集208份病毒症状明显的菊花病标样,通过鉴别寄主反应、电镜观察、血清学反应以及RT-PCR扩增,鉴定出危害菊花的病毒病原有:菊花B病毒（CVB）、番茄不孕病毒（TAV）、马铃薯Y病毒（PVY）、马铃薯X病毒（PVX）、黄瓜花叶病毒（CMV）和烟草花叶病毒（TMV）,其中CVB为侵染危害菊花的优势病毒,占52.5%,田间多数情况下是与TAV,PVY,PVX等病毒复合侵染。     

菜豆荚斑驳病毒外壳蛋白基因的克隆与原核表达

[目的]克隆菜豆荚斑驳病毒(BPMV)外壳蛋白(CP)基因,并对其进行原核表达。[方法]利用RT-PCR方法克隆BPMV CP基因,将其连接至pMD19-T Simple载体后对阳性克隆进行测序,检测其与已知病毒外壳蛋白基因序列的同源性;将CP基因定向插入双酶切的pET30a,构建其原核表达载体并转化大肠杆菌BL-21表达重组蛋白。[结果]试验克隆得到的CP基因大小为1 122 bp,与NCBI中目标基因的相似度达99%以上;试验成功构建了原核表达载体pET30a-BPMV CP,发现重组蛋白在37℃、1.0 mmol/L IPTG诱导4 h条件下表达量最高。[结论]该研究为BPMV抗血清的制备与液相芯片检测方法的建立奠定了基础。     

辣椒轻斑驳病毒研究现状

阐述了国内外对辣椒轻斑驳病毒（PMMoV）的研究现状,包括病毒的发生情况、基因组结构、致病相关基因研究进展及病毒检测方法的应用现状。     

黄瓜绿斑驳花叶病毒检测技术的研究进展

黄瓜绿斑驳花叶病毒(cucumber green mottle mosaic virus, CGMMV)是我国的检疫性有害生物,在广西、辽宁、河北、山东、广东和北京等地均发现疫情,已严重威胁着西瓜、甜瓜、黄瓜等作物的生产,因此加强该病毒的检测极为重要.目前黄瓜绿斑驳花叶病毒病的检测主要有生物学检测、血清学检测、分子生物学检测及电镜显微观察等方法.笔者对有关黄瓜绿斑驳花叶病毒病的检测技术进行了综述,并分析了现有检测技术的优缺点和应解决的主要问题,探讨了该病毒检测技术今后发展的方向.