黑龙江省大蒜病毒病原鉴定及病毒病发生情况调查

黑龙江省大蒜病毒病的田间症状复杂,研究通过生物学技术、电子显微镜技术和血清学方法相结合对大蒜病毒病原进行鉴定,并对黑龙江省大蒜病毒病的发生情况进行了调查。结果表明,表现花叶症状的大蒜样品中含有韭葱黄条病毒(Leek yellow strape virus,LYSV)和大蒜潜隐病毒(Garlic latent virus,GarLV);表现黄化症状的大蒜样品中含有洋葱黄矮病毒(Onion yellow dwarf virus,OYDV)和大蒜普通潜隐病毒(Garlic common latentvirus,GCLV);表现卷叶症状的大蒜样品中含有GCLV、LYSV和OYDV。黑龙江省大蒜病毒病的发生相当严重,且多数为复合侵染,其中LYSV、GCLV和GarLV的检出率较高。     

吉林、黑龙江部分地区毛葱OYDV感染情况调查

本研究运用ELISA检测方法对吉林、黑龙江多个毛葱种植地区(柴岗、杨树林、哈拉海、前岗乡、三清山、太平山镇、肇州和阿城)的洋葱黄矮病毒(OYDV)感染情况进行了系统的调查。结果表明:八个地区中,OYDV感染情况都比较严重,整体检出率在30%以上,吉林太平山镇OYDV感染率最高,为75%,说明OYDV感染在东北毛葱种植区普遍存在;目测结果与ELISA检测结果符合率的分析发现,柴岗和肇州目测为健康的植株与OYDV-ELISA检测结果的符合率最高,为90%,哈拉海最低,只有10%,说明哈拉海地区种植的毛葱中有OYDV弱毒株感染而植株不显症现象;太平山镇和哈拉海目测为感病的植株与OYDVELISA检测结果阳性的符合率为100%。阳性植株鳞茎中OYDV分布情况为:外层和内层OYDV检出率低,中层检出率高。本研究明确了不同地区毛葱OYDV感染情况及OYDV在鳞茎中的分布,为毛葱的脱毒繁育奠定了理论基础。     

黑龙江大葱病毒病原鉴定初报

大葱病毒病普遍发生,是导致产量和品质下降的主要原因。根据大葱病毒的寄主范围、病毒粒体形态、病理超微结构等测定结果,初步鉴定侵染病原属于马铃薯Y病毒科(Potyviridae),是马铃薯Y病毒属(Potyvirus)的暂定成员,其种子可传带病毒。     

分蘖洋葱和普通洋葱营养品质的比较

【目的】对分蘖洋葱和普通洋葱的营养品质进行对比分析,为分蘖洋葱营养价值的进一步研究提供科学依据。【方法】测定紫皮和黄皮普通洋葱及褐皮和黄皮分蘖洋葱不同部位的基本营养成分和特殊风味物质含量,比较种类和品种间各营养成分含量的差异。【结果】分蘖洋葱干物质质量分数为9.37%~19.20%,可溶性糖含量为89.34~132.99mg/g,可溶性蛋白含量为1.54~2.46 mg/g,游离氨基酸含量为1.56~2.85μg/g,丙酮酸浓度为62.31~123.67μmol/mL,黄酮类化合物含量为2 193.4~2 648.2mg/kg;基本营养成分和丙酮酸含量均为内层鳞茎高于外层鳞茎,黄酮类化合物含量为外层鳞茎高于内层鳞茎;褐皮分蘖洋葱除可溶性糖和黄酮类化合物外,其他营养物质含量均低于黄皮分蘖洋葱。【结论】分蘖洋葱基本营养成分和特殊风味物质含量均显著高于普通洋葱;相同类型不同皮色间在营养成分含量上存在差异,且不同成分间的差异性不同;从各种营养物质的分布看,除黄酮类化合物外均表现为内层鳞茎高于外层鳞茎。     

花生病毒病研究：I.花生矮花叶病的病原鉴定

１９８７－１９９３年期间，在河北、河南、山东、辽宁、北京４省１市先后采集花生矮花叶病及斑驳病标样２９０个，冷干保存，经用鉴别寄主测定、间接ＥＬＩＳＡ、电镜观察证明，引起北方花生产区花生矮花叶病的病原是花生条纹病毒（轻斑驳病毒）（ＰＳＴＶ原ＰＭＭＶ）、花矮化病毒（ＰＳＶ）、花生黄瓜花叶病毒（ＣＭＶ－ＣＡ）、花生斑驳病毒（ＰＭＶ）其发生频率依次为４７％，４１．３５，３３．３％，３．３％。在我国除台湾外     

分蘖洋葱良种繁育体系建立

为解决分蘖洋葱病毒病发生严重、种性退化的问题,本试验以分蘖洋葱优质种球为试材,开展分蘖洋葱冷凉地区良种繁育研究。研究结果表明：在吉林省东部冷凉地区敦化市进行良种繁育分蘖洋葱产量与农安县差异不显著,干物质含量、维生素C含量和游离氨基酸含量显著高于农安县;繁育栽培时,4月12日播种与4月19日播种产量差异不显著,种植密度株距为10cm时产量最高,为1869.48kg·667m^-2;良种单个鳞茎重、分蘖数、产量、干物质含量、可溶性糖含量、维生素C含量和游离氨基酸含量均显著高于自留种。本试验初步建立并优化了分蘖洋葱良种繁育体系,可为分蘖洋葱地方品种复壮及规模化良种繁育提供一定参考。     

露地分蘖洋葱复种秋菜栽培技术

介绍露地分蘖洋葱复种秋菜栽培模式,包括选地整地、品种选择、播种、田间管理、病虫害防治、采收等方面内容,以供参考。     

分蘖洋葱套作美葵高产栽培技术

分蘖洋葱套作美葵栽培技术提高土地利用率,增加经济效益,实现一季双收,是一种高产高效栽培技术。     

分蘖洋葱ISSR-PCR扩增体系的建立

以分蘖洋葱幼嫩叶片DNA为试材,采用单因素试验,对ISSR-PCR扩增体系中的退火温度、模板DNA量、Mg2+浓度、dNTP浓度、Taq酶含量以及引物浓度等各因素进行优化.结果表明,在反应体系为25μL反应液中,包含DNA模板40 ng(2μL),10×PCR Buffer 3μL,Mg2+(2.5 mmol·L-1)2μL,dNTPs(2.5 mmol·L-1)3μL,引物(5 mmol·L-1)3μL,Taq酶(5 U·μL-1)0.4μL,退火温度为56℃时,分蘖洋葱ISSR-PCR扩增获得最佳效果,初步建立分蘖洋葱叶片最佳ISSR-PCR扩增体系,为ISSR分子标记技术应用于分蘖洋葱种群遗传多样性分析、遗传图谱构建、核心种质资源保存利用等奠定分子生物学的理论基础和技术支撑.     

分蘖洋葱茎尖培养脱毒苗技术研究

利用阿城紫皮分蘖洋葱进行茎尖培养脱毒苗技术研究。结果表明 :最佳诱芽培养基为 MS+NAA0 .1mg/L+BA mg/L;最佳生根培养基为 1/2 MS+NAA0 .0 1mg/L+IBA1.5 m g/L+PP3330 .1mg/L。以上各培养基均加蔗糖 30 g/kg、琼脂 8g/kg、p H值调至 5 .7～ 5 .8。试验还就外植体的大小、鳞茎热处理对脱毒效果的影响进行了探讨。细胞学观察表明 ,该途径保持了原材料的遗传稳定性     

Detection of GLV, OYDV and LYSV in potato onion （Allium cepa L., Aggregatum group） by RT-PCR

Three pairs of primers were designed and synthesized from nucleotide sequences of garlic latent virus (GLV), onion yellow dwarf virus (OYDV), and leek yellow stripe virus (LYSV) by using PCR primer design software. The expected fragments about 170 bp, 287 bp, and 191 bp were amplified by RT-PCR for GLV, OYDV, and LYSV, respectively in disease-infected plants of potato onion (Allium cepa L., Aggregatum group), but such fragments were not obtained from healthy-looking plants and virus-free seedlings of shoot-tips. The amplified products of GLV, OYDV and LYSV were cloned into pGEM-T vectors, and transformed into Escherichia coli. JM109. The recombinant plasmids were obtained and sequenced. The nucleotide sequences were compared with corresponding viral nucleotide sequences reported in GenBank by performing a NCBI BLAST. The analysis showed that their homology attained 75% to 90%,89.5% to 96.1%,and 91.6% to 96.3% in GLV, OYDV, and LYSV, respectively. The total RNA of 6.34 μg·μL~(-1) from infected plants was diluted to a series of 10~(-1) to 10~(-5) and the detection sensitivity of RT-PCR was 10~(-4) (about 4 ng). Thus, a method of identification and detection by RT-PCR of GLV, OYDV, and SLYV was established.     

韭葱黄条病毒六安分离物CP基因原核表达与抗体制备

根据已报道的韭葱黄条病毒(LYSV)序列设计引物,扩增LYSV六安分离物的外壳蛋白(CP)基因,序列同源性分析结果表明,与目前已报道的LYSV不同分离物CP基因核苷酸序列同源性为84.0%～95.8%,相应推测出的氨基酸序列同源性为86.8%～97.6%.将CP基因插入原核表达载体pSBET后在大肠杆菌BL21(DE3)Plys S中诱导表达.通过12%SDS-PAGE和5%～20%梯度SDS-PAGE两次制备电泳纯化诱导产物,免疫家兔获得抗CP血清.Western blot分析对CP具有高度特异性.硫酸铵沉淀法与Protein A-Red Sepharose亲和层析相结合提取IgG,获得效价达1:3 700的一抗,可用于田间LYSV病样检测.     

应用多重RT-PCR检测甘肃‘成县迟蒜’中的大蒜潜隐病毒和洋葱黄矮病毒

根据大蒜潜隐病毒(garlic latent virus,GLV)和洋葱黄矮病毒(onion yellow dwarf virus,OYDV)的外壳蛋白基因核苷酸序列分别设计2对特异性引物,在单重RT-PCR检测的基础上,建立同时检测GLV和OYDV的多重RT-PCR技术体系.结果表明:该方法可从带病的甘肃‘成县迟蒜’大蒜样品中扩增出GLV(849bp)和OYDV(571bp)的2条特异性片段.GLV扩增产物与GenBank中登录的其他分离物核苷酸同源性在90.00%～99.76%,OYDV扩增产物与其他分离物核苷酸的同源性为90.00%～98.00%.     

大麦条纹花叶病毒北京分离物的鉴定

采集北京田间的大麦感病叶片,室内分离病原,血清学检测能够与BSMV新疆株抗血清反应,室内汁液摩擦接种可侵染大麦、小麦、本明烟和苋色藜,能够种子传毒,电镜观察病毒粒子为杆状,同时,国内首次利用RT-PCR扩增出597bp的BSMV外壳蛋白基因．根据以上结果确定分离到的病毒为大麦条纹花叶病毒,其寄主范围和种子带毒率与新疆株系有差别,可能属于不同株系．     

江苏省近年来新发生的一种水稻矮缩病害病原初步鉴定

通过常规生物学和分子生物学手段,对近年来在江苏省发生的一种危害严重的水稻矮缩病进行了初步诊断和鉴定,结果显示该病为水稻黑条矮缩病毒所致.这是自1963年以来水稻黑条矮缩病在江苏省大面积发生危害的首次报道.     

甘薯资源抗(耐)病毒的鉴定

2001~2002年采用嫁接法接种对“国家种质广州甘薯圃”保存的162份甘薯资源进行病毒抗性的鉴定,结果表明所有资源在指示植物Ipomoea setosa上显示出带毒症状,但是资源的病毒病潜育期之间存在着差异,甘薯地上部分不显症并不意味不带病毒。     

番茄黄化曲叶病毒病研究进展

论文从研究现状、植株症状、致病机理、检测方法、防治措施、抗病育种方法、鉴定手段等多方面阐述番茄黄化曲叶病毒病研究进展,对番茄黄化曲叶病毒病研究方向、防治工作等提出展望。     

沈阳市新民地区番茄黄化曲叶病毒分子检测

为了鉴定并防治番茄黄化曲叶病毒病,采用分子生物学方法对沈阳新民地区3个番茄植株样品进行检测,对PCR产物中的特异性片段进行回收、克隆、测序。结果表明:3个番茄植株样品均感染番茄黄化曲叶病毒病,说明沈阳市新民地区已有番茄黄化曲叶病毒病发生且PCR技术可以快速、准确、高效地完成番茄黄化曲叶病毒病的检测。