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日本利用屠宰场收集的卵巢进行牛的体外受精技术 总被引:1,自引:0,他引:1
牛的体外受精首先是由Brackett于1982年获得成功。他是利用手术法采取成熟卵子,进行体外受精后,将受精卵体外培养到4细胞期再利用手术法移植到受体牛的输卵管内,使其妊娠分娩。由于这种方法的成本非常高,所以虽然具有较高的学术价值,但在生产中只限于高价值种用牛的生产。日本农林水产省畜产试验场的花田先生利用屠宰场收集的卵巢吸引未成熟卵子,先进行成熟培养后再进行体外受精;然后在CO2培养器内(恒温器)培养到囊胚期,再利用非手术法移植到牛的子宫内。这一研究已获得成功,用这种方法生产的第1头犊牛于198… 相似文献
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利用细菌分离培养方法和PCR方法对天峻县快尔玛乡某养殖户中2只病死绵羊组织进行检测,经细菌分离培养未分离到可疑病原,用PCR方法检测2只病死绵羊肺脏及1号羊脾脏,均为绵羊肺炎支原体阳性。综合临床症状、常规检测以及PCR检测结果,诊断为羊群感染了绵羊肺炎支原体,从而导致了传染性胸膜肺炎。 相似文献
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厌气菌的分离培养法大别为两种,一种是用平皿琼脂,在厌气罐中培养,以取得表面菌落;另一种是用试管高层琼脂进行培养,以取得深部菌落。用前一种方法培养时,须以各种方法排出厌气罐中的氧气,日本 相似文献
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支原体检验用培养基质控菌株的生长曲线与世代时间测定 总被引:2,自引:2,他引:0
为了摸索用于支原体培养基检验用质控菌株的生长规律,利用活菌计数方法测定滑液支原体、猪鼻支原体不同培养时段的颜色变化单位(CCU),并绘制生长曲线,确定世代时间。结果表明:滑液支原体菌株迟缓期在培养后6h内,对数期为培养后6—36h,稳定期为培养后36~54h,衰老期为培养54h之后,世代时间G=231.8min;猪鼻支原体菌株迟缓期在培养后6h内,对数期为培养后6—18h,稳定期为培养后18~126h,衰老期为培养126h之后,世代时间G=117.1min。通过对质控菌株生长规律的初步探索,为培养基检验及质控菌株的使用提供了参考。 相似文献
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《动物医学进展》2015,(7)
为建立一种简单可靠的小鼠肝内胆管上皮细胞(MIBECs)分离培养方法,用Ⅳ型胶原酶进行门静脉灌注,取出肝内胆管,用DNaseⅠ、pronase E和Ⅳ型胶原酶分类消化,小鼠肝内胆管组织细小、均匀的细胞团培养于含100mL/L胎牛血清(FBS)和10ng/mL表皮生长因子(EGF)、肝细胞生长因子(HGF)和胰岛素转铁蛋白硒(ITS)的DMEM/F12培养基中。细胞贴壁后,利用细胞角蛋白19免疫荧光法鉴定目的细胞。在培养的过程中,用CCK8测定细胞的生长曲线。结果显示,成功分离出MIBECs,细胞纯度约95%。细胞培养3d~7d内呈对数生长状态。以上结果表明本分离培养方法是一种简单可靠的小鼠肝内胆管上皮细胞分离纯化培养技术。 相似文献
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以硝酸纤维膜为固相载体,利用沙门氏菌多价血清和辣根过氧化物酶(HRP)标记制备的羊抗兔IgG,成功地建立对香肠的Dot-ELISA检查法,同时,采用常规分离培养鉴定技术作对照试验。结果显示,在86份香肠中,用Dot-ELISA检出沙门氏菌阳性为36份,阳性率为41.86%;而常规分离培养鉴定技术检出沙门氏菌阳性为34份,阳性率为39.53%,两种方法的阳性符合率为86.17%,经统计分析,t=0.311 1,p>0.05,两种方法差异不显著。 相似文献
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本研究旨在建立鸭胚成纤维细胞离体培养、传代以及冷冻保存体系,为鸭胚胎或生殖干细胞的离体培养奠定基础。利用胰酶-EDTA消化鸭胚胎组织,10% FBS+DEME营养液培养,获得原代和传代成纤维细胞。分别用DMSO、甘油以及乙二醇作为冷冻保护剂对F1代鸭胚成纤维细胞进行冷冻保存,检测复苏后细胞的生长情况。利用此方法可以获得高活性的鸭胚成纤维细胞,并可成功传至第三代。其中F1代与F2代细胞活力最好,达到90%以上。3种冷冻剂保存的细胞复苏后均与F1代细胞的活力存在明显差异,均小于80%,其中用DMSO冷冻保存的细胞复苏后活力最强,生长密度保持较好。 相似文献
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本文利用提纯的副结核分枝杆菌胞浆特异性抗原,建立了检测牛副结核抗体的Dot-ELISA方法。用该方法对粪便培养阳杜的32头份牛副结核病血清检测,检出27头,阳性检出率为84.4%,其敏感性与ELISA相似。与10头OT变态反应阳性牛血清检测,无交叉反应。M.phlci.M.fortuitum.M.kansasii人工高免血清经两次用M.phlci悬液吸收,用建立的Dot-ELISA方法也无交叉反应。表明设立的Dot-ELISA具良好的敏感性特异性。 相似文献
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《中国畜牧兽医文摘》2016,(3)
本文在猪圆环病毒2型转瓶培养工艺基础上,利用NBS生物反应器和无血清培养基进行PK15-B1细胞培养,增殖猪圆环病毒2型病毒液,探索简化PCV2病毒液生产工艺、降低生产成本的方法,为今后用生物反应器微载体系统生产PCV2病毒液提供了科学依据。 相似文献
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综合多种细菌、真菌DNA模板的提取方法,采用β-巯基乙醇裂解细胞壁,利用蜗牛酶和溶菌酶消化细胞壁,再利用石英砂机械破壁,能彻底破坏细菌、真菌细胞壁,提取高质量的DNA,摸索出一套从奶样中同时提取细菌、真菌核酸的新方法。建立双重PCR方法,同时完成对细菌16SrRNA保守区特异性基因片段和真菌18SrRNA保守区特异性基因片段的扩增,快速诊断奶牛乳房炎是细菌感染还是真菌感染或是混合感染。对采自临床型乳腺炎和隐性乳腺炎病例的共计84个乳样分别用传统细菌学培养法和双重PCR方法对比鉴定。结果表明,双重PCR检测乳样细菌的最小浓度为10^2CFU/mL,检测乳样真菌的最小浓度为10^3CFU/mL。双重PCR方法对细菌的检测与平板培养检测方法比较差异不显著(P〉0.05),对真菌的检测与平板培养检测方法比较具有更高的检出率(P〈0.01)。 相似文献
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《青海畜牧兽医杂志》2019,(6)
利用厌氧菌实验室常规检测方法从一例送检病死羊肾脏培养物中分离到一株梭杆菌。通过形态学观察、动物实验、血清中和及胰酶破坏试验,确定分离病原菌为B型诺维氏梭菌。用自行设计的诺维氏梭菌α毒素特异性引物对纯培养物进行PCR扩增检测,PCR扩增得到大小为530bp的目的条带,与常规诊断结果一致;对分离的野生毒株的产毒能力进行了测定分析,野毒分离株在自制的VF厌气肝汤中的产毒能力达4000 MLD/mL,证明该菌株具备生产羊黑疫疫苗用株的潜力。 相似文献