一株冬虫夏草菌的鉴定及其抗氧化特性研究

对分离自野生冬虫夏草(Cordyceps sinensis)的一株真菌F4539进行形态学和分子生物学鉴定,并对其发酵产物进行抗氧化活性研究。结果表明,F4539(Genbank号为KU359775)与Hirsutella sinensis(AJ309355)具有99%的相似性,初步确认F4539为中华被毛孢(Hirsutella sinensis)。抗氧化活性试验结果表明,F4539发酵物20 g/L乙醇提取液的DPPH抗氧化活性为75.39%,高于同浓度国产某商品化冬虫夏草菌菌丝体胶囊乙醇提取物的抗氧化活性,进一步研究表明,F4395发酵物和国产某商品清除DPPH自由基的IC50分别为5.96 g/L和11.61 g/L,即F4539发酵提取物清除DPPH自由基的能力强于国产某商品。     

温度对中国被毛孢液体培养的影响

通过改变温度,摇床培养中国被毛孢,根据时间变化,检测菌体干重,采用蒽酮-硫酸法检测菌体多糖含量,高碘酸钠比色法检测菌体甘露醇的含量,绘制了菌体液体生长曲线及菌体活性成分变化曲线,对中国被毛孢的液体生长规律进行了研究.结果表明:中国被毛孢的液体发酵周期为20 d；18℃培养16 d,菌体生物量达到最大,干重为0.789 ...     

中国被毛孢高产孢菌株的筛选

[目的]获得高产孢的中国被毛孢菌株。[方法]对比5株中国被毛孢菌株的产孢率,并结合菌株在固体培养基上的菌丝生长速度、菌落半径、菌落形态及菌丝生物量等性状表现加以筛选。[结果]菌株7B和8B产孢率明显高于其他菌株,但菌丝生物量与其他菌株差异不明显。[结论]菌株7B和8B可作为生产分生孢子的优良中国被毛孢菌株。     

中国被毛孢RCEF0273培养工艺的研究

以提高菌丝生物量为目的,对中国被毛孢RCEF0273菌株的固体和液体培养工艺进行研究.结果表明,固体培养的最佳氮源为奶粉,其后依次为黄豆粉、酵母粉和麸皮,最差的为蛋白胨和NH4NO3;碳源对此菌的生长影响较小,比较适合的碳源为葡萄糖、蔗糖和果糖,其次为乳糖、淀粉等.应用正交设计方法研究接种量、CMC浓度以及添加玻璃珠的数量对菌丝生物量的影响,结果显示,30%的接种量可显著提高菌丝的生物量,而添加CMC或玻璃珠不利于菌丝生长.     

一种被毛孢菌丝体提取物的免疫调节活性研究

经多菌株的虫生真菌生物活性筛选,发现一株被毛孢菌株RCEF0851发酵物具有较强的免疫增强作用,进一步采用荧光定量PCR方法研究RCEF0851不同提取物对体外培养小鼠巨噬细胞RAW264.7的IL-1β、IL-6和TNF-a转录水平的影响.结果表明,乙酸乙酯提取物能显著提高TNF-a转录水平的表达,但对IL-1β和IL-6的转录调节作用不明显;水提物和甲醇提取物能明显提高小鼠巨噬细胞中IL-1β、IL-6和TNF-a的转录水平,表明它们具有免疫增强作用.     

不同氮源对中国被毛孢生长的影响

为了探讨不同类型的氮源对中国被毛孢生长的影响,摸索优化中国被毛孢人工培养的培养基配方,本研究将8种不同类型的有机氮源添加到基础培养基中,考察了不同的有机氮源对中华被毛孢的生长速度和总生物量的影响。结果表明,添加黄粉虫蛹粉作为氮源无论是在菌落大小还是总生物量上都具有明显优势。效果较好的前3种氮源依次是：黄粉虫蛹粉>牛肉蛋白胨>黄粉虫粉。而大豆蛋白胨效果最差,仅优于对照组（不添加任何氮源）。由此可以推断：中华被毛孢在生长过程中会优先利用和天然寄主蛋白类型更为接近的动物性有机氮源。     

增加被孢霉菌丝体中γ—亚麻酸含量的研究

为增加被孢霉产生γ亚麻酸的含量,给出了最佳培养基配方和生产条件,实验证明,新的培养基配方及生产条件使被孢霉脂肪油中γ－亚麻酸的质量分数由原工艺的４．０５３１％增加到７．２６９７％。     

长座虫草及其被毛孢无性型

本文报道了采自安徽省霍山县的中国新记录种长座虫草（Cordyepslongissima Kobayasi）,并且利用子囊孢子分离出被毛孢无性型,同时,在米饭培养基上得到了接受成熟的子座,它们的开状和颜色与天然虫草一致。另外,也观察到大量与天然虫草子座柄部相同的孢梗束。     

蛹虫草菌液体培养基配方优化研究

利用L9(34)正交试验设计,研究了蛹虫草菌液体培养基不同营养成分对蛹虫草菌丝生长干质量的影响,以对蛹虫草液体培养基配方进行优化。结果表明,蛹虫草液体培养基最佳配方为:玉米粉1%、麦麸1%、葡萄糖2%、蛋白胨2%、酵母膏0.5%、磷酸二氢钾0.1%、硫酸镁0.05%、维生素B110mg·L-1。蛹虫草菌最终菌体总干质量达到14.85g·L-1。     

二次回归正交旋转组合设计在紫芝液体发酵培养条件优化中的应用

通过单因素试验和"二次回归正交旋转组合设计"方法,在液体培养条件下,研究了不同发酵条件对1株野生紫芝菌丝体产量的影响.建立了装液量、初始pH、转速、培养温度和接种量5个因素的正交回归模型:Y=2.85701+0.17458X1-0.19802X21-0.20552X22-0.19302X23-0.15802X24-0.12302X25.从模型推知,装液量90mL,pH6.0,转速140r/m,培养温度27℃,接种量10.5%时,紫芝菌丝达到最大生物量3.15 g,验证实验结果与模型值相符.     

蒙山牛肝菌液体发酵培养基的优化

[目的]优化蒙山牛肝菌液体发酵培养基.[方法]以菌丝干重为指标,首先采用单因素试验筛选适于菌丝体生长的最佳碳氮源,再以正交试验优化碳源与氮源以及无机盐与VB1的最佳配比.[结果]蒙山野生牛肝菌优化的液体培养基配方为乳糖10 g/L,可溶性淀粉20 g/L,酵母膏5g/L,牛肉膏10 g/L,KH2PO41 g/L,MgSO4·7H2O1g/L.[结论]正交设计法优化的蒙山牛肝菌液体发酵培养基具有一定的应用价值,可为大规模发酵生产及后继研究提供基础数据.     

茶新菇液体发酵培养基优化研究

[目的]为了获得培养茶新菇的最优碳源、氮源、无机盐配比和最适培养条件。[方法]通过对茶新菇菌的液体深层发酵培养基组分中的碳源、氮源、无机盐的种类进行选择性试验分析,寻找茶新菇液体发酵培养基的最佳组合。[结果]单因子试验证明最优碳源为蔗糖、最优氮源为蛋白胨、最优无机盐为KH2PO4;其中碳源浓度对菌丝体产量的影响最大,其次是氮源,最小是无机盐,组分配方的最佳组合是:蔗糖3%、蛋白胨1%、KH2PO40.10%,最适培养条件为25℃、转速150 r/min、接种量5%、摇床振荡培养4 d。[结论]在最优组分配比和最适培养条件下,茶薪菇菌丝体生物量最高,该研究为其高效生产提供了定量的理论数据。     

中国被毛孢有性发育启动前后cDNA文库的构建

构建了中国被毛孢有性发育启动前后的cDNA文库。采用Total RNA Kit Ⅰ法提取总RNA,磁珠法分离mRNA,反转录合成双链cDNA。获得的cDNA经蛋白酶K与SfiⅠ消化酶切并纯化,连接到载体pUC19上,采用电转化法将其转化到感受态细胞DH-5α中。之后测定文库的克隆数、重组率、插入片段大小。结果显示,文库1含1.09×10⁶个重组体,蓝白斑实验显示重组率为92.5%;文库2含1.13×10⁶个重组体,蓝白斑实验显示重组率为92%;两文库重组DNA片段的大小范围均在500~2 000 bp。说明本试验中所提取的 RNA 其纯度很好,完全可以达到后续研究的要求。     

紫丁香蘑菌丝体液体发酵培养基的筛选

[目的]选出适合紫丁香蘑(Lepista nuda)菌丝生长的液体发酵培养基。[方法]以紫丁香蘑菌丝体干重和胞外糖含量为评价指标,通过正交试验筛选出最适合紫丁香蘑菌丝生长的液体发酵培养基。[结果]碳源对菌丝体生长的影响最大,其次是KH_2PO_4和氮源,最后是MgSO_4。[结论]最适液体发酵培养基为:可溶性淀粉2%(w/V),酵母浸粉0.5%(w/V),KH_2PO_40.3%(w/V),MgSO_40.05%,CaCl_20.001%,VB10.001%(w/V),pH 7。     

竹黄多糖液态发酵培养基优化研究

[目的]为竹黄多糖的工业化生产提供理论依据。[方法]通过组织分离,从野生竹黄子实体中获得能产生竹黄多糖的无性株,然后用其进行液态发酵培养,通过摇瓶正交试验确定其最佳培养基配方。[结果]碳源、氮源、生长因子和初始pH值的影响均达显著水平（α=0．05）。其显著性依次为：碳源浓度〉生长因子浓度〉酸碱度〉氮源浓度,在交互作用中只有CGF×CN的影响达显著水平。方差分析结果表明,最佳培养基配方为：蔗糖20g／L＋酵母膏8g／L＋玉米浆2g／L,最佳初始pH值为6．0。当摇瓶装量为50／250ml（V／V）。接种量为10％（V／V）,培养温度为28℃,摇床转速为120r／min时,120h后发酵液的竹黄多糖含量为8g／L。[结论]该试验初步研究了利用竹黄无性菌株通过液态发酵生产竹黄多糖的培养基组成及培养条件。     

鸡腿菇液体发酵工艺的优化

[目的]对鸡腿菇液体发酵培养基和培养条件进行筛选及优化。[方法]以鸡腿菇为供试材料,胞外多糖和菌丝体生物量为指标,通过单因素试验和正交试验对鸡腿菇液体发酵培养基配方及培养条件进行筛选及优化。[结果]鸡腿菇液体发酵产胞外多糖的最佳培养基组合为：葡萄糖2．0％,酵母膏0．75％,CaCl0．2％;鸡腿菇液体发酵产菌丝体的最佳发酵培养基组合为：葡萄糖2％,酵母膏0．75％,KH2PO4 0．2％;鸡腿菇液体发酵产胞外多糖和菌丝体的最佳发酵条件均为：起始pH值7．0,接种量20．0％,装液量120ml,培养天数6d;[结论]该研究为鸡腿菇的进一步开发提供了科学依据。     

枯草芽胞杆菌B13液体发酵培养条件的优化

枯草芽胞杆菌B13是一种良好的微生态制剂原材料,为了增加枯草芽胞杆菌B13的芽孢产量,研究采用单因素试验对接种量、培养时间、机械搅拌程度、装液量和消泡剂添加量等发酵条件进行了优化。结果表明,接种量0.5%,发酵液中添加4根玻璃棒和0.4%的豆油,装液量为容器的1/10,37℃下以200 r/min的转速振荡培养8~48 h,可获得较高浓度的菌体。