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水稻蛋白质双向电泳分析新方法 总被引:11,自引:0,他引:11
钟伯雄 《浙江农业大学学报》1997,23(2):128-132
通过研究,建立了适合于水稻根蛋白质双向电泳分析用的磷酸缓冲液抽提、TCA沉淀法浓缩蛋白质的新方法。本法用于水稻胚、叶片的蛋白质样品制备,也能获得稳定、清晰的双向电泳图谱。经考马斯亮蓝R250染色,根、叶和胚的清晰可分辨的蛋白质斑点数分别为350、350和400个,用银染色,斑点数分别为600、600和700个。三蛋白质的等电点总在3.0 ̄9.0之间,大多数在5.0 ̄8.0之间,分子量在15 ̄17 相似文献
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盐胁迫下不同盐敏感型番茄在蛋白质表达上的差异 总被引:9,自引:0,他引:9
研究了耐盐与不耐盐番茄自交系在盐胁迫与正常栽培条件下根中蛋白质表达上的差异。耐盐番茄根系中蛋白质含量高于不耐盐番茄,正常栽培条件下番茄根系蛋白质含量高于盐处理番茄。蛋白质提取液不但在总蛋白质数量上有所不同,而且在蛋白质种类上亦有所差异。经过不同的双向凝胶电泳分离后,经过PD Quest软件和Q—TOF质谱分析结果为,在盐胁迫条件下共有8种蛋白质在表达上差异显著。磷酸葡萄糖脱氢酶、乙醇脱氢酶催化和3-异戊基苹果酸脱氢酶在盐处理的耐盐番茄根系中显著增加,异戊烯二磷酸(IDP)异构酶显著减少。 相似文献
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【目的】水稻(Oryza sativa L.)是中国最重要的粮食作物,也是盐胁迫敏感作物。研究水稻盐胁迫响应基因表达,发掘水稻耐盐基因对水稻抵御盐胁迫的分子机制及解析其调控网络,为培育耐盐水稻品种奠定基础。【方法】以水稻品种日本晴种子为试验材料,在1/2MS培养基培养条件下对其进行盐处理(150 mmol·L-1 NaCl),对盐处理和非盐处理21 d的根系进行小分子量RNA组学测序。通过生物信息学分析,以log2 Fold Change(log2FC)>1或<-1为筛选条件,寻找在盐胁迫和非盐胁迫条件下差异表达的miRNA和tRF(tRNA-derived RNA fragments),分析其靶基因,并通过实时荧光定量PCR对测序结果及靶基因进行验证。【结果】以至少一组数据RPM(Reads Per Million reads)>500和log2FC>1或<-1为筛选条件,共得到31个差异表达miRNA,其中8个为盐胁迫诱导miRNA,23个为盐胁迫抑制miRNA,这些差异表达miRNA属于12个miRNA家族,其中8个miRNA家族在拟南芥、玉米和小麦... 相似文献
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土壤盐碱化是影响果树生产的环境因子之一。分析了不同果树的耐盐性,从细胞膜透性、保护酶系统、渗透调节(有机溶质和无机离子)、光合作用、内源激素等5个方面探讨了果树对盐胁迫的响应,从渗透调节、离子的选择吸收和离子区域化等角度阐述了果树的耐盐机制。 相似文献
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采用双向聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对耐盐性不同的野生番茄品种盐处理后进行蛋白质组分析。2种野生番茄(秘鲁番茄、潘那利番茄)双向电泳后,幼苗长至两叶一心时,用150 mmol·L-1 NaCl胁迫,14 d后用TCA丙酮法提取叶片总蛋白。经裂解、水化、等电聚焦、平衡、SDS-PAGE电泳和考马斯亮蓝胶体染色等一系列步骤后,番茄叶片总蛋白以蛋白点的形式呈现在凝胶图上。经ImageMaster 2D platinum软件分析,匹配率均达90%以上,图像分辨率也超过800个蛋白斑点。结合软件分析和肉眼观察,秘鲁番茄、潘那利番茄分别有16、15个蛋白被发现为上调蛋白,11、18个为下调蛋白。 相似文献
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水稻蛋白质双向电泳分析新方法 总被引:1,自引:0,他引:1
钟伯雄 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》1997,(2)
通过研究,建立了适合于水稻根蛋白质双向电泳分析用的磷酸缓冲液抽提、TCA沉淀法浓缩蛋白质的新方法.本法用于水稻胚、叶片的蛋白质样品制备,也能获得稳定、清晰的双向电泳图谱.经考马斯亮蓝R250染色,根、叶和胚的清晰可分辨的蛋白质斑点数分别约为350、350和400个,用银染色,斑点数分别为600、600和700个.三者蛋白质的等电点总在3.0~9.0之间,大多在5.0~8.0之间,分子量在15~170kD之间,大多在25~90kD之间 相似文献
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盐胁迫对转BADH基因水稻R1的影响 总被引:3,自引:1,他引:2
以转BADH基因水稻R1和常规对照品种为材料,采用3种不同浓度NaCl在苗期和孕穗期进行盐胁迫处理,分析了R1和对照之间的株高、BADH活性、叶片相对电导率和植物大分子渗漏值等指标,并进行PCR分子检测。结果表明,PCR阳性与阴性植株个数分离比不完全符合简单的孟德尔遗传规律;相对电导率和植物大分子渗漏值低,而BADH活性高的转基因植株耐盐性比对照增强。此结果说明转基因水稻R1耐盐性明显高于对照,目的基因正常表达,此结果对今后培育新的抗性品种奠定了基础。 相似文献
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[目的]探讨盐逆境下光合器官的光合潜力,为提高全株光合能力提供理论依据。[方法]以耐盐性不同的水稻品种Pokkali(耐盐)、Peta(盐敏感)幼苗为材料,研究叶绿体光能转化对盐胁迫的响应。[结果]结果表明:随着NaCl胁迫浓度和时间的增加,2个水稻品种净光合速率、叶绿体放氧活性、ATP含量下降;100 mmol/L NaCl胁迫下,叶绿体ATP酶活性先上升后基本不变,叶绿体光合磷酸化活力先上升后下降;200 mmol/L NaCl作用下,叶绿体ATP酶、叶绿体光合磷酸化活性一直下降;且耐盐品种Pokkali下降的程度明显小于盐敏感品种Peta。[结论]盐胁迫下耐盐品种叶绿体光能转化能力强于盐敏感品种。 相似文献
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外源亚精胺对盐胁迫下水稻根系抗氧化酶活性的影响 总被引:4,自引:0,他引:4
研究了外源亚精胺对盐胁迫下耐盐水稻品种Pokkali和盐敏感水稻品种Peta根系抗氧化酶活性、脯氨酸、可溶性蛋白含量及根系活力的影响.结果表明:外源亚精胺可以提高盐胁迫下不同耐盐性水稻品种根系中超氧化物歧化酶(SOD),过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性,降低超氧阴离子(O2- ·)产生速率和丙二醛(MDA)含量;使盐胁迫下根系脯氨酸的含量升高;并且可以阻止盐胁迫下两品种水稻根系可溶性蛋白含量及根系活力的降低.这表明,外源亚精胺可缓解盐胁迫对两品种水稻根系的伤害,并且对盐敏感品种Peta的缓解作用大于耐盐品种Pokkali. 相似文献
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盐胁迫下钙对水稻幼苗光合作用及相关生理特性的影响 总被引:46,自引:4,他引:46
研究了外源Ca2+对盐胁迫下耐盐性不同的2个水稻品种(武育粳3号和IR36)光合作用和相关生理指标的影响。结果表明,外源Ca2+能有效改善水稻的光合作用,其净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)均较盐胁迫条件下未加Ca2+处理有明显的增加。细胞间隙CO2浓度(Ci)、气孔限制值(Ls)的升降速度也是加Ca2+的处理比未加Ca2+的处理快。外源Ca2+能提高水稻叶片叶绿素的含量,增加脯氨酸和可溶性糖的积累。此外,外源Ca2+还降低了丙二醛含量和细胞膜透性,并有效增强SOD酶的活性。 相似文献
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赤霉素对盐胁迫下水稻种子发芽及幼苗生长的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
[目的]研究赤霉素对盐胁迫下水稻种子发芽及幼苗生长的影响。[方法]采用60~210 mmol/L的NaCl作为不同浓度的盐胁迫,结合10μmol/L GA3处理,考察珍汕97水稻种子发芽及幼苗生长状况。[结果]大于等于60mmol/L的NaCl胁迫显著抑制水稻种子发芽及幼苗生长,而10μmol/L GA3处理能显著缓解小于等于90mmol/L的NaCl胁迫对活力指数、第1片真叶叶鞘生长、株高生长的影响,显著缓解90~150mmol/L的NaCl胁迫对种子根生长的影响,显著缓解小于等于180mmol/L的NaCl胁迫对发芽势、发芽指数的影响,并显著缓解120~210mmol/L的NaCl胁迫对发芽率的影响。[结论]10μmol/L GA3处理能显著缓解一定浓度范围内的盐胁迫对水稻种子发芽及幼苗生长的抑制作用。 相似文献
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[目的]分析不同盐浓度胁迫下番茄幼苗叶中不同性质蛋白表达的差异。[方法]以番茄种子为试材,置于附加不同盐浓度的1/2MS培养基上培养出番茄幼苗,然后分别提取其叶中的水溶蛋白、盐溶蛋白、酸溶蛋白、醇溶蛋白和总蛋白,并运用SDS-PAGE技术对其蛋白组成和表达量进行比较分析。[结果]不同盐浓度处理下,叶片蛋白质的组成和数量均发生变化,高盐浓度时多出了66.2 kD左右的蛋白质,说明在高盐浓度胁迫下植物产生了某些抗逆性蛋白;总蛋白条带比较相似,总蛋白含量和盐溶蛋白含量略微减少,水溶蛋白含量略微增加,并且在盐溶蛋白中增加了1条带,这些蛋白变化可能是盐胁迫下应激反应的相关蛋白。[结论]该研究为植物的抗病性选育提供一定的理论基础。 相似文献
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外源脯氨酸对盐胁迫下大豆愈伤组织蛋白质含量的影响 总被引:7,自引:0,他引:7
大豆小真叶愈伤组织分别在NaCl浓度为 0 % (CK)、 0 4 %、 0 8%、 1 2 %、 1 6 %及在各盐浓度中加脯氨酸(0 8mmol/L)的培养基中分别进行 2 4、 4 8、 72h培养 ,测定其可溶性蛋白质含量的变化。结果表明 ,愈伤组织在0 4 %、 0 8%、 1 2 %的不同盐浓度培养条件下 ,蛋白质含量都比对照增高 ,并有随培养时间延长而增加的趋势。外源脯氨酸可提高盐胁迫下大豆愈伤组织的蛋白质含量 ,盐浓度 0 4 %培养 2 4h最明显 ,盐浓度增至 0 8%和 1 2 % ,产生此作用的培养时间相应延长 ,效果相应减弱。 相似文献
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盐胁迫下不同浓度锌对水稻幼苗生长及细胞膜的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
[目的]研究在盐胁迫下不同浓度锌对水稻幼苗生长及细胞膜的影响,为水稻的抗盐性研究提供理论依据。[方法]用不同浓度的锌对盐胁迫下的水稻幼苗进行处理,测定相应的形态指标(地上部鲜重)和生理指标(相对外渗率、MDA、SOD、POD和PPO)。[结果]研究结果表明,一定浓度的锌对水稻地上部鲜重有明显的影响,对相对外渗率、MDA、POD和PPO都有一定作用。在1.0 mg/L处理的浓度下,MDA和相对外渗率分别比对照下降17.5%和18.0%,POD活性比对照增加13.4%;在浓度为0.5 mg/L时,SOD活性比对照增加23.3%;在浓度为1.5 mg/L时,PPO活性比对照增加22.9%。[结论]锌浓度为1.0 mg/L时,对细胞膜起到保护作用,能提高水稻对盐害的抗性。 相似文献
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[目的]通过对水稻苗前期盐的处理后,测定盐胁迫条件下生理指标的变化,确定盐害对水稻的影响.[方法]测定了一种盐敏感水稻品种(丽江新团黑谷)经过低浓度盐胁迫预处理后在盐害条件下叶片和根中活性氧H2O2的产生和CAT活力.[结果]50 mmol/L盐胁迫能导致其叶片和根中H2O2含量显著上升,而CAT活力则显著下降.经过低浓度盐(20 mmol/L)预先处理的水稻在盐胁迫下H2O2含量上升幅度则较小,而CAT活力较高.此外,盐胁迫预处理的水稻在盐害条件下生长情况更好,其叶片中叶绿素含量更高.[结论]活性氧H2O2及其清除酶CAT参与水稻对盐害的应答反应,并且这种预处理能增强水稻抗盐害胁迫能力. 相似文献