诱导子协同对黄芪愈伤组织生理生化指标的影响

[目的]利用水杨酸和真菌诱导子协同作用,研究其对黄芪细胞培养物生理生化指标的影响,为药用植物作为生物反应器生产有用的次生代谢产物提供理论基础和技术体系。[方法]以黄芪组织培养物为材料,测定黄芪愈伤组织中POD、PAL、CAT的生物活性。[结果]黄芪愈伤组织中过氧化物酶、苯丙氨酸解氨酶及过氧化氢酶活性高于对照;H2O2和NO含量也明显高于对照。[结论]水杨酸和真菌诱导子的共同作用提高了黄芪愈伤组织的抗性,有利于黄芪愈伤组织生长,如在生产中加入诱导子,可创造更大的商业价值。     

朱砂根皂苷高产愈伤组织的诱导与筛选

采用比色法测定了以朱砂根(Ardisia crenata)胚、根、茎及叶等4种外植体诱导的愈伤组织中皂苷含量,筛选高皂苷含量的愈伤组织。结果表明,朱砂根的胚和根诱导出来的愈伤组织皂苷含量最高,达到24.07 mg/g和21.25 mg/g,茎和叶诱导的愈伤组织皂苷含量较低,根和茎诱导的愈伤组织生长较好。     

福建七叶一枝花组织培养及主效成分测定

本研究以福建七叶一枝花的小苗、根、带柄叶为外植体,采用组织培养和HPLC法,开展组织培养及主效成分测定研究。结果表明:(1)不同外植体类型,通过诱导培养基1/2MS+6-BA 2.0 mg•L^-1+2,4-D 1.0 mg•L^-1,均能成功诱导出愈伤或丛生芽,但不同外植体类型诱导率差异明显。以小苗诱导率显著最高,为58.33%;(2)不同增殖途径对组培的影响很大,愈伤组织途径的绝对生长速率、相对生长速率、增殖率均显著高于丛生芽途径;(3)福建七叶一枝花组培过程中,产生的根、块茎、愈伤组织均含有重楼皂苷成分,根部的总皂苷含量达0.342%,愈伤组织达0.339%,块茎的总皂苷含量最高,达0.497%。3个部位的4种皂苷成分中,以重楼皂苷Ⅶ占绝对优势,其余3种皂苷含量极低或未检出。通过对福建七叶一枝花组织培养及皂苷含量测定,初步建立了福建七叶一枝花组织培养体系,证实了通过组织培养获得次生代谢物的可行性,为生产福建七叶一枝花组培苗和次生代谢产物奠定了基础。     

人参SE基因RNAi载体的构建及转化

在克隆人参鲨烯环氧酶基因保守区约364 bp片段基础上,构建该基因的RNAi植物双元表达载体pMHZ111-SE,并利用农杆菌介导的遗传转化方法转化人参愈伤组织,通过HPLC方法测定转基因和非转基因人参愈伤组织中6种单体皂苷的含量。结果表明,经干扰载体转化的人参愈伤组织中Rg1、Re、Rc单体皂苷含量均有大幅度下降,其他3种皂苷含量变化不明显。     

蒙古黄芪的组织培养及辐射诱变研究

[目的]研究蒙古黄芪的组织培养技术及辐射诱变对愈伤组织诱导的影响。[方法]以蒙古黄芪无菌苗的不同外植体（叶片、子叶、下胚轴）进行愈伤组织诱导,并对子叶和下胚轴进行辐射诱变研究。[结果]3种外植体分别在MS＋6-BA 2.0 mg/L＋NAA 2.0 mg/L、LS＋6-BA 2.0 mg/L＋NAA 0.1 mg/L、MS＋6-BA 2.0 mg/L＋NAA 2.0 mg/L培养基上的愈伤组织诱导率较高 下胚轴和子叶的最佳诱变时间均为15 min 随辐射诱变时间的增加,下胚轴愈伤组织的长势增强,但超过一定的诱变时间愈伤组织长势减弱且诱导率降低。[结论]该研究为蒙古黄芪的组织培养和诱变育种提供科学依据。     

培养基及培养条件对青钱柳愈伤组织生长和黄酮含量的影响

在固体培养条件下,研究了不同外植体来源、培养基、植物激素、接种量、培养时间对青钱柳愈伤组织生长和黄酮含量的影响.结果表明:①不同外植体来源的愈伤组织增长量茎段大于叶片,而黄酮含量叶片大于茎段;②8种基本培养基中,改良MS培养基上的愈伤组织增长量及黄酮含量均显著高于其它培养基;③促进青钱柳愈伤组织增长量和黄酮含量积累的最佳激素组合为:1.0 mg.L-1KT+0.5 mg.L-12,4-D+0.3 mg.L-1NAA;④愈伤组织增长量最大时的接种量为0.65 g;⑤愈伤组织培养至12 d增长量最大,培养16 d,黄酮含量达最高值.     

贯叶连翘愈伤组织诱导及其金丝桃素检测

采用不同培养基及激素诱导贯叶连翘愈伤组织,研究了不同蔗糖浓度对愈伤组织生长的影响,同时采用HPLC对不同生长状态的愈伤组织中金丝桃素含量进行检测。结果表明:MS + 2 ,4 -D 0 .2mg/L +KT 0 .0 2mg/L的培养基中愈伤组织的诱导率最高;提高蔗糖浓度可以促进愈伤组织生长,但合成金丝桃素的最佳蔗糖浓度为30g/L ;褐化的愈伤组织中金丝桃素含量明显高于生长状态好的愈伤组织,增加量可达7.5～9倍。     

AM真菌对长果颈黄芪生物量及次生代谢产物的影响

为了解丛枝菌根真菌（AM真菌）对长果颈黄芪植物生长与主要活性成分含量的影响,通过设立室内接种AM真菌、不接种AM真菌以及室外自然状态下3个处理组,以植物生物量、毛蕊异黄酮和黄芪甲苷含量等为指标,考察AM真菌对长果颈黄芪植物品质的影响。结果表明,AM真菌对长果颈黄芪的地上部分和地下部分的生物量没有太大影响,但对根中黄酮类和皂苷类成分含量有显著影响,AM真菌与长果颈黄芪中的黄酮类和皂苷类成分含量呈正相关。AM真菌的施用能够提高长果颈黄芪的植物药用品质。     

葡萄细胞培养生产白藜芦醇的研究

以巨峰和红地球葡萄的不同组织为试材,利用不同培养基对其愈伤组织进行诱导,测定愈伤组织中的白藜芦醇含量.结果表明:在B5基本培养基附加6 mg/L NAA和0.6 mg/L 6-BA的培养条件下,巨峰葡萄果皮愈伤组织的诱导率最高,达87%.愈伤组织中白藜芦醇的含量均高于其对应外植体中的含量,其中巨峰葡萄果皮愈伤组织中的白藜芦醇含量最高,达11.184 μg/g.经6次继代培养可诱导出生长势强、白藜芦醇含量为14.296 μg/g的巨峰葡萄优良愈伤组织.     

水杨酸对黄芪愈伤组织代谢产物中几种E活性的影响

目的探讨水杨酸对黄芪愈伤组织代谢产物中几种E活性的影响.方法通过添加不同浓度的水杨酸（SA）处理黄芪愈伤组织,并从提取物中检测几种酶活性的变化.结果黄芪愈伤组织代谢产物中的过氧化物酶（POD）、过氧化氢酶（CAT）、多酚氧化酶（PPO）和苯丙氨解氨酶（PAL）的活性均随水杨酸（SA）体积质量和培养时间的改变而改变,随着SA浓度的增加可提高PAL,POD及PPO的活性,但抑制CAT的活性.结论 SA体积质量在0.01 mg/L时抑制CAT活性最明显;SA体积质量在0.1 mg/L和1 mg/L时POD和PPO活性最高,并且均在36 h出现最高峰.     

刺五加不同树龄与不同采收期折干率及总皂苷含量的研究

测定不同时期采收的刺五加根和叶片的折干率和总皂苷(B、E)含量,确定最佳采收期;测定不同树龄刺五加根的总皂苷含量,确定适宜采收树龄。采用超声提取-分光光度法测定刺五加叶、根中总皂苷含量。结果表明,根采收时期愈延迟,其折干率和刺五加苷含量越高。休眠期至翌年的3月下旬采收,根的折干率和刺五加苷含量最高;7月上旬采收叶片,其折干率和刺五加苷含量最高。10月下旬土层封冻之前,根和叶片的折干率和刺五加苷含量较高,为最佳采收时期。     

“芝芪菌质”发酵配方的筛选及主要有效成分的含量测定

[目的]对芝芪菌质的不同发酵配方进行筛选,并且对芝芪菌质中总皂苷和粗多糖含量进行测定,从而为制定质量标准做前期准备。[方法]芝芪菌质的水提醇沉的浓缩液用正丁醇萃取出总皂苷;滤渣用于测定粗多糖;依照05版药典规定用紫外分光光度法测定芝芪菌质中总皂苷和粗多糖的含量。[结果]采用紫外分光光度法测定芝芪菌质中总皂苷和粗多糖的平均含量,分别为0.243 3%和1.161 6%。[结论]含2.5%黄芪药材的芝芪菌质效果更优。     

土壤改良对平地栽参人参茎叶总皂苷含量的影响

以人参(Panax ginseng C.A.Mey)茎叶总皂苷为评价指标,研究平地栽参不同土壤改良的最优方案.试验以二次回归正交旋转设计为基本数学模型,研究玉米秸秆、猪粪、鹿粪、拮抗菌、菌糠5种基质的不同组合对人参茎叶总皂苷含量的影响.模型解析发现,在相同的栽培条件下,5种基质对人参茎叶总皂苷含量的贡献从大到小为猪粪、鹿粪、玉米秸秆、菌糠、拮抗菌.计算机模拟寻优表明,玉米秸秆施用量6.64kg/m2,猪粪施用量3.24 kg/m2,鹿粪施用量3.48 kg/m2,拮抗菌施用量6.87 g/m2,菌糠施用量7.02 kg/m2条件下,人参茎叶总皂苷含量预测值为17.81％.综上这些栽培因素的组合可以作为平地栽培人参的推荐方案.     

不同品种紫花苜蓿中总皂苷含量的比较研究

采用比色法测定了北京地区栽培不同年限的45个紫花苜蓿品种茎、叶中总皂苷的含量。结果表明,各品种苜蓿叶片中的皂苷含量均高于茎,在不同品种之间存在明显差异。4年生植株中皂苷含量最高的品种“Vernal”为1.174%,最低的品种“Empress”为0.606%;3年生植株中最高的品种“WL442”为1.141%,最低的品种“农保”为0.788%;2年生植株中最高的品种“胜利者”为1.293%,最低的品种“全能”为0.722%。综合比较,含量最低品种与最高的品种相差2.13倍。栽培年限对紫花苜蓿皂苷含量具有一定影响。     

不同单株滇皂荚皂角仁的皂苷含量

为筛选高皂苷含量滇皂荚优良单株,采用紫外分光光度法结合灰色关联度分析法测定采自云南省梁河县的10份不同单株滇皂荚皂角仁的皂苷含量,并研究其植株性状因素与皂苷含量的相关性。结果表明:不同单株皂角仁皂苷含量的差异较大,对皂苷含量在平均水平之上的5株单株进行聚类分析,筛选出优良单株2号植株,其皂苷含量[(25.49±0.04)mg/g]为平均水平的1.47倍。滇皂荚皂角仁的皂苷含量与植株性状各影响因素间的关联度依次为出籽率冠幅面积地径株高树龄。     

不同苦瓜品种多糖与皂苷的含量差异及最佳采摘期研究

为了研究不同苦瓜品种中多糖和皂苷含量的差异,以41个苦瓜品种为材料,进行了多糖和皂苷含量测定,并对结果进行了聚类分析。结果表明：多糖与皂苷的含量在不同品种间存在显著差异;41个苦瓜品种可聚为7大类群,在7大类群中,类群5（碧丽）为多糖与皂苷含量最高的优选品种,其余各类群多糖含量与皂苷含量的相关性并不显著。同时,又以如玉5号和早碧绿两个主栽品种为材料,进行了最适采摘期的研究。结果表明：多糖含量随着发育时间的延长逐渐增加;而皂苷含量随着发育时间的延长出现升降波动;从供试苦瓜的整体来看,如玉5号和早碧绿两个品种的的最佳采摘期分别在授粉后25和25～30d。     

不同培养基对三七花粉愈伤组织皂甙含量的影响

[目的]探讨不同培养基上三七花粉愈伤组织培养过程中总皂甙含量的变化情况。[方法]以MS培养基为基本培养基,添加不同的激素(IAA、NAA、KT、6-BA、GA2、,4-D、HL)和营养物质(蔗糖、琼脂)配制成5种不同的培养基,研究不同培养基对三七花粉愈伤组织中皂甙含量的影响。[结果]不同培养基培养的三七花粉愈伤组织中总皂甙的含量不同,5种培养基中总皂甙含量最高的为3.45%,最低的为0.02%,两者相差172.5倍。[结论]培养基中添加2,4-D有可能会促进三七花粉愈伤组织中皂甙的合成,增加总皂甙含量。     

不同覆盖栽培方式对金铁锁生长习性及其总皂苷的影响

为了研究金铁锁覆盖栽培的效果,笔者采用白色农膜覆盖、银黑双色农膜覆盖、绿色无纺布覆盖和不覆盖任何农膜(CK)四种方式,研究了金铁锁种子直播栽培的效果。结果表明:不同覆盖栽培金铁锁,其生长情况存在很大差异,其中表现最好的是覆盖银黑双色农膜,杂草滋生和病虫害都较少,长势也较好。相对较差的是对照和覆盖绿色无纺布种植,覆白色农膜的表现一般;不同覆盖栽培方式栽培的金铁锁,其有效成分总皂苷的含量也存在一定差异,覆盖银黑双色农膜的总皂苷含量最高,其次是覆盖白色农膜的,覆盖无纺布的含量最低。     

有机烟草生产中蜗牛的防治方法研究

通过室内药效测定与田间药效试验,对生石灰、25%茶皂素、0.3%印楝素防治蜗牛的效果进行了比较研究。结果表明:(1)室内试验中,25%茶皂素以浓度为12.5 g/L和10 g/L防治蜗牛,药后72 h校正死亡率均达到99%以上。(2)田间试验中,25%茶皂素或10 kg/667m2生石灰都具有较好的防治效果。其中25%茶皂素各浓度处理间防治效果差异显著,以施500 g/667m2防效最佳,且在时间上表现出递增效应,药后10 d校正死亡率达到90.81%,生石灰在施药后3 d防效达到85.19%,其速效性强,但随药后时间延长药效有所下降。0.3%印楝素对蜗牛防治效果较差。     

濒危植物夏蜡梅总皂甙含量及其环境因子相关性研究

对不同样地、不同海拔高度夏蜡梅营养器官的总皂甙含量进行测定,并分析了与环境因子之间的相关性。结果表明:(1)夏蜡梅不同营养器官的总皂甙含量以叶片最高,1年生枝、根次之,2年生枝、茎最低。叶片的总皂甙含量与其他器官差异均极显著。根的总皂甙含量与海拔高度呈显著的负相关,其他器官与海拔高度相关不显著。(2)阴坡的1年生枝、根的总皂甙含量比阳坡高,差异极显著;其余器官在阴、阳坡之间的含量差异不显著。(3)夏蜡梅7个居群叶片总皂甙含量在0.295 9%~0.415 5%之间,平均为0.340 0%。(4)通径分析显示,土壤P含量对夏蜡梅叶片总皂甙含量起负相关作用,土壤N含量起正相关作用,有机质、土壤pH值、海拔高度也起正相关作用。