植酸酶的高密度发酵、制备及其应用研究

从甲醇添加量、诱导温度、生长时间等方面对重组酵母摇瓶发酵条件进行研究,并以此为基础探讨其在30L发酵罐上产植酸酶的条件,从而为大规模的生产提供理论依据。对发酵过程中的诱导时间,诱导期间的甲醇与甘油的流加速度和比例以及诱导pH值进行了分析。得到最佳产酶条件为生长时间20h、甲醇流加速度5ml/(L·h)、诱导期甘油流速速度1ml/(L·h)、诱导pH值为4、诱导时间84h、诱导温度26℃,酶活力可达到454U/ml,比未优化前提高接近3倍。发酵液经过超滤浓缩添加复合稳定剂制成饲料后投入到小规模草鱼养殖应用中,结果表明,在植酸酶添加量为0.08%可以替代磷酸二氢钙,证明该菌株具有大规模工业化生产的前景。     

植酸酶固体发酵条件的研究

以黑曲霉VL0098为出发菌株，采用固体培养法，以麦麸、米糠为基本原料进行研究。结果表明，植酸酶固体发酵的最佳条件：麦麸：米糠7：3，葡萄糖2．0％，硫酸铵2．5％，料：水1：0．9，pH值5．5—6．0；在28—30℃恒温培养96h后，固态发酵植酸酶酶活达72U／g干基。并进行了扩大培养，确定了发酵工艺。     

植酸酶基因工程菌的发酵研究

对植酸酶基因工程菌（E-22）发酵产植酸酶条件作的。研究结果表明。接种龄36h,接种量10％,增菌时间72h,发酵液pH6．0,甲醇添加量15％,装液量10％,诱导表达120h能很好的提高产酶,测得酶活164416.7 IU／mL。发酵培养基中添加抗生素或表面活性剂对发酵产酶有一定的抑制作用。     

工程菌产植酸酶摇瓶发酵条件初探

本实验根据毕赤酵母工程菌的特点,在摇瓶中对重组毕赤酵母工程菌株PP-MS-NPm-4-16的发酵条件进行初步研究。确定了60%麦芽-麸皮培养基,40%的蚕蛹培养和190mg/L的酵母营养盐作为高密度发酵的基础培养基,生长阶段和诱导阶段最佳pH分别为5.0和5.5。通过正交实验得到工程菌的最佳摇瓶培养条件为:接种量4%,甲醇浓度40g/L,生长阶段豆油浓度1.3%,诱导阶段豆油浓度3.5%,植酸酶酶活最高可达到192400U/mL。     

米曲霉A-1固体发酵产胞外高活性植酸酶工艺研究

利用桑杆、蔗渣、棉籽壳、板栗壳等农业废弃物为固体碳源,米曲霉A-1为出发菌株,进行固体发酵产植酸酶条件优化研究。试验结果表明,蔗渣为最优固体碳源,NH4NO3为氮源,添加0.5%表面活性剂吐温80以诱导产胞外植酸酶,CaCl2.2H2O更利于酶的提取,40℃培养4 d,酶活达到336 U/g。     

基因工程酵母产植酸酶的应用性质研究

本文详细介绍了基因工程酵母产植酸酶的应用特性,包括对酸碱、热和对胃蛋白酶的稳定性等。     

黑曲霉液体发酵产植酸酶条件的研究

试验以黑曲霉(Aspergillusniger)30132为材料,研究了碳源、氮源、培养基、起始pH值、接种量、温度对该菌株产植酸酶活力的影响。结果表明:黑曲霉30132的最适发酵温度为28℃,产酶pH值为5,最佳接种量为10%;在此条件下,以8%麸皮为碳源、0.5%硫酸铵为氮源时,产酶活力最高,发酵3d后发酵液中植酸酶活力高达35.5U/ml。     

黑曲霉液态发酵产植酸酶的条件优化研究

文章以黑曲霉为出发菌株,通过初筛、复筛,得到一株产植酸酶的菌株,对发酵时间、温度及pH进行单因素试验,并利用正交设计进行工艺优化。结果表明,当培养基pH为5.5、温度为30℃、发酵时间为5d时,黑曲霉发酵产植酸酶活力最大,为14.35U/mL。     

植酸酶产生菌的选育研究

经采样、分离、筛选出多株植酸酶产生菌,选出其中产酶水平较高的两株菌种Ｃ２１２３—１５—７＃和Ｃ２１２３—１５—６４＃,并对其在液态培养时进行了产植酸酶条件的研究,结果表明：在最适培养条件下,两株菌种产酶活力均在１１０Ｕ／ｍｌ以上,最高者可达１１２８Ｕ／ｍｌ,比出发菌株提高了１６８５７％,发酵时间缩短了４５％左右。     

青鱼生长激素基因酵母工程菌发酵条件的研究

为研究青鱼生长激素基因工程菌在豆粕中的发酵工艺,试验采用L25(56)正交设计探讨温度、pH、培养时间、豆粕质量浓度、接种量和诱导剂质量浓度等6个因素对青鱼生长激素基因工程菌的生长和蛋白表达量的影响。结果表明:各因子对蛋白表达量的影响明显,它们的作用大小依次为发酵时间pH接种量发酵温度诱导剂质量浓度豆粕质量浓度,最优发酵组合条件为发酵时间96h、pH7、接种量5%、发酵温度30℃、诱导剂质量浓度1%及豆粕质量浓度6%。确立发酵工艺后进行10L发酵罐发酵,活菌数达到79.6亿CFU/mL,青鱼生长激素表达量占总蛋白的28.4%。     

植酸酶在畜禽饲养中应用的功效及应注意的问题

1　植酸酶在畜禽日粮中的应用效果1 1　提高植酸磷的利用率　植酸酶是一种能水解植酸的磷酸酶类 ,能将植酸降解为肌醇和无机磷酸 ,使无机磷等矿物元素释放出来 ,从而促进动物机体对磷的吸收利用 ,减少磷的排出。一般来说 ,日粮营养利用率越低 ,添加植酸酶效果越好。Han等 ( 1     

植酸酶的研究与应用

植物性饲料中磷的含量相对较少,而其中约有60％～75％的磷以植酸的形式存在（Markus等,1999;Pasamontes等,1997;Ostanin等,1968;Nelson等,1968）,饲料植酸中的磷必须在消化道内水解成无机磷酸盐才能被动物利用。反刍动物瘤胃微生物能产生植酸酶,可有效地分解植酸磷并利用释放出的磷,利用率一般为60％,成年反刍动物可高达90％;而单胃动物缺乏能水解植酸的酶或其酶的活性极低（Pointillart等,1984;Markus等,1999）,因而单胃动物对植物饲料中的磷利用率很低。研究表明,猪只能利用玉米中磷的10％～12％：利用豆粕中磷的25％～35％（Cromwell,1993）。典型猪13粮中磷的利用率只有15％,而85％的磷随粪便排出。     

植酸酶的应用效果研究进展

植酸酶是近年来开发应用的一类环保与新型的微生物饲料添加剂。一方面,具有生物活性的植酸酶通过催化和水解能将饲料中丰富的植酸及其络合物分解为能被畜禽利用的无机磷和肌醇,取代或减少在配合饲料中需要添加的无机磷。从而提高饲料中磷的利用率,节约大量无机磷资源,并大幅度减少畜禽粪便中磷的排放量,降低磷对环境的污染。另一方面,植酸酶通过分解植酸,解除了对磷、钙、蛋白质、微量元素和维生素等营养物质的结合作用,提高了饲料潜在的营养价值和畜禽肌体骨骼矿化程度,相对降低了饲料成本,使植酸酶在畜禽生产中的广泛应用成为可能。     

植酸磷水平对植酸酶使用效果的影响

选用135头体质健康、体重60kg左右的杜×大×长三元杂交猪,随机分为5个处理组,研究不同植酸磷水平对植酸酶使用效果的影响。试验结果表明,加植酸酶情况下,有效磷达0.165%、植酸磷水平为0.25%时大猪的生长性能最好。玉米—豆粕型大猪饲粮中的植酸磷水平能使500IU/kg的植酸酶发挥正常功效,一般不会出现“底物”不足的情况。     

植酸酶基因在原核细胞中表达及植酸酶应用进展

植酸酶(Phytase)是催化植酸及其盐类物质水解成肌醇和磷酸的一类酶的总称,广泛存在于微生物、麦芽、种子等中[1].植酸酶可使单胃动物对饲料中磷的利用率提高60%,粪便中磷的排出量减少40%,另外还可降低植酸的抗营养作用.因此植酸酶在饲料工业中的应用对提高养殖业效益和降低环境污染有重要意义.生产植酸酶的表达系统包括真核表达系统和原核表达系统.真核表达系统主要有丝状真菌表达系统和酵母表达系统;原核表达系统主要是大肠杆菌表达系统.     

植酸酶发酵生产的研究进展

<正>植酸酶(EC 3.1.3.8或者EC 3.1.3.26,肌醇六磷酸盐磷酸水解酶)是催化植酸及植酸盐水解为肌醇和磷酸(或磷酸盐)的一类水解酶的统称。目前已知的植酸酶包括肌醇六磷酸3-磷酸水解酶、肌醇六磷酸6-磷酸水解酶[1-2]。植酸酶在饲料、食品、医药等领域有着广泛的作用。植酸酶是一种环保型饲料添加剂,能使饲料中植     

The efficacy of an Escherichia coli-derived phytase preparation

Five experiments were conducted to evaluate the effect of an Escherichia coli-derived phytase on phytate-P use and growth performance by young pigs. The first experiment involved time course, pH dependence, and phytase activity studies to investigate the in vitro release of P from corn, soybean meal, and an inorganic P-unsupplemented corn-soybean meal negative control diet. In Exp. 2, which was designed to determine the efficacy of the E. coli-derived vs. fungal phytase-added diets at 0, 250, 500, 750, 1,000, or 1,250 FTU/kg (as-fed basis; one phytase unit or FTU is defined as the quantity of enzyme required to liberate 1 micromol of inorganic P/min, at pH 5.5, from an excess of 15 microM sodium phytate at 37 approximately C) and a positive control diet, eight individually penned 10-kg pigs per diet (12 diets, 96 pigs) were used in a 28-d growth study. The third experiment was a 10-d nutrient balance study involving six 13-kg pigs per diet (four diets, 24 pigs) in individual metabolism crates. In Exp. 4, eight pens (four pigs per pen) of 19-kg pigs per treatment were used in a 42-d growth performance study to examine the effect of adding the E. coli-derived phytase to corn-soybean diets at 0, 500, or 1,000 FTU/kg (as-fed basis) and a positive control (four diets, 128 pigs). In Exp. 5, six 19-kg pigs per treatment were used in a 10-d nutrient balance study to investigate the effects of the E. coli-derived phytase added to diets at 0, 250, 500, 750, or 1,000 FTU/kg (as-fed basis) and a positive control diet (six diets, 36 pigs). The in vitro study showed that the E. coli-derived phytase has an optimal activity and pH range of 2 to 4.5. Inorganic phosphate release was greatest for soybean meal, least for corn, and intermediate for the negative control diet. Dietary supplementation with graded amounts of E. coli-derived phytase resulted in linear increases (P < 0.05) in weight gain, feed efficiency, and plasma Ca and P concentrations in 10-kg pigs in Exp. 2. Phytase also increased P digestibility and retention in the 13-kg pigs in Exp. 3. In Exp. 4, dietary supplementation with E. coli-derived phytase resulted in linear increases (P < 0.05) in weight gain and feed efficiency of 19-kg pigs. Supplementation of the diets of 19-kg pigs with the E. coli-derived phytase also improved Ca and P digestibility and retention in Exp. 5. In the current study, the new E. coli-derived phytase was efficacious in hydrolyzing phytate-P, both in vitro and in vivo, in young pigs.     

植酸酶应用要考虑的几个实际问题

无机磷的使用造成了如下两方面的问题:一是为了满足饲料业和养殖业的需求,消耗了大量昂贵的磷矿资源,无机磷资源在全世界已处于匮乏状态,一克无机磷的价格远远超过了一克优质蛋白质的价格。二是日粮中的磷只有很小部分沉积到体内和畜产品中,因而对环境,特别是集约化饲养时,对地下水和土壤的污染。随着生物技术的发展,人们发现植酸酶成为解决饲料用磷问题最有吸引力的途径。肉鸡饲料中含有0.6%～1.2%的抗营养因子植酸。植酸具有很强的螯合能力,不仅使植酸磷无法使用,植酸性饲料中的磷由于是以植酸或植酸盐的形式存在,猪禽对其利用率很低。大…     

低营养水平饲粮中添加植酸酶、纤维素复合酶对蛋鸡产蛋性能及蛋壳质量的影响

试验以正常营养水平饲粮为对照,研究在营养水平降低6%的低营养水平饲粮中,添加植酸酶、纤维素复合酶对蛋鸡生产性能、蛋壳质量影响。试验用27周龄海兰灰蛋鸡576只设4个处理,每处理4个重复,每重复36只,处理1为不加酶的正常营养水平饲粮(T1),处理2为不加酶低营养水平饲粮(T2),处理3为T2+200g/t植酸酶(25000FYT/g)(T3),处理4为T2+200g/t纤维素复合酶(T4)。处理3的产蛋率、采食量、料蛋比及破蛋率、脏蛋率与处理1、处理2为差异不显著(P>0.05),但料蛋比、破蛋率、脏蛋率都低于处理2,Ca、TP、植酸磷的利用率极显著高于处理2(P<0.01),CP利用率与处理2差异不显著(P>0.05)。处理4的产蛋率、料蛋比及破蛋率与处理1、处理2差异不显著(P>0.05),但产蛋率接近处理1,料蛋比、破蛋率都低于处理2,采食量极显著高于处理2(P<0.01),脏蛋率极显著低于处理2、处理1(P<0.01),Ca、TP、植酸磷的利用率与处理2差异不显著(P>0.05),CP利用率极显著高于处理2(P<0.01),结果表明:在非常规原料比例较高的低营养水平日粮中,200g/t植酸酶添加量可能不足以水解植酸,添加200g/t纤维素复合酶,蛋鸡的生产性能和蛋壳质量能达到正常营养水平饲粮的效果。