氨氮对福瑞鲤鳃和肝组织抗氧化能力的影响

[目的]研究氨氮对鲤幼鱼不同组织抗氧化能力的影响,进一步阐明氨氮的毒理机制.[方法]以福瑞鲤幼鱼为研究对象,设置对照组(0 mg/L)、低浓度(10 mg/L)氨氮胁迫组、中浓度(20 mg/L)氨氮胁迫组、高浓度(30 mg/L)氨氮胁迫组,分别在试验的6、24、48和96h取样,研究氨氮胁迫对福瑞鲤肝和鳃组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和总抗氧化能力(T-AOC)的影响.[结果]氨氮胁迫6h诱导福瑞鲤幼鱼鳃组织SOD活性迅速显著升高,而肝组织中SOD活性在氨氮胁迫24h显著升高.随着氨氮胁迫时间的延长,肝和鳃组织中SOD活性和总抗氧化能力都呈现降低的趋势,鳃组织中这种变化更为明显.氨氮胁迫过程中,鳃和肝组织总抗氧化能力与SOD活性呈现同样的变化趋势,说明细胞总抗氧化能力与SOD活性呈一定的相关性.[结论]氨氮胁迫诱导福瑞鲤幼鱼肝和鳃组织中SOD活性和总抗氧化能力改变,鳃组织中SOD活性可作为监测氨氮毒性的有效生物标志物.     

水体铜对黄河鲤肝胰脏抗氧化酶活性和总抗氧化能力的影响

为了研究不同浓度的水体铜对黄河鲤肝胰脏抗氧化能力的影响,采用0.01、0.05、0.10、0.30、0.50、0.70和1.00 mg·L-1 Cu2 分别刺激黄河鲤1、3、5、7 d后,测定黄河鲤肝胰脏抗氧化酶(超氧化物歧化酶SOD、过氧化氢酶CAT和谷胱甘肽过氧化物酶GPx)的活性及总抗氧化能力(T-AOC).结果表明,黄河鲤暴露于0.01mg·L-1Cu2 溶液时,SOD、CAT和GPx活性及T-AOC高于对照组,其中GPx活性达到最大,且显著高于对照组(P<0.05),T-AOC 3、5、7 d时,显著高于对照组(P<0.05);Cu2 度为0.05 mg·L-1时,SOD和CAT活性及T-AOC(P<0.05)达到最大,其中SOD和CAT活性3、5、7 d时,显著高于对照组(P<0.05),GPx活性1 d时高于对照组,3、5、7 d时低于对照组,其中5、7 d时,显著低于对照组(P<0.05);Cu2 浓度为0.10 mg·L-1时,SOD活性3、5、7 d显著低于对照组(P<0.05),CAT和GPx活性及T-AOC显著低于对照组(P<0.05);高浓度组(0.30、0.50、0.70和1.00 mg·L-1)Cu2 抑制了SOD、CAT和GPx活性及T-AOC.结果提示,黄河鲤肝胰脏SOD、CAT和GPx活性及T-AOC对铜的污染均具指示作用,其中最为灵敏的是GPx活性.可以用来指示低剂量重金属的污染.     

绿原酸对建鲤生长、非特异性免疫功能和抗氧化能力的影响

试验研究绿原酸对建鲤生长、非特异性免疫及抗氧化能力的影响。选择均重为(62.93±5.82)g的建鲤360尾,随机分为5组(A～E组)。分别添加0、100、200、400和800mg/kg的绿原酸,于试验第10、20、30和40天取样,分别测定各组增重率、头肾指数、脾脏指数、白细胞吞噬率、血浆溶菌酶、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶活性、总抗氧化能力及丙二醛含量。结果表明:第40天C组的增重率显著高于A组(P<0.05);各时段C组的头肾指数显著高于A组(P<0.05);第10、20和30天D组的脾脏指数显著高于A组(P<0.05);第10天,第20天和第30天C、D组的白细胞吞噬率显著高于A组(P<0.05);各时段D组血浆溶菌酶的活力显著高于A组(P<0.05);除第40天E组与A组的SOD差异不明显外(P>0.05),其余各组各时段的SOD均显著高于A组(P<0.05);第30、40天D组的CAT显著高于A组(P<0.05);第20、30和40天D组的T-AOC显著高于A组(P<0.05);第20、30和40天C、D组的MDA显著低于A组(P<0.05)。综合各指标的变化规律可知:①添加200mg/kg绿原酸能显著促进建鲤的生长;②添加200～400mg/kg绿原酸能显著增强建鲤的非特异性免疫和抗氧化能力;③长时间、高剂量添加绿原酸对建鲤的生长、非特异性免疫和抗氧化能力均有一定的抑制作用。     

德式乳酸杆菌对黄河鲤抗胁迫能力的影响

为研究德式乳酸杆菌对黄河鲤应激前后抗应激指标、血液免疫指标、抗氧化指标和HSP70、HSP90基因表达的影响,选取黄河鲤450尾,随机分为5组(每组3个平行,每个平行30尾鱼),分别投喂在基础饲料中添加不同浓度乳酸菌(0、1×105、1×106、1×107、1×108CFU/g)的日粮,养殖8周后,进行拥挤胁迫。试验结果表明:应激前,皮质醇浓度在1×106、1×107CFU/g乳酸菌组显著低于对照组(P 0. 05),血糖和乳酸浓度在试验组显著低于对照组(P 0. 05),溶菌酶活性在1×106、1×107CFU/g乳酸菌组显著高于对照组(P 0. 05),C3和C4在1×106CFU/g乳酸菌组显著高于对照组(P 0. 05)。应激后,血液皮质醇、血糖和乳酸浓度都有不同程度的升高,这些指标在添加乳酸菌组的含量均显著低于对照组(P 0. 05),血液溶菌酶活性、C3和C4浓度也有升高趋势,且在1×106CFU/g乳酸菌组显著高于对照组(P 0. 05);应激前后SOD和CAT活性在1×106CFU/g乳酸菌组显著高于对照组(P 0. 05),MDA含量呈相反的趋势,在1×106、1×107CFU/g乳酸菌组显著低于对照组(P 0. 05),应激使HSP70和HSP90基因表达均有升高趋势,在应激前后试验组的HSP70和HSP90基因表达量大部分都显著高于对照组(P 0. 05)。该研究结果显示,饲料中添加1×106～1×107CFU/g德式乳酸菌能提高黄河鲤的免疫力、抗氧化和抗应激的能力。     

氧化鱼油对鲤肝胰脏抗氧化机能

在半纯化饲料中添加质量分数为３％的新鲜鱼油（过氧化物值ＰＯＶ为０．６４ｍｍｏｌ／ｋｇ）和ＰＯＶ分别为２９．６４、５９．４０和９４．６９ｍｍｏｌ／ｋｇ（以Ｏ２计）的氧化鱼油,投喂１００ｇ左右２龄鲤（Ｃｙｐｒｉｎｕｓ ｃａｒｐｉｏ）鱼种１５周,结果表明：鲤摄食氧化鱼油后,肝胰脏维生素Ｅ含量下降（Ｐ〈０．０５）,抗氧化酶超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）和谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）活性减弱（Ｐ〉０．０５）,微粒体氧化稳定性降低（Ｐ〈０．０５）,鱼渔氧化程度升高,上述变化加强;肝胰脏脂肪含量增加（Ｐ〉０．０５）;肾脏和脾脏增生（Ｐ〉０．０５）;肝胰脏肝细胞纤维化、线粒体嵴降解和融合。上述系列变化表明氧化钱油可以破坏鲤肝胰脏抗氧化机能及其正常的组织结构。     

虎杖提取物对CCl4致建鲤肝损伤抗氧化系统的影响

主要探讨基础饲料中添加虎杖提取物对建鲤肝损伤中抗氧化性能的影响.建鲤被随机分为6个组,每组20条,即Ⅰ组(CCl4)、Ⅱ组(0.5％虎杖提取物)、Ⅲ组(1％虎杖提取物),按每10 g体质量0.05 mL体内注射30％ CCl4;Ⅳ组(0.5％虎杖提取物)、Ⅴ组(1％虎杖提取物)体内不注射CCl4,只注射同体积植物油;Ⅵ为空白对照组,也注射同体积植物油.每日饲喂2次,连续8周,注射72 h后模型建立成功.检测建鲤血清中LDH、GPT、GOT、TP、ALB的表达水平;检测肝组织匀浆中SOD、GSH-Px、MDA、CAT、T-AOC含量的变化.结果表明:1％的虎杖提取物(Ⅴ组)对于清除自由基,防治肝损伤有很好的效果,能显著提高SOD、GSH-Px含量,降低MDA含量;显著提高T-AOC和CAT含量;显著增加TP、ALB活性;显著降低血清中GPT、GOT、LDH的活性,与空白对照组相比,差异不显著(P＞0.05);与CCl4组相比,差异显著(P＜0.05),而0.5％和1％虎杖提取物对照组则无明显变化.     

阿特拉津和毒死蜱对鲤胚胎发育的影响

研究旨在探讨不同浓度阿特拉津(Atrazine,ATR)、毒死蜱(Chlorpyrifos,CPF)及其混合物对鲤(Cyprinus carpio L.)胚胎发育、孵化率及抗氧化能力的影响。将鲤受精卵分别暴露在各自浓度为12.5、25、50、100、200μg·L-1的ATR、CPF及ATR-CPF 1??1混合液中,经96 h试验,观察发育形态,统计死亡率和畸形率,检测全鱼抗氧化能力。在暴露试验中,各处理组死亡率和畸形率随药物浓度增长呈上升趋势;初孵仔鱼体内SOD、GPx和CAT活性整体呈下降趋势。结果表明,阿特拉津和毒死蜱对鲤受精卵具有一定的致死、致畸效果,且两者生物毒性具有一定的叠加效应和协同作用,氧化胁迫是阿特拉津和毒死蜱对鲤发挥毒性作用的重要机制之一。     

牛至油对建鲤生长性能和血清抗氧化能力的影响

采用单因子浓度梯度法,将牛至油以0.025%、0.05%、0.1%的剂量添加到基础饲料中,并以基础料为空白对照组,饲喂建鲤(体重16.15 g±0.03 g),试验期90 d,测定建鲤的生长性能、血清中总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的含量.结果表明:与空白对照组相比,添加0.025%和0.05%组建鲤的增重率分别提高6.1%、7.4%,饲料系数降低5.0%、5.1%(P＜0.05).添加组牛至油组建鲤血清均能显著提高T-AOC和SOD(P＜0.05),血清中MDA显著降低(p＜0.05),表明添加牛至油能显著提高建鲤鱼种血清抗氧化能力.     

牛磺酸对鲤非特异性免疫及抗氧化能力的影响

采用单因子浓度梯度法,将牛磺酸以0.05%、0.10%、0.15%、0.20%的剂量添加到基础饲料中,以基础饲料为对照,饲喂鲤(体重40.73±3.92 g)30 d后,测定血清和肝胰脏的溶菌酶活力、超氧化物歧化酶活力、过氧化氢酶活力和丙二醛的含量.结果表明:牛磺酸可以提高鲤血清和肝胰脏的溶菌酶活力、超氧化物歧化酶活力、过氧化氢酶活力,降低鲤血清和肝胰脏中的丙二醛含量,其中0.10%添加组效果最好,极显著地提高鲤血清和肝胰脏的溶菌酶活力(P<0.01),比对照组分别提高9.74%、8.04%;极显著地提高鲤血清和肝胰脏的超氧化物歧化酶活力,比对照组分别提高18.00%、14.40%;极显著地提高鲤血清的过氧化氢酶活力,显著地提高鲤肝胰脏的过氧化氢酶活力(P<0.05),比对照组分别提高16.87%、9.98%;极显著地降低鲤血清和肝胰脏的丙二醛含量,比对照组分别降低25.28%、15.21%.饲料中适宜剂量牛磺酸的添加,能显著增强鲤的抗氧化能力和非特异性免疫功能,减轻鱼体的脂质过氧化作用.     

牛磺酸对鲤非特异性免疫及抗氧化能力的影响

采用单因子浓度梯度法,将牛磺酸以0.05%、0.10%、0.15%、0.20%的剂量添加到基础饲料中,以基础饲料为对照,饲喂鲤(体重40.73±3.92 g)30 d后,测定血清和肝胰脏的溶菌酶活力、超氧化物歧化酶活力、过氧化氢酶活力和丙二醛的含量.结果表明:牛磺酸可以提高鲤血清和肝胰脏的溶菌酶活力、超氧化物歧化酶活力、过氧化氢酶活力,降低鲤血清和肝胰脏中的丙二醛含量,其中0.10%添加组效果最好,极显著地提高鲤血清和肝胰脏的溶菌酶活力(P<0.01),比对照组分别提高9.74%、8.04%;极显著地提高鲤血清和肝胰脏的超氧化物歧化酶活力,比对照组分别提高18.00%、14.40%;极显著地提高鲤血清的过氧化氢酶活力,显著地提高鲤肝胰脏的过氧化氢酶活力(P<0.05),比对照组分别提高16.87%、9.98%;极显著地降低鲤血清和肝胰脏的丙二醛含量,比对照组分别降低25.28%、15.21%.饲料中适宜剂量牛磺酸的添加,能显著增强鲤的抗氧化能力和非特异性免疫功能,减轻鱼体的脂质过氧化作用.     

鲤遗传连锁图谱的构建

利用JoinMap 4.0软件包,以德国镜鲤选育系为祖父母所培育的自交F2群体的68个个体为作图群体,首次以新型分子标记单核苷酸多态性(Single Nucleotide Polymorphism,SNP)为主要作图标记,以微卫星(Simple Sequence Repeats,SSR)和表达序列标签(Expressed Sequence Tag,EST)为辅助标记,采用CP(CrossPollinators)模型构建鲤的遗传连锁图谱。构建的遗传连锁图谱含有560个标记(174个SSR标记、41个EST-SSR标记和345个SNP标记),分布在50个连锁群上,最大连锁群由60个标记组成,最小连锁群仅含2个标记,平均每个连锁群有11.2个标记。最大连锁群的图距为198.1厘摩(centimorgan,cM),最小的连锁群图距为1.5 cM,图谱总图距为3 295.92 cM,标记间平均间距为7.21 cM,图谱覆盖率为76.26%。构建的图谱为中等密度的遗传连锁图谱可为进一步的鲤相关经济性状的QTL定位研究和分子标记辅助选择育种(MAS)打下基础。研究亮点:首次以新型分子标记SNP为主要作图标记并以SSR标记为...     

甲砜霉素在松浦镜鲤体内的药物代谢动力学研究

采用液相色谱与质谱连用技术(LC-MS),研究了以30 mg/kg(体质量)的药量在单次口灌给药条件下,甲砜霉素在松浦镜鲤Cynipus carpio L.体内的药物代谢动力学.试验水温为(20±0.2)℃,试验鲤(1+龄)体质量为(84.84±17.45)g.在给药后0.25、0.50、0.75、1.00、1.50、2.00、4.00、6.00、8.00、12.00、24.00、36.00、48.00、72.00 h采集鲤的肌肉、血浆、肝胰脏和肾脏,测定各组织中甲砜霉素的浓度,用药动学3P97软件进行数据分析和处理.结果表明,甲砜霉素在鲤体内吸收分布迅速,符合一级吸收二室开放模型,但消除缓慢.甲砜霉素在鲤血浆、肝胰脏、肾脏和肌肉中的主要药代动力学参数如下:消除半衰期(T1/2β)分别为77.292、24.625、79.966、25.600 h;分布半衰期(T1/2α)分别为7.317、0.454、7.409、1.376 h;药时曲线下总面积(AUC)分别为782.641 μg/(mL·h)、544.756μg/(g·h)、3 616.060 μg/(g·h)和158.634 μg/(g·h).鉴于甲砜霉素在鲤血浆和肾脏中的消除半衰期长,消除缓慢,建议使用该类药物时应相对延长给药间隔时间.     

甲砜霉素在松浦镜鲤体内的药物代谢动力学研究

采用液相色谱与质谱连用技术(LC-MS),研究了以30 mg/kg(体质量)的药量在单次口灌给药条件下,甲砜霉素在松浦镜鲤Cynipus carpio L.体内的药物代谢动力学。试验水温为(20±0.2)℃,试验鲤(1+龄)体质量为(84.84±17.45)g。在给药后0.25、0.50、0.75、1.00、1.50、2.00、4.00、6.00、8.00、12.00、24.00、36.00、48.00、72.00 h采集鲤的肌肉、血浆、肝胰脏和肾脏,测定各组织中甲砜霉素的浓度,用药动学3P97软件进行数据分析和处理。结果表明,甲砜霉素在鲤体内吸收分布迅速,符合一级吸收二室开放模型,但消除缓慢。甲砜霉素在鲤血浆、肝胰脏、肾脏和肌肉中的主要药代动力学参数如下:消除半衰期(T1/2β)分别为77.292、24.625、79.966、25.600 h;分布半衰期(T1/2α)分别为7.317、0.454、7.409、1.376 h;药时曲线下总面积(AUC)分别为782.641μg/(mL.h)、544.756μg/(g.h)、3 616.060μg/(g.h)和158.634μg/(g.h)。鉴于甲砜霉素在鲤血浆和肾脏中的消除半衰期长,消除缓慢,建议使用该类药物时应相对延长给药间隔时间。     

微量元素对鲤生长和营养状况的影响

在基础饲料中分别添加无机盐、螯合盐、麦饭石、麦饭石稀土,对比养鲤结果表明：麦饭石稀土（Ⅰ）组鲤生长最快,其次是螯合盐组、麦饭石稀土（Ⅱ）组、麦饭石组、无机盐组。未添加微量元素的基础组生长最慢。方差分析表明,添加麦饭石的３个试验组及螯合盐组鱼平均增重率与无机盐组差异显著（Ｐ〈０．０５）,与基础组差异极显著（Ｐ〈０．０１）;麦饭石稀土（Ⅰ）组与麦饭石组、无机盐组差异极显著（Ｐ〈０．０１）,与麦饭石稀土     

鲤鱼头肾显微结构研究

应用光镜对鲤鱼头肾的显微结构及其某些组织化学特性进行了研究。结果表明，头肾是鲤鱼的主要免疫器官，表面覆盖有一薄层纤维结缔组织性被膜，未见明显的小梁。实质主要由淋巴组织和血窦构成，可分为中央区及外周区。中央区的淋巴组织排列成索状，环绕血管呈放射状分布，细胞索之间由血窦隔开。外周区则以淋巴细胞排列密集的弥散性淋巴组织为特征。在头肾实擀中尚可见黑色素巨噬细胞中心、前肾间组织以及大小不一的甲状腺滤泡。     

镉污染对鲤鱼（Cyprinus carpio Linn.）同工酶酶谱的影响

应用聚丙烯酰胺凝胶电泳和酶活性测定技术,比较和分析了饲养于不同浓度镉液中的鲤鱼在镉含量达到积累－释放平衡后,其肌肉和肝脏组织的酯酶同工酶,碱性磷酸酶同工酶及过氧化物同工酶酶谱。结果不同浓度镉液中的鲤鱼在镉含量达到镉的残留量使鲤鱼肌肉和直脏组织酯酶同工酶和三性磷酸酶同工酶谱带减少,活性减弱;过氧化物酶同工酶谱带增多,活性增强。     

盐度对鲤标准代谢的影响

采用封闭式呼吸仪,在恒温27℃条件下,测定了鲤(1.37～5.30g)在不同温度下的标准代谢率。结果表明:鲤在淡水和盐度为3,5,7,9的水中,平均标准代谢率分别为97.10,65.55,115.41,120.59和136.29J/g·d,差异极显著。不同盐度下的标准代谢率(R_s;J/d)与体重(W;g)之间的关系均可用幂函数R_s=aw~b来描述,相关极显著,体重指数(b)无显著差异,但在7,9时,呈下降趋势。本文从渗透调节角度探讨了b值随盐度变化及盐度影响淡水鱼类标准代谢的生理机制。     

鲤鱼耐寒性状研究

用80个随机引物对黑龙江野鲤(耐寒)、柏氏鲤(不耐寒)和杂交F1(越冬成活)的群体混合DNA样品进行RAPD—PCR扩增，结果引物S1043、S1052和S1066扩增出与抗寒性状相关的分子标记各一个。至此，共获得9个与鲤鱼抗寒性状相关的分子标记，进一步表明抗寒性是数量性状(QTL)受微效多基因控制。此外，就RAPD—PCR实验中需要注意的问题如模板纯度、水的去离子和不同商标酶的活性等进行了简单的讨论；并对目前所应用的淡水鱼类抗寒基因工程研究策略及现状进行了简单概述。     

Genetic potential analysis of German mirror carp (Cyprinus carpio L.) using microsatellite markers

Using 30 microsatellite markers and combining quantifiable characteristics such as body weight, body length and body width, we evaluated the genetic potential of 3 German mirror carp (Cyprinus carpio L.) populations. Number of effective alleles (Ae), observed (Ho) and expected (He) heterozygosity values and polymorphic information contents (PIC) were all calculated. Two hundred and eighty-seven alleles and 559 genotypes were detected. The DNA fragment length was 109–400 bp. The Hardy-Weinberg Equilibrium was checked and the phenomenon of some disequilibrium was studied according to the χ² test. The results showed that the level of genetic variability was moderate, but genetic potential of Shuanglai population was much lower than that of Huanxin and Songpu breeding populations. PIC of the three populations of German mirror carp were between 0.08787 and 0.5377, both highly and moderately polymorphic markers were 13. The number of the Ae was between 1.1014 and 6.4665. The Ho and He heterozygosity values were 0.0968–0.9892 and 0.0926–0.8554, respectively. The linkage correlation was analyzed using the data of body weight, body length and body width, and 30 loci. The result showed that there existed 2 loci, HLJ319 and HLJ693, associated with body length. The HLJ693 locus was significantly correlated with body weight trait. The HLJ677 locus was linked with body width. And then the result was verified in Recombinant Inbred Lines (RIL) of common carp. It showed that the HLJ319 locus was significantly linked with body length, the same as the result of quantitative trait loci (QTL) location for common carp. __________ Translated from Hereditas (Beijing), 2007, 29(12): 1509–1518 [译自: 遗传 (北京)]