玉米赤霉烯酮吸附剂对后备母猪子宫中LC3、PCNA分布和表达的影响

【目的】已有研究证实玉米赤霉烯酮(ZEA)在动物体内可通过雌激素受体激活雌激素敏感基因,产生生殖毒性,影响子宫内膜细胞的生长、卵母细胞的成熟及卵泡颗粒细胞的增殖。探讨玉米赤霉烯酮吸附剂(沸石+蒙脱石等复合制剂)对后备母猪子宫的LC3与PCNA的分布和蛋白表达量的影响,从组织化学角度探讨该ZEA新型吸附剂的脱毒效果。【方法】选择体重30±2.11kg左右的(杜×长×大)健康三元杂交后备母猪48头,随机分为6组,每组8头,对照组饲喂基础饲粮、玉米赤霉烯酮组(ZEA)饲喂含有1.008 mg·kg^-1玉米赤霉烯酮的饲粮、0.1%新型吸附剂组(ZEA0.1)饲喂含有1.0 g·kg^-1吸附剂的ZEA组日粮、0.25%新型吸附剂组(ZEA0.25)饲喂含有2.5 g·kg^-1吸附剂的ZEA组日粮、0.5%吸附剂组(ZEA0.5)饲喂含有5.0 g·kg^-1吸附剂的ZEA组日粮、蒙脱石组(ZEA-M)饲喂含有2.5 g·kg^-1蒙脱石的ZEA组日粮。预试期7 d,正试期21 d,试验结束进...     

冬小麦春化期间玉米赤霉烯酮结合蛋白的研究

采用放射配体结合分析法结合生化技术分析屯冬小麦春化期间的玉米赤霉烯酮特异结合蛋白。表明在冬小麦幼苗中存在着ＺＥＮ的特异结合蛋白。ＺＢＰ对ＺＥＮ的结合具有可饱和的性质，Ｓｃａｔｃｈａｒｄ分析表明解离常数Ｋｄ＝１．９×１０＾－７ｍｏｌ．Ｌ＾－１结合位点数目ｎ＝６．２ｐｍｏｌ．ｍｇ＾－１可溶性蛋白。３０％饱和硫酸铵沉淀可使ＺＢＰ纯化３－４倍。对ＺＢＰ进行的聚丙烯酰胺凝胶电泳分析表明＾３Ｈ－ＺＥＮ结合到两     

玉米赤霉烯酮对母猪的危害及防治

1危害进入2004年春季,阜南富民良种猪场的54头母猪不分大小均表现阴户红肿,如棉花桃状(农村俗称肿丘子),乳房也表现肿胀;发情表现不明显,返情数量增加;流产现象屡屡发生,先后有21头母猪流产,占能繁母猪的38.9%。流产时间多在配种后30天,流产前后无任何症候。死胎和木乃伊现象严     

玉米赤霉烯酮对母猪的危害及其脱毒研究进展

文章就玉米赤霉烯酮对母猪的不利影响、污染现状、毒害机理、临床症状、检测方法以及脱毒的研究进展进行了阐述,为寻找更为有效的解决玉米赤霉烯酮污染的方法提供参考。     

玉米赤霉烯酮与大麻的性别表达

大麻９Ｃｏｎｎａｂｉｓ ｓａｔｉｖａ Ｌ．）发育过程中内源玉米然酮含量发生规律性变化,茎尖内源玉米赤霉烯酮在花原基出现前和花期前出现含量高峰,在达到花期前的真叶内出现ＺＥＮ含量高峰。外源玉米赤霉烯酮处理提高大麻的雄株／雌株比例,而６－ＢＡ处理高大 麻雄株／雄株比,同时ＺＥＮ处理降低性别决定关键时期的ＣＴＫ含量,首先降低２大麻真叶内的ＣＴＫ含量,而后降低茎尖内的ＣＴＫ含量。说明ＺＥＮ可能通过降低２细     

玉米赤霉烯酮对棉花花芽分化的影响

玉米赤霉烯酮浇根处理可促进棉花早现蕾。内源激素检测表明,外施玉米霉烯酮能够增加细胞分裂素含量,降低脱落酸含量。玉米赤霉烯酮能够促进棉花提早现蕾可能与其提高花芽分化期细胞分裂素含量,降低脱落酸含量,改变了棉花发育过程中内源激素平衡有关。     

玉米赤霉烯酮浸种对玉米幼苗抗冷性的影响

玉米赤霉烯酮浸种（２４ｈ）提高了玉米幼苗的抗寒性。在低温处理中，玉米赤霉烯酮浸种使玉米幼苗叶片的相对电导值较低，超氧化物歧化酶活性较高，游离脯氨酸含量升高，可溶蛋白含量较稳定。０．１ｍｇ／Ｌ浸种所产生的抗逆效果均优于０．０１ｍｇ／Ｌ。     

玉米赤霉烯酮对猪的影响及防治

玉米赤霉烯酮作为一种真菌次级代谢产物广泛存在于谷物和饲料中,严重影响人和动物的健康,文章就玉米赤霉烯酮对猪的影响及防治进行综述。     

玉米赤霉烯酮浸种对玉米幼苗抗冷性的影响

玉米赤霉烯酮浸种(24 h)提高了玉米幼苗的抗寒性。在低温处理中,玉米赤霉烯酮浸种使玉米幼苗叶片的相对电导值较低,超氧化物歧化酶活性较高,游离脯氨酸含量升高,可溶蛋白含量较稳定。0.1 mg/L 浸种所产生的抗逆效果均优于0.01 mg/L。     

玉米赤霉烯酮对绵羊肉质及质构的影响

玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEA)是饲料及谷物中常见的霉菌毒素之一,对动物有多种危害,但对肉质影响鲜有报道.本试验选择18只健康及体重相近的3月龄绵羊,随机分成3组,精料中分别添加0、0.50、0.75 mg/kg ZEA,饲喂6个月.取背最长肌测定肉色、pH值、剪切力、熟肉率、滴水损失率,取大腿肌测定肌肉...     

海带热休克蛋白70基因体外原核表达研究

在前期研究克隆得到全长海带HSP70基因的基础上,为进一步研究藻类HSP70的生物学功能,将海带HSP70基因的开放阅读框区域克隆到表达载体pEASY-E2中,并转化到大肠杆菌BL21（DE3）pLysS。将阳性重组子培养于含有AMP（100 U/mL）的LB培养基,IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳鉴定。经5 h诱导,其表达量达到平台期,继续培养HSP70表达量并不显著增高。5 mM IPTG诱导海带HSP70蛋白表达量高于1 mM IPTG诱导蛋白表达量。     

真姬菇热激蛋白70(HmHSP70)的纯化

SDS-PAGE电泳分析显示,经过不同浓度梯度的IPTG诱导,获得了带有重组质粒pET32a-c(+)/HmH-SP70的大肠杆菌产生可溶性重组蛋白的最佳诱导条件。当IPTG的终浓度为0.15mmol/L时,诱导可溶性重组蛋白的量最高,重组蛋白浓度为22.5mg/ml。同时SDS-PAGE显示得到蛋白分子量约为90KDa的融合蛋白。并对诱导过程中产生的包涵体进行了变性和透析复性,使其变为可溶性蛋白;通过镍亲和层析的纯化以及肠激酶的酶切作用,最终得到纯度较高的HmHSP70,纯化后的目的蛋白分子质量约为70KDa,与预期结果吻合。     

马铃薯甲虫热激蛋白基因Ld-hsp70的克隆及温度胁迫下的表达特性

[目的]热激蛋白(heat shock protein,HSP)是一种在生物体内广泛存在且高度保守的蛋白质,在生物抗逆过程中发挥重要作用.当生物体遭受不利环境条件胁迫时,其迅速产生可保证生物体的正常生理活动.本研究以重大检疫害虫马铃薯甲虫(Leptinotarsa decemlineata)为研究对象,对其热激蛋白HS...     

大豆卵磷脂对子宫内发育迟缓仔猪肠道抗氧化和热休克蛋白70表达的影响

【目的】研究大豆卵磷脂（soya lecithine,SL）对子宫内发育迟缓（intrauterine growth retardation,IUGR）猪肠道生长、黏膜氧化应激（oxidative stress,OS）和热休克蛋白70（heat shock protein,HSP70）表达的影响。【方法】试验共选用12头7 d IUGR仔猪和6头正常体重（NBW）仔猪,所有IUGR仔猪随机分成两组（n=6）,分别饲喂基础人工乳（IUGR组）和添加1.5%SL的人工乳（IUGR+SL组）,所有NBW仔猪饲喂基础人工乳（NBW组,n=6）,试验期7 d。【结果】IUGR显著降低14 d仔猪空肠及其非黏膜绝对重量（P＜0.05）,降低空肠黏膜总抗氧化能力（T-AOC）、谷胱甘肽还原酶（GR）和谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）活性（P＜0.05）,升高MDA水平（P＜0.05）,黏膜HSP70的 ELISA和免疫印迹法检测结果均显著升高（P＜0.05）。IUGR猪补充SL后,空肠肠段、黏膜和非黏膜绝对和相对重量均显著升高（P＜0.05）;空肠黏膜T-AOC、GPx和SOD显著升高（P＜0.05）,而MDA显著下降（P＜0.05）;ELISA检测结果显示HSP70蛋白水平显著降低（P＜0.05）,且与SL添加水平呈显著负相关（P＜0.05）。【结论】补充SL对恢复IUGR导致的仔猪肠道组织生长缓慢、HSP70表达升高和OS损伤有很好的效果。     

6种模式生物热休克蛋白70家族的进化分析

[目的]研究柄海鞘和其他5个物种的热休克蛋白70家族的系统发育关系。[方法]通过在Ensembl中下载与筛选,获得柄海鞘和其他5种生物的热休克蛋白70家族的氨基酸序列,对其进行系统发育树和基因结构分析,并阐明其系统发育关系。[结果]经过筛选,共获得了来自线虫、果蝇、柄海鞘、斑马鱼、家鸡和人类6种生物的热休克蛋白70家族的33个氨基酸序列,其中25个具有明确的基因结构。系统发育分析表明,系统发育树并未完全按照来源物种聚类;6种生物热休克蛋白70的氨基酸序列相当保守,但其内含子插入位点并不整齐,表明热休克蛋白70家族是一个多基因、多结构的家族。[结论]这6个物种均发生了基因复制事件,新产生的基因仅仅是冗余的存在,还是具有新的功能,仍需作进一步的研究。     

不同水平玉米赤霉烯酮对断奶仔猪血清代谢产物和肝肾组织病理学影响

目的】玉米赤霉烯酮（zearalenone, ZEA）是由谷物及其产品滋生禾谷镰刀菌产生的一种具有雌激素活性的真菌毒素。试验研究不同水平玉米赤霉烯酮污染日粮对断奶仔猪血清代谢产物、肝肾组织病理学和肝脏超微结构的影响。【方法】将20头健康三元（斯格×长×大）杂交断奶母猪（10.36±1.21）kg按照体重随机分为4个处理,仔猪采用试验笼单独饲养。对照组饲喂基础日粮,试验1、2和3组分别在基础日粮的基础上添加ZEA 1.1、2.0和3.2 mg·kg^-1。预饲期7 d,正式期18 d。试验结束后,对仔猪禁食12 h后进行前腔静脉空腹采血,分离血清,待测血清代谢产物含量。采血后,仔猪电击致死放血屠宰,切取肝脏和肾脏组织块迅速固定于10%的福尔马林溶液,待做组织切片检测。切取0.5 mm³大小的肝脏组织块,迅速用2.5%戊二醛磷酸盐缓冲液固定,待做电镜切片进行超微结构观察。【结果】与对照组相比,3.2 mg·kg^-1 ZEA处理组仔猪血清胆红素显著高于对照仔猪（P＜0.05）,而血清球蛋白和甘油三酯则显著低于对照组（P＜0.05）。随日粮ZEA水平的增加,血清球蛋白和甘油三酯呈一次线性降低（P＜0.05）。与对照组相比,1.1、2.0和3.2 mg·kg^-1 ZEA处理组肝细胞肿胀,颗粒变性。与对照组相比,2.0 和3.2 mg·kg^-1 ZEA处理组肾小管上皮细胞颗粒变性,管腔变窄,有些管腔内充满大量透明底状物或蛋白尿。2.0和3.2 mg·kg^-1 ZEA处理组肝细胞膜上可见自噬体和嗜中性白细胞。【结论】2.0 mg·kg^-1的ZEA足以诱导仔猪的肝肾毒性,此结果对人类健康和指导动物生产具有重要的借鉴意义。     

热应激条件下小鼠睾丸组织HSP70基因表达谱的研究

本试验建立了不同温度、不同时间热应激实验小鼠动物模型,采用Real-time PCR和Western-blot方法检测了小鼠睾丸组织热应激蛋白70(HSP70)在mRNA和蛋白质水平的表达规律。结果表明:25℃时,HSP70在mR-NA和蛋白质表达水平没有变化;在31℃、34℃和37℃时,随应激时间的延长,HSP70mRNA和蛋白质的表达均呈现先升高后下降的趋势;40℃时,HSP70mRNA和蛋白质始终持续高表达。结论:小鼠受热应激后,睾丸组织HSP70mRNA和蛋白质均随着温度和时间的增加呈规律性变化,本研究为探索HSP70对精液品质的影响奠定了基础。     

复方中草药对大鼠热应激蛋白70mRNA的表达影响

采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)对热应激模型组、热应激加中草药配方一组、热应激加中草药配方二组和对照组的SD大鼠的肝组织进行HSP70mRNA表达检测,观察清热复方中草药对两种模型大鼠肝HSP70mRNA表达的影响,并以β-actin为内参照进行基因表达水平的半定量分析。结果显示热应激组中HSP70mRNA的表达高于对照组(P<0.05);热应激加中草药配方一组和热应激加中草药配方二组高于热应激组(P<0.05),但其二者之间差异不显著(P>0.05)。说明清热复方中草药可诱导热应激大鼠肝脏组织中HSP70表达量的增加,从而提高组织细胞的耐受性,避免损伤,对机体起保护作用。     

花楸树热激蛋白SpHSP70-2基因的克隆及表达分析

探究花楸树响应高温胁迫的分子机制,为遗传改良和耐热品种的选育提供基础,依托花楸树叶片转录组测序数据,采用反转录PCR（RT-PCR）方法克隆得到HSP70家族中的1个基因,命名为SpHSP70-2,同时对该基因进行了生物信息学分析,利用荧光定量PCR（qRT-PCR）方法对其组织特异性和应答高温胁迫的表达模式进行了分析。结果表明,经克隆得到的SpHSP70-2基因与花楸树叶片转录组测序数据的基因序列一致,SpHSP70-2开放阅读框（ORF）长度为1 704 bp,编码567个氨基酸。SpHSP70-2蛋白具有HSP70特征结构域:核苷酸结合结构域（NBD）和底物结合结构域（SBD）;SpHSP70-2基因无内含子;SpHSP70-2二级结构中具有ɑ螺旋（32.63%）、延伸链（23.28%）、β转角（7.23%）和随机卷曲链（36.86%）;SpHSP70-2蛋白为疏水性蛋白,有11个跨膜螺旋,无信号肽;SpHSP70-2与同科的苹果、白梨的HSP70同源性最高,为90%以上;SpHSP70-2在花楸树的果实中表达量最大,在茎、根中表达量次之,在花中的表达量最小;在42℃高温胁迫处理下,SpHSP70-2表达量呈现先升高后下降趋势,在2 h时达到极值,随后表达量略缓慢下降,说明SpHSP70-2基因参与调控花楸树对高温胁迫的响应。研究结果为今后花楸树响应热胁迫的分子机制研究和引种驯化方面提供基础。