生物素-亲和素标记技术

生物素-亲和素系统(BAS)是一种具有高亲和力、灵敏度高、特异性强和稳定性好等优点的信号放大标记技术,研究证明生物素与亲和素依靠接触表面均一的多层膜来维系其稳定的结合。随着不断的探索和研究,该技术现已发展出多种标记方法,例如桥-亲和素-生物素标记法、亲和素-生物素-过氧化物酶法、标记生物素-抗生物素法,由于该标记技术具有优秀的性质,因此很快渗透到多个学科,在细胞和抗原的定位和检测中体现出极其重要的作用。目前,BAS已广泛应用于免疫学、分子生物学和组织化学等领域,并取得较好的效果。文章对该技术的特点、方法和应用做了简述。     

生物素检测桑蚕浓核病毒(DNV)简报

生物素—亲和素系统(Biotin—AvidinSystem,BAS)是近几年发展起来的一种新型生物反应放大系统,具有很高的灵敏度、特异性和稳定性,被广泛应用于免疫化学、生物工程等领域。我们采用生物素标记IgG抗体,用亲和素—生物素—辣根氧化酶复合物(ABC)与抗体结合后染色的方法检测桑蚕浓核病毒(DNV),获得了良好的效果。用本法检测家蚕DNV抗原国内外尚未见报道,现将结果简报如下:     

亲和素-生物素系统-酶联免疫吸附试验(ABS-ELISA)在兽医免疫诊断学中的应用

<正> 七十年代中期,亲和素(Avidin)与生物素(B-iotin)之间的强亲和作用及多价反应性,引起了免疫学工作者的极大兴趣,经研究进行亲和素与生物素既可偶联抗体等一系列大分子生物活性物质,又可被酶等多种材料所标记,据此发展成为一种新颖的生物反应放大系统,即亲和素-生物素系统(Avidin-BiotinSystem,ABS)。该系统最初被用于免疫组织化学,进行组织和细胞内特异性抗原的检测、定位及半定量研究。1979年,Guesdon等又将ABS首次引入了固相酶免疫吸附试验。ABS-ELISA是亲和素-生物素系统与ELISA技术相结合所建立的一种新的     

猪肉中氯霉素残留的生物素-亲和素放大免疫检测方法

生物素-亲和素放大免疫检测方法是在常规免疫检测的基础上[1-3],结合生物素-亲和素系统(biotin-avidin system,BAS)的高度放大作用,而建立的一种检测系统.目前,BAS技术在兽药残留检测中已有研究报道[4],而在生物学领域已经得到广泛应用,成为当今生物医学研究工作中最具使用价值和发展前途的技术之一[5-9].     

ABC—酶联免疫吸附法检测家蚕浓核病毒的研究

利用生物素—亲和素生物放大系统的原理,并结合酶联免疫吸附试验(ELISA),建立了新的检测家蚕浓核病毒(DNV)抗原的方法。     

ABC-ELISA检测桑蚕浓核病毒(DNV)简报

生物素——亲和素系统(Biotin-AvidinSystetem.BAS)最近几年发展起来的一种新型生物反应放大系统,具有很高的灵敏度、特异性和稳定性,在免疫化学等领域得到广泛应用。BAS与酶联免疫吸附试验(ELISA)相结合的ABC-ELISA法可提高普通ELISA的敏感性,能同放射免疫     

亲和素—生物素—酶复合物(ABC)法在免疫诊断学中的应用

亲和素—生物素—酶复合物(Avidin—Biotin—Enzyme Complex,ABC)法是Hsu等于1981年在生物素—亲和素架桥法(BRAB)和标记亲和素法(LAB)的基础上进行改良、建立起来的。这种方法是预先按一定比例将生物素化酶和亲和素共温后形成ABC复合物,再使ABC复合物与生物素化抗体反应。该法不仅减少了反应步骤。而且由于ABC的网格可以网罗相当数量的酶分子,从而使生物素—亲和素系统(BAS)的敏感度大为提高。用该法对多肽类激素进行了酶标测定,发现抗体滴度可提高20～40倍,并通     

亲和素—生物素酶联免疫吸附试验在寄生虫病免疫诊断上的应用

亲和素—生物素系统酶联免疫吸附试验是八十年代初建立起来的一种新型生物反应放大系统,是将具有高亲和力、高稳定性的亲和素—生物素系统(Avidin-Biotin System,ABS)引入ELIsA反应的免疫诊断技术.ABC—BLISA即亲和素—生物素—过氧化物酶复合物(Avidin-Biotin-Peroxidase Complex)则是预先按一定比例将生物素化酶与亲和素共温形成ABC复合物,再使ABC复合物与生物素化抗体的反应.近年来,ABC—ELISA以其明显的优越性而日益受到了国内外学者的关注,在寄生虫病的免疫诊断方面得到广泛应用,并取得了可喜进展.本文就ABC—ELISA在寄生虫病的免疫诊断方面的应用概述如下.     

酶联免疫吸附法在口蹄疫诊断中的研究进展

口蹄疫属于我国一类动物疫病,防治该病的关键是做出及时、准确的诊断。本文介绍了ELISA方法在口蹄疫诊断中的应用研究进展,传统ELISA方法包括液相阻断ELISA、间接ELISA、固相竞争ELISA、间接夹心ELISA;新型ELISA方法包括单克隆抗体ELISA、PCR-ELISA、生物素-亲和素ELISA及Dot-ELISA。随着技术的进步及养殖领域的规模化,ELISA在临床诊断和流行病学调查中将会有更加广泛的应用。     

应用生物素-亲和素系统检测感染兔弓形虫抗体的实验研究

鉴于弓形虫病感染的多样化,病原诊断又较困难,血清学检测逐渐成为常规辅助诊断方法之一.七十年代末国内外相继建立了检测血清中抗弓形虫抗体的酶联免疫吸附试验(ELISA).近年来,生物素-亲和素系统(BAS)已用于多种抗原抗体系统但未见检测弓形虫抗体的报道.本文应用亲和素和生物素标记的过氧化物酶复合物(ABC)为标记物的ABC-ELISA方法检测感染兔弓形虫抗体的实验研究并与常规ELISA法进行对比观察,现将初步试验结果报告如后.     

免疫层析技术研究及应用

免疫层析技术(ICA)是一种将色谱原理和抗原抗体反应相结合的快速检测技术,在兽药残留检测、环境监测、疾病诊断等多个方面都有应用。为提高传统胶体金方法的灵敏度,荧光材料、磁性纳米颗粒等新型的标记材料逐渐应用到ICA中,生物素-亲和素系统、贵金属也有信号放大的作用,有助于降低检测限。定量分析仪器的应用促使ICA的结果判定方式发生改进,可以进一步满足定量检测的需要。标记材料的变化和分析仪器的应用推动ICA方法向高灵敏度和定量检测的方向发展。论文就ICA标记材料的变化和发展趋势以及该技术在兽药残留检测、食品安全、动物疾病诊断方面的应用进行概述。     

生物素-亲和素系统及其在免疫学中的应用

生物素-亲和素系统(Biotin-avidin system,BAS)在免疫学中的研究和应用引起了免疫学工作者浓厚的兴趣。早些时候,人们发现亲和素对生物素有惊人的亲和力,并能偶联抗体等一系列大分子生物活性物质,又可被酶、荧光素等材料所标记,成为一种通用性强、灵敏度高、特异性好、高度稳定、方便、经济的免疫检测手段和分离纯     

免疫组化技术在实验动物病毒检测中的应用

免疫组化技术在实验动物病毒检测中的应用遇秀玲（北京丰台军事医学科学院实验动物中心，１００７１）免疫组化技术是将抗原抗体反应的专一性和显微形态学相结合，以研究组织或细胞中抗原定位的一种方法，其中包括亲和素生物素化酶复合物法（ＡＢＣ法）、生物素一亲和素系...     

猪瘟RT-PCR ELISA诊断方法的建立

将RT—PCR方法和高灵敏度的地高辛检测系统相结合，先建立猪瘟病毒（classicalswinefevervirus，CSFV）的RT—PCR方法，用地高辛标记RT—PCR产物；再建立CSFV的PCR—ELISA方法，用生物素标记的探针在链亲和素包被的微量板孔中杂交捕获地高辛标记的PCR产物，最后进行免疫显色得出结果。试验主要对RT—PCRELISA的各种反应条件进行了优化，确定了1mg／L的链亲和素、50μg／L生物素标记的探针、1：3000抗地高辛的过氧化物酶、37C杂交2h等为最适反应条件。该方法的敏感性比常规琼脂糖凝胶电泳检测高100倍以上，克服了组织样品中CSFV含量少而难以检测的困难，为猪瘟的早期诊断和分子流行病学调查提供了一条新途径。     

亲和素——生物素系统在免疫学上的应用

从七十年代末起,亲和素—生物素系统(Avidin—Biotin system)开始出现在免疫学领域中。由于亲和素—生物素间亲和力大,特异性强,敏感性高,可分别结合各种类型大小分子,因此,它在免疫学中的应用很有发展前途。     

应用生物素——亲和素系统检测弓形虫感染家兔的特异性循环免疫复合物实验研究

循环免疫复合物(CIC)的检测对某些疾病的诊断和临床监护提供了新的可能。CIC的检测方法虽很多,但大多属于抗原非特异性方法,对CIC的抗原可以识别鉴定的方法尚少。我们应用生物素—亲和素系统的ABC法以抗弓形虫单克隆抗体(McAb)检测人工感染弓形虫家兔血清的CIC(ABC-ELISA),同时与McAb ELISA(常规)及非特异性PEG沉淀试验为对照进行比较试验,探讨ABC-ELISA检测弓形虫特异性     

口蹄疫病毒核酸试纸条检测方法的建立

本研究通过核酸探针与免疫层析相结合的方法,建立了一种简单、敏感、特异的检测口蹄疫病毒的方法。试验利用RT-PCR方法获得口蹄疫病毒3D核苷酸片段,在引物中设计了灵敏度高、特异性好的核酸探针--生物素和地高辛,使扩增产物结合探针。利用胶体金的放大原理将链霉亲和素与金颗粒形成胶体金混合物,从而与RT-PCR产物中的生物素探针结合。硝酸纤维素膜上端标记生物素化山羊抗兔IgG作为指控条带,下端标记抗地高辛抗体以捕获RT-PCR产物中的地高辛探针。组装金标试纸条,检测RT-PCR产物,结果表明该核酸试纸条可以检测到 0.3×10^-3~3×10^-3 μg/μL,敏感性高于琼脂糖凝胶电泳,两种方法的符合率高,核酸试纸条检测方法是一种敏感性高、成本低且费时短的新型检测方法。该方法为口蹄疫病毒检测提供了一种新的思路。     

生物素在动物生产中的应用研究进展

生物素作为一种新型饲料添加剂,越来越被人们关注。近几十年来对生物素的研究发现,其作为羧化、脱羧和脱氢反应酶系的辅助因子,在碳水化合物、脂类、蛋白质和核酸的代谢过程中必不可少。该文就生物素的理化特性、生物素的最新应用进展、检测方法、动物对生物素的营养需求等作了简要阐述,为广大畜牧生产工作者提供参考。     

免疫PCR检测微量H5亚型禽流感病毒

为了有效检测低浓度禽流感病毒,笔者通过将高特异性的抗原-抗体反应与高灵敏性的PCR扩增技术相结合,建立了一种快速检测痕量H5亚型禽流感病毒的间接免疫PCR方法和间接“三明治”抗体夹心免疫PCR方法.以TopYield 96孔板为固相免疫吸附载体,以禽流感病毒H5蛋白为检测对象,通过一系列免疫反应及亲和素-生物素桥联作用,将生物素标记的报告DNA分子和生物素标记的禽流感病毒H5亚型抗体分子连接.充分洗涤后,在TopYield板孔中添加PCR反应液,对板壁偶联的报告DNA进行PCR扩增,间接达到检测微量禽流感病毒H5蛋白的目标.通过优化报告DNA分子和链亲和素的浓度,2种免疫PCR技术都可检测到约1 fg的禽流感病毒H5蛋白,与常规ELISA方法相比,灵敏性提高了近1 000倍.     

用生物素-亲和素强化免疫斑点试验检测口蹄疫病毒的研究

传统酶联免疫吸附试验一般用辣根过氧化物酶(HRP)标记IgG进行检测。HRP的稳定性虽好,但敏感性稍差。为了克服这一不足,引入碱性磷酸酶(AP)检测系统,进行免疫强化斑点试验检测口蹄疫病毒的研究。用光敏生物素标记纯化的A蛋白(SPA)代替第二抗体,通过AP标记的亲和素(Avidin-AP)检测生物素化抗体,最后加入底物BCIP和NBT显色判定。该法操作简单、检测时间短,并具有良好的特异性和重复性。由于引入生物素系统和AP,检测的灵敏度比曾通ELISA高。