催乳素对促性腺激素诱导的鸡卵泡膜细胞类固醇激素合成的抑制作用

利用无血清培养的鸡卵泡（Ｆ３）膜细胞模型研究了催乳素（ＰＲＬ）对卵泡膜细胞类固醇激素合成的作用。用不同剂量的ＰＲＬ、黄体生成素（ＬＨ）及促卵泡激素（ＦＳＨ）分别或共同处理在无血清培养液中培养了４８ｈ的鸡卵泡膜细胞，２４ｈ后收集培养液，测定培养液中睾酮（Ｔ）和雌二醇（Ｅ２）含量。结果表明，ＬＨ能明显刺激膜细胞合成Ｔ和Ｅ２，并具有剂量依赖关系；ＰＲＬ单独对膜细胞类固醇合成无明显作用，但可抑制ＬＨ诱导的Ｔ和Ｅ２合成，以及ＦＳＨ刺激的Ｅ２合成。本研究证明ＰＲＬ能作用于鸡卵泡膜细胞，并能抑制促性腺激素ＬＨ和ＦＳＨ诱导的类固醇激素的合成     

禽类卵泡抑制素研究现状

抑制素（Ｉｎｈｉｂｉｎ，以下简称ＩＢ）是一种由性腺分泌的糖蛋白激素，它主要调控垂体ＦＳＨ（促卵泡素）的分泌。自１９３２年Ｍａｃｕｌａｇｈ提出这个概念以来，动物抑制素的研究日益受到人们的重视。目前对哺乳动物抑制素合成部位、分子结构及生理作用已经有了深入...     

促卵泡激素和胰岛素对牛卵泡颗粒细胞长期培养的影响

以McCoy’s5a为基础培养液添加硒、转铁蛋白、雄烯二酮、谷氨酰胺，对牛卵巢上大（直径〉8mm）、中（4mm〈直径〈8mm）、小（直径〈4mm）非闭锁卵泡的颗粒细胞进行无血清培养，研究添加不同浓度的促卵泡激素（FSH）和胰岛素对颗粒细胞增生、分化和激素分泌的影响。结果，FSH能诱导颗粒细胞增生及提高其雌二醇合成能力，颗粒细胞雌二醇的合成能力与生理浓度的FSH存在剂量依赖关系。胰岛素对大、中、小卵泡颗粒细胞增生和雌激素分泌有促进作用。     

催乳素对促性腺激素诱导的鸡卵泡膜细胞类固醇激素合成的抑制…

利用无血清培养的鸡泡（Ｆ３）膜细胞模型研究了催乳素（ＰＲＬ）对泡膜在醇激素合成的作用。用不同剂量的ＲＰＬ、黄体生成素（ＬＨ）及促泡激素（ＦＳＨ）分别或共同处理在无血清培养液中培养了４８ｈ的鸡卵泡膜细胞，２４ｈ后收集培养液，测定培养液中睾酮（Ｔ）和雌醇（Ｅ３）含量。结果表明，ＬＨ能明显刺激膜细胞合成了Ｔ和Ｅ２，并具有剂量依赖关系；ＲＰＬ单独对膜细胞类固醇合成无明显作用，但可抑制ＬＨ诱导的Ｔ和Ｅ合成，     

同源GnRH对无血清培养鸡卵泡颗粒细胞孕酮分泌的作用

选用产蛋规律的鸡，在一个产蛋序列中，排卵前１～３ｈ剖腹收集各级卵泡，分离颗粒层建立卵泡颗粒细胞无血清单层贴壁培养模型。在此基础上，用不同剂量鸡促性腺激素释放激素（ＧｎＲＨ－Ⅱ）单独处理或与羊ＬＨ（ｏＬＨ）协同处理，并使用ＧｎＲＨ－Ａｎｔａｇｏｎｉｓｔ（ＧＡ），以观察ＧｎＲＨ－Ⅱ对颗粒细胞孕酮分泌的影响。研究获得了以下结果：（１）ＧｎＲＨ－Ⅱ对鸡不同卵抱（Ｆ１、Ｆ３、Ｆ５）颗粒细胞孕酮分泌均有促进作用，并呈现剂量－反应关系；（２）ＧｎＲＨ－对ｏＬＨ促鸡卵泡颗粒细胞孕酮的分泌有明显的协同作用；（３）ＧｎＲＨ拮抗物使ＧｎＲＨ－Ⅱ的促卵泡颗粒细胞孕酮分泌作用受到阻断。     

LRH─A3、hCG和PMSG对体外培养条件下牦牛垂体组织LH和FSH分泌的调节

促卵泡素３号（ＬＲＨ－Ａ３）、人绒毛膜促性腺激素（ｈＣＧ）和孕马血清促性腺激素（ＰＭＳＧ）等３种外源性激素均可增加体外培养条件下牦牛垂体组织分泌ＬＨ和ＦＳＨ的能力。培养液中ＬＨ和ＦＳＨ含量与加入的ＬＲＨ－Ａ３量呈正相关，与加入的ＰＭＳＧ和ｈＣＧ的量无显著关系     

LRH—A3,hCG和PMSG对体外培养条件下牦牛垂体组织LH和FSH分泌的调节

促卵泡素３号（ＬＲＨ－Ａ３）、人绒毛膜促性腺激素（ｈＣＧ）和孕马血清促性腺激素（ＰＭＳＧ）等３种外源性激素均可增加体外培养条件下牦牛垂体组织分泌ＬＨ和ＦＳＨ的能力。培养液中ＬＨ和ＦＳＨ含量与加入的ＬＲＨ－Ａ３量呈正相关，与加入的ＰＭＳＧ和ｈＣ的量无显著关系。     

太湖猪高繁殖力内分泌学机制的研究进展

综述了太湖猪高繁殖力内分泌学机制的研究进展,结果表明太湖猪促黄体素（ＬＨ）促卵泡素（ＦＳＨ）的高含量以及ＦＳＨ分泌对抑制素的抑制效应较不敏感,尤其是ＦＳＨ的高含量,很可能是太湖猪高排卵率的重要因素之一。     

GnRH促鸡卵泡颗粒细胞孕酮合成功能作用机制的研究

本实验选用掌握产蛋规律的莱航鸡，在排卵前１６－１８ｈ剖腹取卵泡，分离和纯化颗粒细胞。采用无血清贴壁培养法，初步探讨了鸡促性腺激素释放激素促颗粒细胞孕酮合成的作用机制。获得以下结果：（１）ＰＫＣ阻断剂Ｈ７（２５－５０μｍｏｌ／Ｌ）能阻断ＧｎＲＨ－Ⅱ促颗粒细胞Ｐ４合成作用；（２）磷酸二酯酶抑制剂ＭＩＸ（１０＾－５－１０＾－３ｍｏｌ／Ｌ）能促进Ｐ４分泌，但对ＧｎＲＨ－Ⅱ促Ｐ４合成效应无明显影响；（３）钙     

太湖猪高繁殖力内分泌学机制的研究进展

综述了太湖猪高繁殖力内分泌学机制的研究进展。结果表明太湖猪促黄体素（ＬＨ）、促卵泡素（ＦＳＨ）的高含量以及ＦＳＨ分泌对抑制素的抑制效应较不敏感,尤其是ＦＳＨ的高含量,很可能是太湖猪高排卵率的重要因素之一。     

猪卵泡抑制素主动免疫对山羊生殖的影响

抑制素是由动物的性腺分泌的一种糖蛋白,主要生理作用是反馈性抑制ＦＳＨ的合成和分泌。用抑制素对动物进行主动免疫,产生抑制素抗体中和内源性抑制素,从而削弱或解除它对ＦＳＨ分泌的抑制作用,引起动物排卵数增加,可能达到多产的目的。这种方法不仅与在生产和实验中广泛应用的促性腺激素处理一样可以提高动物的排卵率,而且可以弥补促性腺激素处理个体反应不一的缺陷,同时还能提高处理后几个胎次的产仔数,这在畜牧生产中有重要的应用价值。为此,本实验制备猪卵泡抑制素,并用它免疫山羊,探讨它用于提高家畜繁殖力的方法和可能性。1　材料…     

催乳素调节鸡卵泡膜细胞功能的机理

在明确催乳素（ＰＲＬ）对鸡卵泡膜细胞功能调节作用的基础上,探讨了酪氨酸激酶活性,ｃＡＭＰ系统和钙离子在ＰＲＬ调节膜细胞功能中的作用。结果表明,酪氨酸激酶抑制剂Ｇｅｎｉｅｓｔｉｎ能部分阻断ＰＲＬ对ＦＳＨ促膜细胞雌二醇（Ｅ２）合成的抑制作用,磷酸二酯酶抑制剂ＭＩＸ亦能部分消除ＰＲＬ对ＦＳＨ促Ｅ２合成的抑制作用,而细胞外钙离子浓度和电压依赖式钙通道在ＰＲＬ调节的膜细胞功能中无明显作用。     

山羊卵巢无腔卵泡卵母细胞的体外生长

山羊卵巢无腔卵泡卵母细胞在以ＤＭＥＭ为基础,添加ＨＥＰＥＳ（２０ｍｍｏｌ／Ｌ）、ＦＣＳ（１０％）、ＦＳＨ（４０ｍｇ／Ｌ）、次黄嘌呤（２ｍｍｏｌ／Ｌ）、异双丁酰环腺苷酸（２ｍｍｏｌ／Ｌ）、ＩＧＦ－Ｉ（５０μｇ／Ｌ）、氢化可的松（４０μｇ／Ｌ）和ＩＴＳ（５０μｇ／Ｌ）的培养液中得以存活并生长。在二维培养体系中,卵泡在体外的生长模式和体内有很大差别。最显著的特征是卵泡不像在体内那样保持完整的立体结构一直到结束。绝大部分卵泡不同程度地发生基膜溶解和破裂,颗粒细胞向四周扩展并贴壁,形成单层。由于卵泡原有三维立体结构的破坏,易于导致卵母细胞的迁移。在生长方式上以数个卵泡聚集生长对其卵母细胞的生长似乎较为有利。卵泡卵母细胞在体外培养９ｄ,其直径可达１５０μｍ以上,达到了成熟时体积,存活率为５３％。实验证明,山羊无腔卵泡卵母细胞在合适的培养体系中,能在体外存活并生长,并能发育到成熟时的大小。     

抑制素免疫对羊生殖的影响

抑制素是一种主要由动物性腺（睾丸的支持细胞和卵巢的颗粒细胞）分泌的一种异二聚体糖蛋白激素,由两个二硫键连接两个不同的亚单位（α和β）构成。抑制素对垂体ＦＳＨ的分泌和／或合成具有选择性地抑制作用。抑制素免疫中和技术能特异性地刺激ＦＳＨ分泌,进而促进配子生成,提高动物繁殖力。西方把抑制素免疫对羊排卵率、产羔数、初情期、超数排卵和公羊繁殖性能的影响作一综述。     

促卵泡素对鸡等级前卵泡细胞发育的影响

实验研究了鸡等级前卵泡颗粒细胞和膜细胞的发育及促卵泡素(FSH)对其增殖的调控作用。形态学观察显示小白卵泡只有1层颗粒细胞,大白卵泡出现2层颗粒细胞,而小黄卵泡和大黄卵泡中则有多层颗粒细胞。结果表明:卵泡颗粒细胞和膜细胞的密度和细胞层厚度随着卵泡发育的等级而增加。卵泡体外悬浮培养表明,FSH显著刺激小黄卵泡和大黄卵泡中颗粒细胞的增殖,但对膜细胞无显著促增殖作用。由此推测,FSH通过刺激颗粒细胞的增殖促使等级前卵泡进入等级发育。     

FSH和胰岛素对牛卵泡颗粒细胞长期培养的影响

McCoy’s5a为基础培养液添加硒、转铁蛋白、雄烯二酮、谷氨酰胺 ,对牛卵巢上大 (直径 >8mm)、中 (4mm <直径 <8mm)、小 (直径 <4mm)非闭锁卵泡的颗粒细胞进行无血清培养 ,研究添加不同浓度的促卵泡激素和胰岛素对颗粒细胞增生、分化和激素分泌的影响。结果 :FSH可以诱导颗粒细胞增生及雌二醇合成能力 ,颗粒细胞的雌二醇合成能力与生理浓度的FSH呈剂量依赖方式。胰岛素对大、中、小卵泡颗粒细胞增生和雌二醇分泌有促进作用。     

鸭异体卵巢移植后生殖激素水平变化及卵泡颗粒细胞凋亡的研究

选取健康麻鸭进行同种异体卵巢移植，移植后测定45日龄、75日龄、105日龄、开产日龄、开产后30日龄和开产后60日龄时血浆促卵泡素（FSH）、促黄体素（LH）、雌二醇㈤水平；并且在产蛋期内不同的时间获取各个级别卵泡的颗粒细胞，检测其凋亡率。结果显示，移植后FSH、LH、E2的分泌均高于对照组，在开产30日龄时差异显著，表明移植成功并且卵巢发育良好，卵巢功能正常；移植后各级卵巢颗粒细胞凋亡率显著低于对照组，并且随着卵泡直径的增加，颗粒细胞的凋亡率呈现下降的趋势，表明卵巢移植可以降低卵泡颗粒细胞凋亡率。结论：同种异体卵巢移植卵巢发育良好，具用正常的分泌功能，可以降低卵泡颗粒细胞的凋亡率。     

母鸡抑制素的产生

母鸡抑制素主要是由排卵前卵泡颗粒细胞产生的,肾上腺是又一来源,ＬＨ在刺激体外颗料细胞产生抑制素方面的比ＦＳＨ有效。去除排卵前卵泡后,血浆免疫活性抑制素显著降低,而血浆ＦＳＨ急剧升高。卵泡颗粒层中,抑制素α亚基比β（Ａ）亚基表达充分。α亚基是由近似１．７ｋｂ的ｍＲＮＡ编码,主要的８．４ｋｂβ（Ａ）－ｍＲＮＡ带在排卵前卵泡的颗粒层中表达。     

山羊卵泡卵母细胞体外受精及受精卵的体外发育

对山羊卵泡卵母细胞的体外成熟、体外受精及受精卵体外培养的系列研究表明,在成熟培养液中添加１５μｇ／Ｌ重组牛生长激素（ｒｂＧＨ）,与ＦＳＨ和ＬＨ配合使用,卵泡卵母细胞的成熟率（６７．９％）显著高于不含ｒｂＧＨ的培养组（５３．１％,Ｐ＜０．０５）;３８．５℃和３９．０℃的培养温度对卵泡卵母细胞体外成熟培养的影响无显著差异（Ｐ＞０．０５）;ＢＯ液上浮法对山羊冷冻精子的活精子分离效果优于Ｐｅｒｃｏｌ分层液法,并得到较高的受精率（６４．３％∶４９．０％,Ｐ＜０．０５）;颗粒细胞单层和输卵管上皮细胞单层的共同培养体系均有益于受精卵的体外发育。     

BMP15对藏鸡等级卵泡颗粒细胞孕酮分泌的影响

为探究骨形态发生蛋白15(Bone Morphogenic Protein 15,BMP15)对体外培养的藏鸡等级卵泡颗粒细胞孕酮分泌的影响，研究体外分离、培养并鉴定藏鸡等级卵泡F1颗粒细胞后，用0、25、50、100 ng/mL四种不同浓度的BMP15蛋白单独处理或者联合25 ng/mL促卵泡素（FSH）处理细胞，72 h后采用ELISA法检测不同处理组细胞培养液中的孕酮含量。同时，采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测不同处理组细胞中孕酮合成关键基因StAR、CYP11A1和HSD3B1 mRNA相对表达量。结果显示：免疫组化法鉴定体外分离培养的藏鸡F1卵泡颗粒细胞卵泡刺激素受体（FSHR）抗体阳性率95%以上；BMP15单独处理细胞后，随着BMP15浓度的升高，孕酮分泌量呈下降的趋势，且100 ng/mL处理组的孕酮分泌量极显著低于其他组（P<0.01）;BMP15联合FSH处理细胞后，随着BMP15浓度的升高，孕酮分泌量呈现上升的趋势，其中100 ng/mL处理组的孕酮分泌量极显著高于其他组（P<0.01）；不同处理组细胞中孕酮合成关键基因StAR、CYP1...