杨树基因组DNA提纯方法的优化及其RAPD鉴定

(安徽农业大学林学与园林学院,合肥 230036)     

日本晚樱组培快繁技术研究

进行了日本晚樱的组培快繁试验。试验结果表明，日本晚樱最佳的增殖培养基是MS/ML + 6-BA 0.5 mg/L + NAA0.05 mg/L +白糖40g/L +琼脂4.5g/L,增殖系数为2.47~2.56；最佳生根培养基为ML+IBA0.05mg/L +NAA0.05 mg/L +白糖20g/L +琼脂4.5g/L，生根率为100%；炼苗12~17d后移栽至草炭土中，成活率达90%。     

紫叶酢浆草组培快繁技术研究

研究了紫叶酢浆草地下鳞茎初代培养、继代培养和生根培养3个技术环节的激素配比以及生根苗移栽试验。结果表明：以MS为基本培养基，初代培养激素配比以6-BA0.5mg/L+NAA0.5 mg/L+2,4-D0.1 mg/L为宜，诱导率达83%，增殖系数为2.6；在继代培养中，以6-BA0.5 mg/L+NAA0.1 m/L为宜，增殖系数达3以上；以1/2MS为基本培养基，生根激素以NAA0.1 mg/L为宜，可使生根率达92%；生根苗移栽基质为蛭石与细沙按1:1时移栽成活率达90%。     

中国柽柳组培快繁技术研究

为更好地对中国柽柳种质进行保存,以中国柽柳茎段为外植体进行组培快繁研究。结果表明：采取75%酒精浸泡30 s、2%次氯酸钠浸泡3~5 min和升汞浸泡5 min为最适宜的灭菌方案。MS+蔗糖20 g/L+琼脂6.5 g/L为中国柽柳最适初代培养基,MS+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L为其最适增殖培养基,1/2MS培养基为最适生根培养基。     

非洲紫罗兰的组培快繁技术研究

通过正交试验和单因素试验对非洲紫罗兰的叶片组培快繁技术进行了探讨。结果表明：初代培养基为MS+6-BA1.0mg/L(单位下同)+IBA0.5;诱导丛生芽的适宜培养基为MS+6-BA1.0 +KT0.1 +IBA0.1;有效苗诱导培养基为MS+6-BA0.5+IBA0.5+活性炭0.3%。试管苗生根采用瓶外扦插生根效果较好。     

菊花组培快繁

菊花的繁殖方法很多,但对一些难生根、无法大量繁殖的名贵品种和母株来源不足的品种,传统方法就不能满足生产和市场的需要了。而采用组培技术,不仅繁殖系数高、速度快,还可生产无病毒种苗,保持品种特性,是现代繁殖的好方法。     

驱蚊草组培快繁技术研究初报

以驱蚊草茎段为试材，正交设计法考察3种激素对其增殖率的影响，结果表明，MS+6-BA1.0 mg/L +IBA0.1 mg/L +GA3 1.1 mg/L为增殖培养的适宜培养基。1/2MS+ IBA0.1mg/L为生根培养的适宜培养基。     

紫芦笋新品种潍紫P-7选育及高产栽培技术

选育出了适合国内栽培的第一个优良紫芦笋新品种——潍紫P-7.该品种年生长期240天左右,平均茎高190厘米,笋条直,深紫色,包头紧.潍紫P-7表现突出,产量比对照种太平洋紫芦笋增产18.9%、一级笋率提高5个百分点,抗病性提高了39.1%,散头率降低1.5个百分点。研究了紫芦笋组培再生技术体系,利用组培苗建立了紫芦笋新品种制种田5亩,并总结完善了紫芦笋高产栽培技术。     

芦笋离体快速繁殖中嫩茎增殖培养对根分化的影响

本试验对芦笋组织培养中影响生根的培养基激素配比、嫩茎增殖培养中激素配比及嫩茎增殖次数等因素进行了研究。结果表明,嫩茎增殖培养基激素配比和嫩茎增殖次数等因素对后续的茎段生根有重要影响。芦笋组培再生完整植株优化培养过程为:芦笋外植体(茎段)在J2(MS NAA 0.2 mg/L BA 0.5 mg/L)培养中诱导出嫩茎后,再在嫩茎增殖培养基J3(MS NAA 0.2 mg/L BA 0.1 mg/L)或J9(MS NAA 0.05 mg/L BA 0.1 mg/L)增殖1次(嫩茎增殖次数对后续生根影响极大),然后取增殖1次后的茎段接种到生根培养基G4(MS IBA 0.5 mg/L BA 0.05 mg/L 2.0 mg/L PP333)中进行生根培养,最高生根率可达90%以上。芦笋组培苗移栽成活率主要受诱导出的根质量的影响。通过几个因素的优化,最终可使芦笋根诱导率达90%~100%,移植成活率达100%。     

白芦笋花药愈伤组织诱导及绿芽分化

为建立芦笋单倍体育种技术体系以解决国内芦笋新品种资源贫乏问题,笔者以白芦笋花药为外植体进行了愈伤组织的诱导及绿芽分化研究。试验结果表明,芦笋花药经过4d的冷藏(4℃)处理后,接种于含有NAA2.0 mg/L、6-BA1.0mg/L及6%蔗糖的1/2MS培养基上,可产生愈伤组织;每年的4月份接种花药的愈伤组织诱导率最高,8月份次之,11月份最低。品种间、同一品种不同单株间花药的愈伤组织诱导率不同,以‘UC155’品种(18.9%)最高,显著高于其他三个品种‘UC142’(11.6%)、‘Gijnlim’(10.3%)、‘Thielim’(5.8%),所有试验株系中以‘UC155’-8的愈伤组织诱导率最高,达83.5%;每日补充光照强度为1000 lx的光照,比全暗培养更有利于芦笋花药愈伤组织的形成;花药接种前进行离心处理(4000 r/min)30 min,不能提高愈伤组织诱导率;愈伤组织转瓶培养于NAA 0.5 mg/L、6-BA 1.0 mg/L及3%蔗糖的MS培养基上,能分化出无根绿芽;不同品种间绿芽分化率有差别,以‘Gijnlim’品种最高(67.2%),‘UC142’品种最低(14.1%);未分化绿芽的愈伤组织再转入于不含植物生长调节剂的MS培养基上培养,部分愈伤组织能分化出绿芽     

灯盏花组织培养研究

比较了灯盏花组织培养中不同外植体消毒方法和不同激素及其浓度对愈伤组织诱导与分化、继代增殖、生根的影响，并探索了试管苗假植炼苗方法。结果表明：MS＋0．5—1．0mg／L2，4-D培养基的灯盏花幼叶愈伤组织诱导效果最好；在BA浓度为0—2．0mg／L范围内，浓度越高继代增殖倍数越大，而单株生长则是在MS＋BA0．5mg／L＋NAA1—2mg／L培养基上最佳；不同培养基上的组培苗均具有较高的生根率，而生根质量则以MS＋IBA1．0mg／L＋NAA2．0mg／L最好；对生根试管苗进行漂洗、消毒后假植铺有河沙的苗床上，其上建盖有塑料薄膜和遮荫网的小拱棚，并经精心管理，其假植成活率高达95％以上。     

南方芦笋组培苗移栽技术研究

以芦笋新品种“津宁”的生根组培苗为试验材料,通过移栽基质、基质消毒措施、生根培养类型及移栽时期对芦笋组培苗移栽成活率影响的研究。结果表明：在南方,冬、春两季采用二步生根法培养的生根组培苗,选用椰糠作为移栽基质、200g/m3根病治杀菌剂进行消毒处理,移栽成活率可达95.20%~99.25%。     

绿豇豆高产栽培技术研究

绿豇豆生长习性和高产技术试验结果表明,在整枝方式上宜采用抹芽、摘心;采用2.5%敌杀死乳油2500倍液防治豇豆荚螟,不但安全,而且防效较高。     

文心兰茎尖组织培养的研究

文心兰茎尖离体培养研究表明:文心兰茎尖在MS 6-BA 3 mg/L Ad 2.5～3.5 mg/L NAA 0.2 mg/L培养基上培养45 d后,茎尖分化出芽的同时也形成较多的原球茎;原球茎在MS 6-BA 2.0 mg/L Ad 0.5 mg/L NAA 0.1 mg/L培养基上增殖速度最快,生物量增殖系数可达8.871 3;来自不同增殖培养基上增殖的原球茎在相同的分化培养基上培养时,接种后15 d观察,不同来源的原球茎分化率不同, 30 d后的分化率仍存在一定的差异;分化的文心兰幼苗在1/2MS NAA 0.2 mg/L生根效果最好.     

石刁柏幼胚胚状体发生与细胞学研究

以3个来自国外的石刁柏品种（C.IL,PURPLE和APOLLO）为试材,研究不同基因型以及培养基中添加2,4-D、KT、6-BA和NAA等生长物质对石刁柏幼胚胚状体发生的影响。结果表明,幼胚在MS＋2,4-D 1.0 mg/L＋KT 0.5mg/L＋6-BA 2.0 mg/L培养基中可直接诱导产生体细胞胚。降低2,4-D的浓度,将诱导产生的体细胞胚组织块继代培养2-3次可诱导产生出米黄色颗粒状的胚性愈伤组织,继而有胚状体的发生。胚性细胞继续分裂形成多细胞原胚,经球形胚、梨形胚、长形胚、子叶分化期到成熟胚,其发生的胚状体与单子叶合子胚形成具有相似的过程。     

植物激素对石刁柏花药培养中染色体倍性变异的影响

在石刁柏花药培养过程中,2,4-D在引起愈伤组织细胞染色体倍性变异方面起主导作用,高浓度的2,4-D虽然能提高愈伤组织中单倍体细胞的频率,但同时又加剧其多倍化。不同激素配比的分化培养基在诱使再生植株染色体倍性变异方面存在着明显差异。在附加1.0ppmBA和0.2ppmIBA的培养基上,再生植株茎尖单倍体细胞频率最高,达31.17％。比较愈伤组织和再生植株的染色体倍性变异幅度,发现后者明显地大于前者。     

石刁柏花药离体培养及单倍体植株再生的研究

1988至1990年进行了石刁柏花药离体培养,将采集不同时期花蕾接种,低温处理,激素配比,花药培养过程中形态学及花粉粒发育途径,愈伤组织诱导及其类型,花药愈伤组织再分化和染色体倍性,单倍体植株的再生及染色体加倍后入土移栽等方面,均做了较深入的研究,并获得了超雄株即纯合二倍体。     

葡萄组培苗瓶外生根技术研究

采用不同种类和浓度的生长素诱导葡萄组培苗瓶外生根，并观察组培苗在不同处理基质、不同的温度、不同的生理年龄条件下生根的效果。通过优化技术参数，建立了葡萄组培苗瓶接生根的技术优化体系，结果表明，用浓度为0.3mg/L的IBA浸蘸处理的插条，在温度为27~29℃的环境条件下在基质珍珠岩上培养，瓶苗茎段的生根率可达85.5 %，移栽后苗木的成活率达98 %，相对于其他方法有了较大的提高。该技术的建立有助于实现葡萄工厂化育苗技术的商业化扩大。