药物诱发豚鼠胆囊炎的病理学及酶组化研究

以酶病理组织化学方法研究了林可霉素、石胆酸、硫氨酸α－萘酶和月桂红霉素酯四种药物豚鼠胆囊炎和胆结石形成过程中，酶、粘多糖及胆汁成份的变化。结果表明：四种药物都能诱发豚鼠胆囊炎，内源性β－ＧＣＤ酶含量显著升同且与胆囊为症程度明显相关；胆汁β－ＧＣＤ酶到ＵＣＢ／ＴＢ幽会显著正相关；β－ＧＣＤ酶和Ｃａ＾２＋的关系与成石时间有关而各组有所差异。胆囊和肝脏ＡＣＰ和Ｇ－６－Ｐ活性也有明显变化。本文进一步证实内     

睾丸摘除对水牛血像和血液免疫功能指标的影响

选择６头健康、２～３岁、体重３００～４００ｋｇ雄性水牛,研究了睾丸摘除对血像和某些免疫功能指标的影响。结果表明：睾丸摘除后ＲＢＣ、ＰＣＶ、Ｈｂ、ＲＣＣ虽与摘除前比较有不同程度的变化,但差异均不显著;ＷＢＣ在睾丸摘除后１５ｄ内呈明显下降趋势,ＤＣ中的嗜酸性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞（％）在摘除后１～４ｄ内降低或显著降低,而嗜中性粒细胞则显著升高,嗜碱性粒细胞摘除前后无明显变化;ＲＢＣ－ＣＲ１花环率和Ｂ－淋巴细胞（％）在摘除后１５ｄ内明显低于摘除前水平,ＲＢＣ－ＩＣ花环率在摘除后第５天明显下降,以后又逐渐回升到摘除前水平,Ｔ－淋巴细胞变化与Ｂ－淋巴细胞相反;血清总蛋白（ＴＰ）、白蛋白（Ａ）分别在摘除２ｄ后和头２ｄ显著下降,以后ＴＰ在低水平上变动,而Ａ略有回升,球蛋白（Ｇ）、β－Ｇ和γ－Ｇ在摘除后头２ｄ内均明显升高,以后变化与摘除前水平比较差异不显著,α－Ｇ在摘除前后无明显变化。     

水牛实验感染肝片吸虫后IGF—I和β内啡肽含量变化及其对免疫功能的影响

８头健康阉公水牛，５头经口每日感染肝片吸虫囊蚴６０个／头，连续２０ｄ；３头不感染作对照，于感染前和感染后每周采集颈静脉血样１次，共２７次，分别测定血浆ＩＧＦ－Ｉ，β内啡肽（β－ＥＰ）以及ＷＢＣ，ＤＣ；Ｔ，Ｂ淋巴细胞比例和血清抗肝片吸虫ＩｇＧ水平，结果ＩＧＦ－Ｉ和β－ＥＰ分别在开始感染后第５周和第４周显升高，并持续互第２３周和第９周，ＩｇＧ水平也在第４－２２周显高于对照组，嗜酸性粒细胞和Ｂ淋巴细     

在玉米─大麦─豆粕型饲粮中添加β-葡聚糖酶对生长猪生产性能及营养物质表观消化率的影响

共采用３０ 头２０ 公斤重的杜×长×大生长猪,均分入３ 个处理组,分别饲以玉米－ 豆粕（ＣＳ） 、玉米－ 大麦－ 豆粕（ＣＢＳ） 和玉米－ 大麦－ 豆粕＋ ０－１ ％ β－ 葡聚糖酶（ 酶活性为２－８ 万Ｕ／ 克）（ＣＢＳＥ） 饲粮,饲喂至５０ 公斤,分别测定了猪的生产性能及总能（ＧＥ） 粗蛋白（ＣＰ） 、粗纤维（ＣＦ） 的表观消化率。结果表明：在生长猪的ＣＢＳ饲粮中添加β－ 葡聚糖酶后,对猪的日增重、料重比有改善的趋,从而接近ＣＳ 饲粮的效果,但差异不显著（Ｐ＞ ０－０５） ;但可显著提高猪对饲粮ＧＥ、ＣＦ 的表观消化率（Ｐ≤０－０５） ,对ＣＰ 的表观消化率没有显著的改善作用（Ｐ＞ ０－０５） 。     

关节炎大鼠背根节中α—CGRP和β—CGRP mRNA变化及针刺效应

用原位核酸分子杂交技术观察了佐剂性关节炎大鼠背根节（ＤＲＧ）中α－与β－降钙素基因相关肽（α－ＣＧＲＰ和β－ＣＧＲＰｍＲＮＡ的表达及电针的效应。结果表明，在正常动物ＤＲＧ中有３８．２５％神经元标记α－ＣＧＲＰｍＲＮＡ，３２．８％标记β－ＣＧＲＰｍＲＮＡ，且α－ＣＧＲＰ和β－ＣＧＲＰｍＲＮＡ主要在小细胞（分别为１８．１６％和１９．５６％）和中细胞（１１．３２％和１１．６７％）中表达，在少数在细胞（８     

山谷型藏山羊及其杂种羊乳生化遗传标记研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＡＧＥ）分析山谷型藏山羊、安哥拉山羊、Ｆ１乳中的ＬＤＨ、ａｓ－ＣＮ、β－ＣＮ、β－Ｌｇ、ＳＡ等基因座。结果表明，乳ＬＤＨ出现三条带（Ａ）、两条带（Ｂ）、一条带（Ｃ）３种类型；ａｓ－ＣＮ有３种表型（ＡＡ、ＡＢ、ＢＢ），由Ａ基因和Ｂ基因控制；在β－ＣＮ和β－ｌｇ中以ＡＢ型为主，其余类型很少；乳ＳＡ为单态，定为ＡＡ型。分析乳ａｓ－ＣＮ多态性与６个主要经济性状（体重、体直长、体高、胸围、管围、自然毛长）的关系发现，山谷型藏山羊ａｓ－ＣＮＡＡ、ＡＢ型体直长显著大于ＢＢ型体直长（Ｐ＜００５），Ｆ１ａｓ－ＣＮＡＡ型胸围显著大于ＡＢ型。     

大肠杆菌耐热性肠毒素Ⅰ融合基因的构建及其免疫原性研究

用限制性核酸内切酶ＢａｍＨＩ和Ｂｇ１Ⅱ双酶切质粒ｐＢＳＴ２－６，获得了大肠杆菌耐热性肠毒素Ⅰ（ＳＴ１）基因，再将含ＬａｃＺ基因（编码β－半乳糖苷酶）的载体ｐＵＣ１８用ＢａｍＨＩ酶切、碱性磷酸酶处理，然后与ＳＴ１基因通过Ｔ４ＤＮＡ连接酶连接，转化至受体菌ＤＨ５α中。通过菌落原位杂交筛选，共筛选出５３个ＳＴ１基因探针杂交阳性的重组子，对其中一个重组子ＤＨ５α（ｐＸＳＴ１）进行限制性核酸内切酶酶切分析和核苷酸序列分析，证明重组质粒ｐＸＳＴ１含有２个正向串连在一起的ＳＴ１基因，而且融合在ＬａｃＺ基因的上游，具有正确的阅读框架。又ＤＨ５α（ｐＸＳＴ１）菌株能在含Ｘ－Ｇａｌ的ＬＢ平板上长成蓝色菌落，而且ＥＬＩＳＡ也检测到ＳＴ１融合蛋白，这表明该菌株能表达具有β－半乳糖苷酶活性的大肠杆菌ＳＴ１—β－半乳糖苷酶融合蛋白。免疫实验结果表明，重组菌株ＤＨ５α（ｐＸＳＴ１）安全无毒，表达的ＳＴ１融合蛋白能够诱发ＢＡＬＢ／ｃ鼠产生抗体，该抗体具有中和天然ＳＴ１肠毒素的毒性作用，这表明ＤＨ５α（ｐＸＴ１）可以作为预防幼畜腹泻的菌苗候选株。     

SPF鸡人工感染鸡败血霉形体后血液生物化学变化

用鸡败血霉形体（ＭＧ）国际标准强毒Ｒ株人工感染１５日龄ＳＰＦ鸡,在感染后１５ｄ采血作血液生物化学检验。结果：ＴＢｉｌ、ＧＯＴ、ＧＰＴ、ＡＬＰ、ＬＤｈ、ＣＯ２－ＣＰ、ＣＲＥ、ＢｕＮ、ＣＲＥ－Ｕ、无机磷、Ｍｇ＾２＋明显升高,而ＴＰ、ＡＬＢ、Ａ／Ｇ、Ｃｈｏ、Ｇｌｕ、Ｃａ＾２＋等明显下降,ＲＢＣ和Ｈｂ下降,ＷＢＣ上升,其中ＬＣ和嗜酸性白细胞明显上升。说明ＭＧ不仅造成呼吸系统障碍,也对肝功能和功能产生较大影     

表达大肠杆菌耐热性肠毒素Ⅰ－β－半乳糖苷酶融合蛋白菌株的构建

将含大肠杆菌耐热性肠毒素Ⅰ（ＳＴⅠ）结构基因的质粒ｐＢＳＴ２－６用限制性内切酶ＢａｍｍＨⅠ和ＢｇｌⅡ消化，经３％琼脂糖凝胶电泳分离、透析袋电洗脱法回收１４７ｂｐＳＴⅠ基因片段，再将含ＬａｃＺ基因（编码β－半乳糖苷酶）的载体ｐＵＣ１８用ＢａｍＨⅠ消化、碱性磷酸酶处理，然后将处理的ｐＵＣ１８ＤＮＡ与１４７ｂｐＳＴⅠＤＮＡ通过Ｔ４ＤＮＡ连接酶进行粘性末端连接，转化至受体菌ＤＨ５α。通过菌落原位杂交筛选，共筛选出５３个为ＳＴⅠ基因探针杂交阳性的菌株。杂文阳性的菌株经培养和抽提纯化质粒后，经限制性内切酶分析和ＤＮＡ序列分析，证明重组质粒ｐＸＳＴⅠ含有２个连接在一起的ＳＴⅠ基因片段，其连接方向是正向的，具有正确的阅读框架。又ＤＨ５α（ｐＸＳＴⅠ）菌株能在含Ｘ－Ｇａｌ的ＬＢ平板上呈蓝色菌落．表明该菌株能表达具有β－半乳糖苷酶活性的大肠杆菌耐热性肠毒素Ⅰ－β－半乳糖苷酶融合蛋白。     

青海细毛羊生化遗传多态性的研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳和火焰光度法对５０９只青海细毛羊细血液和乳汁中ＨＢ，ＥＰ－１，ＥＰ－２，ＫＥ，ＴＦ，ＡＭＹ１，ＡＭＹ２，ＥＳ，ＡＬＰ，ＲＢＣ－ＬＤＨ，Ｈｐα－ＬＡ和β－ＬＧ总共１３个位点的多态性进行了研究。结果为：（１）在青海细毛羊的ＨＢ，ＫＥ，ＴＦ，ＡＭＹ２，ＥＳ，ＡＬＰ，ＲＢＣ－ＬＤＨ１，Ｈｐ，β－ＬＧ总共９个位点上发现多态性，多态性位点的比例为６９．２３％；（２）每个位点实有的平均等位     

骨钙素在乳牛骨软病研究上的重要性

从北京某农场选取５头骨软病乳牛作为试验组，５头健康乳牛作为对照组，然后进行了血常规，血清学检测。结果表明，试验组乳牛血清钙水平呈下降趋势；血清无机磷水平显著下降。知清ＡＫＰ活性显著升高，其同工酶特征性酶谱中骨带染色谱宽变深；血清维生素Ｄ３活性代谢产物（２５－ＯＨ－Ｄ和１，２５－（ＰＨ）２－Ｄ３）均显著下降；血清骨钙素（ＢＧＰ）水平极显著下降。     

用亲和层析法提取大片吸虫谷胱甘肽转移酶的研究

为了探明大片吸虫谷胱甘肽转移酶（ＧＳＴ）的多肽组分和酶活力,以供今后进行ＧＳＴ的免疫原性和各种蠕虫ＧＳＴ的交叉免疫原性的研究,本试验首次用亲和层析法对大片吸虫ＧＳＴ进行提取,用ＳＤＳ—ＰＡＧＥ分析了大片吸虫ＧＳＴ的多肽组分,用１－氯－２,４－二硝基苯（ＣＤＮＢ）为底物测定了ＧＳＴ酶活力。电泳染色结果表明,大片吸虫ＧＳＴ至少有２条带,其分子量为２９．９～２４．５ＫＤ,其中主带２条,分别为２８．３、２６．２ＫＤ。酶活力测定结果表明,提取的ＧＳＴ可获得１０．４４μｍｏｌ／Ｌ／ｍｉｎ／ｍｇ以上的酶比活性。     

牛轮状病毒重组株的血清学和基因型特性

从母牛接种过Ａ组ＢＲＶ株ＮＣＤＶ－Ｌｉｎｃｏｌｎ（Ｐ１：Ｇ６）苗的两个吡邻牛场分离到两株牛轮状病毒（ＢＲＶ），编号为ＮＳ－１和ＮＳ－２，Ｎｏｒｔｈｅｒｎ－ｂｌｏｔｔｉｎｇ试验表明，ＮＳ－１和ＮＳ－２有相的的Ａ组ＲＮＡ电泳模式，而且全部基因片段同源，体外中和试验表明，ＮＳ－１株病毒能被Ｇ６特异性单克隆抗体（ＭｃＡｓ）和抗ＢＲＶＢ６４１株（Ｐ５：Ｇ６）豚鼠高免血清（ＧＰＡＳ）中和，但不被Ｇ１０特异性Ｍ     

产气荚膜梭菌β-毒素基因的克隆与核苷酸序列分析

为了给产气荚膜梭菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ）β毒素基因工程亚单位苗和细菌毒素多价基因工程苗的研制提供基因材料，用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）技术，从Ｂ型产气荚膜梭菌染色体基因组中扩增了９３０ｂｐ的β－毒素基因。用限制性核酸内切酶ＢａｍＨＩ和ＥｃｏＲＩ对ＰＣＲ产物进行双酶切处理，然后通过Ｔ４ＤＮＡ连接酶将其定向连接于事先经同样的双酶切处理的载体质粒ｐＥＴ－２８Ｃ（＋）的多克隆位点，转化至受体菌ＢＬ２１（ＤＥ３）中。经ＢａｍＨＩ和ＥｃｏＲＩ双酶切分析和ＰＣＲ扩增检测，证明重组质粒ｐＥＣＢ２中含有产气荚膜梭菌的β－毒素基因。经核苷酸序列分析，明确了克隆的β－毒素基因在重组质粒中的连接向位和阅读框架是正确的。     

结缕草种子打破休眠过程的代谢调控

作者测定了结缕草休眠与打破休眠种子发芽过程中磷酸已糖异构酶（ＰＧＩ）、６－磷酸葡萄糖脱氢酶和６－磷酸葡萄糖酸脱氢酶（Ｇ－６－ＰＤＨ和６－ＰＧＤＨ）的联合活性以及苹果酸脱氢酶（ＭＤＨ）的活性。结果表明，打破休眠种子的酶活化较休眠种子快，并且打破休眠种子的Ｇ－６－ＰＤＨ和６－ＰＧＤＨ联合活性及ＭＤＨ活性在发芽过程中显著高于休眠种子。由此证明休眠种子在发芽过程中，其磷酸戊糖途径（ＰＰ）及三羧酸循环（ＴＣ     

产气荚膜梭菌β-毒素基因的克隆及CPB-ST融合基因的构建

用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）技术,从Ｂ型产气荚膜梭菌染色体基因组中扩增了９３０ｂｐ的β－毒素基因。用限制性核酸内切ａｍＨ Ⅰ和ＥｃｏＲ Ⅰ对ＰＣＲ产物进行双酶切处理,然后,通过Ｔ４ ＤＮＡ连接酶将其定向连接于事先经同样的双酶切处理的载体质粒ｐＥＴ－２８Ｃ（＋）的多克隆位点,转化至受体菌ＢＬ２１（ＤＥ３）中。经ＢａｍＨ Ⅰ和ＣｃｏＲ Ⅰ双酶切分析和ＰＣＲ扩增检测。证明重组质粒ｐＥＣＢ２中含有产气荚膜梭     

大肠杆菌耐热性肠毒素ST1—LacZ融合基因的构建

利用含大肠杆菌耐热性肠毒素ＳＴ１基因的质粒ｐＢＳＴ２－６和含ＬａｃＺ基因（编码β－半乳糖苷酶）的载体ＰＵＣ１８，构建成ＳＴ１－ＬＡＣＺ融合基因。将质粒ｐＢＳＴ２－６用限制性内切酶ＢａｍＨＩ和ＢｇＩＩＩ消化、碱性磷酸酶处理，最后将处理好的ＰＵＣ１８ ＤＮＡ与１４７ ｂｐＳＴ１ ＤＮＡ通过Ｔ４ＤＮＡ连接酶进行粘性末端连接，转化不受体菌ＤＨ５Ａ中。通过菌落原位杂交筛选，共筛选出５３个为ＳＴ１基因探针杂交     

鼠伤寒沙门氏菌对鼠淋巴细胞MHC—1,MHC—2,ICAM—1和CD4表达的影响

应用流式细胞仪技术，检测经口灌服１０＾３个鼠伤寒沙门氏菌，４８ｈ后迫杀的Ｃ５７Ｂ１６／Ｈ２＾ｂ鼠外周淋巴结、肠系膜淋巴结、脾和外周血中淋巴细胞ＭＨＣ－１、ＭＨＣ－２、ＩＣＡＭ－１和ＣＤ４ ４种受体的变化。结果表明，鼠伤寒沙门氏菌使外周血淋巴细胞ＭＨＣ－１、ＭＨＣ－２和ＩＣＡＭ－１的表达显著升高（Ｐ〈０．００１），肠系膜淋巴结中淋巴细胞ＭＨＣ－２、ＣＤ４和外周血淋巴细胞ＣＤ４的表达也有升高。     

鼠伤寒沙门氏菌对鼠淋巴细胞MHC－1、MHC－2、ICAM－1和CD4表达的影响

应用流式细胞仪技术，检测经口灌服１０３个鼠伤寒沙门氏菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ），４８ｈ后迫杀的Ｃ５７Ｂ１６／Ｈ２ｂ鼠外周淋巴结、肠系膜淋巴结、脾和外周血中淋巴细胞ＭＨＣ－１、ＭＨＣ－２、ＩＣＡＭ－１和ＣＤ４４种受体的变化。结果表明，鼠伤寒沙门氏菌使外周血淋巴细胞ＭＨＣ－１、ＭＨＣ－２和ＩＣＡＭ－１的表达显著升高（Ｐ＜０．００１），肠系膜淋巴结中淋巴细胞ＭＨＣ－２、ＣＤ４和外周血淋巴细胞ＣＤ４的表达也有升高。     

水牛实验感染肝片吸虫后IGF-Ⅰ和β内啡肽含量变化及其对免疫功能的影响

头健康阉公水牛, ５ 头经口每日感染肝片吸虫囊蚴６０ 个／ 头, 连续２０ ｄ ; ３ 头不感染作对照。于感染前和感染后每周采集颈静脉血样１次, 共２７ 次, 分别测定血浆 Ｉ Ｇ Ｆ Ⅰ、β内啡肽 （β Ｅ Ｐ） 以及 Ｗ Ｂ Ｃ 、 Ｄ Ｃ ; Ｔ、 Ｂ 淋巴细胞比例和血清抗肝片吸虫 Ｉｇ Ｇ 水平。结果 Ｉ Ｇ Ｆ Ⅰ和β Ｅ Ｐ 分别在开始感染后第５ 周和第４ 周显著升高, 并持续到第２３ 周和第９ 周; Ｉｇ Ｇ 水平也在第４ ～２２ 周显著高于对照组, 嗜酸性粒细胞和 Ｂ 淋巴细胞比例也明显升高。结果表明肝片吸虫感染后水牛免疫功能的变化可能与 Ｉ Ｇ Ｆ Ⅰ及β Ｅ Ｐ 有关。