用RAPDs研究大豆根瘤菌的遗传多样性

采用ＲＡＰＤｓ分子标记研究２８株中国大豆根瘤菌的遗传多样性，１２个随机引物扩增产物电濂昆计算机聚类分析，得出反映菌株基因组序列相似水平的树状图。由树状图得知：ＲＡＰＤｓ分析结果可以准确地将供试大豆根瘤菌分为快、慢两群。每群中又可以再划分为两个亚群。本研究的结果还表明来源于新疆的一群快生型大豆根瘤菌显著不同于其它地区的快生型大豆根瘤菌菌株，是独立的一群，与陈文新等用表型性状的研究方法得出的结论一致。     

山西省快生型大豆根瘤菌资源调查和鉴定

从山西省主要大豆产区的不同土壤和大豆品种中分离得到的38个快生型大豆根瘸菌株的鉴定表明,这些分离物的IAR除了氨苄青霉素外,均较慢生型为低。38个菌株被分为4个血清型,其中2个为新发现的,命名为2077和2120型。细胞成分N%含量为2.01-3.78,C%含量为50.52-55.53%,N/C值<10。所检测的7个菌株都有1-2个大质粒,且每个均有112 Md的大质粒。分离株的共生效应和结瘤竞争由于大豆品种不同而有显著差异。本研究表明,我国大豆起源地之一的山西省,快生型大豆根瘸菌的分布广泛,分离频率较高,菌株类型也多。     

豌豆根瘤菌的盐碱适应性鉴定

通过模拟试验,研究了筛选自甘肃武威、临夏、庆阳、定西的13株豌豆族根瘤菌对酸碱和盐分的适应性.结果表明:筛选菌株的盐碱忍耐能力凶菌株而异,菌株D2的耐盐能力最强,其OD600nm在2.5%、3.5%、4.5%的NaCl浓度下,比与其差异显著且紧邻的菌株的OD600nm分别高77%、191%和112%,是最低OD600nm值的30.32倍,20.76倍和67.68倍;Q3对3.5%和4.5%NaCl的忍耐能力最低.菌株D2的耐酸能力最强,pH=4时,其OD600nm显著大于其它12株菌株,是最低值的20倍,是其它12株平均值的6.9倍;菌株W1的OD600nm在pH=10及pH=11时均为13株菌株的最大值,比与其差异显著的菌株的平均值分别高41%和135%,W1的耐碱能力最强.     

北方地区大豆根瘤菌的生物学特性

对北方地区大豆根瘤菌的生物学特性进行了较为系统的研究,结果表明,黑、辽地区分离、纯化的17株根瘤菌均具有典型的根瘤菌的个体形态和菌落特征,生理生化指标接近,可与辽豆15共生结瘤,分为快生菌和慢生菌。所有根瘤菌均可不同程度地利用供试的5种碳源。耐酸碱度、耐盐性及温度敏感实验表明,菌株HS3可在pH6.0~9.0生长,菌株HH4可耐受1.5%氯化钠,菌株HH4,HH2可在13℃~39℃生长。     

不同保藏年代的大豆根瘤菌冻干菌种的生物学活性研究

对实验室保藏的4～25年的冷冻干燥管大豆根瘤菌菌种进行了生物学活性测定。结果表明，供试4种大豆根瘤菌都有结瘤能力和固氮能力，它们之间的单株结瘤数和固氮酶活没有显著差异。同时证明冷冻干燥法是保藏根瘤菌的良好方法。     

慢生型大豆根瘤菌菌株GX201的脯氨酸脱氢酶基因(putA)的分子克隆

根据已报道的脯氨酸脱氢酶基因（ｐｕｔＡ）序列,通过ＰＣＲ方法,从慢生型大豆根瘤菌菌株ＧＸ２０１的总ＤＮＡ中扩增到—ＰＣＲ产物。序列分析表明,该ＰＣＲ产物的长度为４１８ｂｐ,与已报道的ｐｕｔＡ基因具有９３．５％的同源性。以广谱寄主范围质粒ｐＬＡＦＲ３为载体,在大肠杆菌ＤＨ５α中构建了ＧＸ２０１的基因文库,并以该ＰＣＲ产物为探针,从基因文库中筛选到一重组质粒ｐＧＸＮ３００。     

安徽省北部大豆根瘤菌的分离,血清学分析及田间自然结瘤调查

对安徽省北部分离的２７株快生大豆根瘤菌和３８株慢生大豆根瘤菌的血清学分析及田间自然结瘤的血清学调查表明：００５血清型系安徽北部夏大豆产区占据优势的血清型，１８组样品和再现频率为１００％；３６株分离物中２６株属００５血清型，占总分离物的７２．５％。２０４８血清型出现频率为８３．３％；在３组样品中占瘤率达４１－５１。６％。２１７血清型占瘤率普遍低于１６％。讨论了自然结瘤调查中采样地点，大豆品种和土壤类     

快,慢型大豆根瘤菌质粒接合重组的初步研究

通过含有Ｒ６８．４５质粒的大肠杆菌将快生型大豆根瘤ＡＣＣＣ１５０６７菌株的大质粒转到慢生型大豆根瘤菌６１Ａ７６菌株中去，共接合转移出２２个接合子菌株，对其中的１２个菌株进行了与８３－１１９大豆的共生接种试验，其效果是部分接合子菌株超过供体菌和受体菌对接合子ＢＦ２－Ａ１菌株进行了质粒检测。田间应用亦有增产趋势。     

花生根瘤菌接种与微量元素肥料配施对其生物量及氮素利用的影响

采用盆栽试验，主要研究了在施用同一基础化肥的情况下，接种根瘤菌及配施微量元素素肥料对花生生物量及氮素利用的影响，试验结果表明，按种根瘤菌比未接种的生物量增加２０．６％；配施微量元素肥料的可能使花生干重增加３７％，在开花等农艺性状方面，均有不同程度的改善，氮素利用有不同程度的增加，各种微量元素肥料有其最佳施用量。     

不同保藏年代的大豆根瘤菌冻干菌种的生物学活性研究

对实验室保藏的4～25年的冷冻干燥管大豆根瘤菌菌种进行了生物学活性测定。结果表明,供试4种大豆根瘤菌都有结瘤能力和固氮能力,它们之间的单株结瘤数和固氮酶活没有显著差异。同时证明冷冻干燥法是保藏根瘤菌的良好方法。     

慢生型大豆根瘤菌putA基因的功能分析

重组质粒pGX300上的putA基因是从慢生型大豆根瘤菌GX201中克隆到的编码脯氨酸脱氢酶的基因。通过Tn5gusA5定位诱变方法构建了putA基因的突变株GX20120，实验表明，GX20120的结瘤时间推迟，竞争结瘤能力降低。     

慢生型大豆根瘤菌nfeC基因的定位

在前期工作中 ,从慢生型大豆根瘤菌菌株 GX2 0 1的基因文库中筛选到一个含 nfe C基因同源片段的重组质粒 p GXN2 0 1。在本工作中 ,将 nfe C基因同源片段定位在 4 kb Cla I Xba I片段上。对该片段的部分序列分析表明与已报道的 nfe C基因具有 95%的同源性     

研究豆科植物根系中根瘤菌的方法

直接测定根瘤的数量、重量和体积均非理想的根瘤菌计数法,因为这些均与豆科植物的生长情况或收获量不成一定的关系。Ковров-цева法也具有很多重大的缺点,如引起细菌后     

一株大豆根系来源的不同类型土著B.japonicum菌株的共生特性

本文对未接种的大豆单株根系来源的不同类型Ｂ．ｊａｐｏｎｉｃｕｍ菌株共生效率进行了评价。结果表明，供试１２个菌株与６个大豆品种都形成有效共生，但不同菌株，品种和菌株－品种组合间均存在极显著差异，表现共生亲和多样性。菌株结瘤竞争力越强，其共生固氮效率越高。     

PCR技术在快生型大豆根瘤菌菌株鉴别上的应用

以基因外重复的回文因子（ｒｅｐｅｔｉｔｉｖｅｅｘｔｒａｇｅｎｉｃｐａｌｉｎｄｒｏｍｉｃ，ＲＥＰ）和肠杆菌基因间重复一致序列（ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｉａｌｒｅｐｅｔｉｔｉｖｅｉｎｔｅｒｇｅｎｉｃｃｏｎｓｅｎｓｕｓ，ＥＲＩＣ）的碱基顺序设计出的引物为引物，用ＰＣＲ（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ）技术分别扩增了８株快生型大豆根瘤菌（Ｓｉｎｏｒｈｉｚｏｂｉｕｍ）的总ＤＮＡ，得出了具有菌株特异性的扩增产物电泳图谱，称ＲＥＰ－ＥＲＩＣＰＣＲ指纹图谱，将所得图谱进行性状编码后，用计算机数值分类系统进行平均连锁聚类分析，得出这８个菌株的聚类树状图。这一聚类结果与用其它方法聚类结果基本一致，说明ＲＥＰ－ＥＲＩＣＰＣＲ是一种鉴别快生型大豆根瘤菌菌株的经济、快速而又可靠的新方法。