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采用富集培养和透明圈平板筛选的方法,从长期堆放青贮饲料的土壤中分离到7株木聚糖酶产生菌。选取透明圈最大的木聚糖酶产生菌X7作为基础菌,对其进行16S rRNA部分序列PCR扩增测定,经基因序列比对(BLAST)同源性分析确定X7为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis strain GD3b,Genebank编码:HM055602.1)。然后将X7进行发酵产酶并对其酶学性质进行初步研究,结果表明:在温度37℃、摇床转速200 r/min和发酵2~3 d所产的木聚糖酶酶活可达13.47 U/mL;其相应粗酶液酶促反应的最适pH为6,酶促反应的最适温度为55℃。 相似文献
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饲用木聚糖酶生产菌株的筛选及部分酶学性质的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
运用平板初筛和发酵复筛的方法,从6株斜面保存菌中,筛选出3株产木聚糖酶的菌种:康氏木霉3.590,康氏木霉3.549和里氏木霉QM9414。其中康氏木霉3.590产木聚糖酶活力最高,达40.78152U/mL,并对其酶学性质进行了初步研究,得到其反应的最适温度和最适pH值分别为60℃和5.6。 相似文献
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饲用木聚糖酶生产菌株的筛选及部分酶学性质的研究 总被引:1,自引:1,他引:1
运用平板初筛和发酵复筛的方法,从6株斜面保存菌中筛选出3株产木聚糖酶的菌种,即康氏木霉3.590(Trichoderma koningii 3.590)、康氏木霉3.549(Trichoderma koningii 3.549)和瑞氏木霉QM9414(Trichoderma reesei QM9414)。其中康氏木霉3.590产木聚糖酶酶活最高,达40.78152U/ml,对其酶学性质进行了初步研究,得到其反应的最适温度和最适pH值分别为60℃和5.6。 相似文献
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饲用酶制剂中木聚糖酶酶学性质的研究 总被引:3,自引:1,他引:3
木聚糖酶是饲用复合酶制剂中的主要酶种之一,本文对某商品酶制剂中的木聚糖酶进行了酶学性质的研究,这对于木聚糖酶的酶活测定,保存及应用均具有重要的指导意义。试验结果表明:该木聚糖酶的热稳定性良好,最适反应温度为50℃,最适pH值为5.0,Km值为4.485mg/mL,Cu^2 ,Zn^2 ,Mn^2 和Fe^3 对本木聚糖酶的抑制作用,而Na^ ,K^ 及(NH4)2SO4能提高此木聚糖酶的活性。 相似文献
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饲用酶制剂中木聚糖酶酶学性质的研究 总被引:5,自引:3,他引:5
木聚糖是一种广泛存在于植物中的半纤维素,它是由β-1,4糖苷键连接而成的木糖聚合物。为了掌握常用饲用酶制剂中木聚糖酶的酶学性质,对某商品复合酶制剂中所含的木聚糖酶进行了热稳定性、最适pH值、最适反应温度、底物征对性、不同金属离子对其酶活的影响、反应进程曲线及其Km值等的测定,以其对常用的木聚糖酶的酶活测定、保存及应用有一定的指导意义。1材料与方法1.1实验仪器精密pH计:±0.01pH;电子天平:d=1mg;紫外分光光度计UV-1601;恒温水浴锅;蠕动泵;紫外检测器;分布收集器;Φ2.6cm×100cm色谱柱。1.2实验材料某商品酶制剂。1.3酶活… 相似文献
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饲用酶制剂中木聚糖酶酶学性质的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
木聚糖酶是饲用复合酶制剂的主要酶种之一,本文对某商品酶制剂中的木聚糖酶进行了酶学性质的研究,这对于木聚糖酶的酶活测定,保存及应用均具有重要的指导意义,实验结果表明,该木聚糖酶的热稳定性良好,最适反应温度为50℃,最适pH为5.0,Km值为4.485mg/mL,Cu^2 ,Zn^2 ,Mn^2 和Fe^3 对本木聚糖酶有抑制作用,而Na^ ,K^ 及(NH4)SO4能提高此木聚糖酶的活性。 相似文献
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木聚糖酶是饲用复合酶制剂中的主要酶种之一,本文对某商品酶制剂中的木聚糖酶进行了酶学性质的研究,这对于木聚糖酶的酶活测定、保存及应用均具有重要的指导意义.实验结果表明:该木聚糖酶的热稳定性良好,最适反应温度为50℃,最适pH为5.0,Km值为4.485 mg/mL,Cu2+、Zn2+、Mn2+和Fe3+对本木聚糖酶有抑制作用,而Na+、K+及(NH4)2SO4能提高此木聚糖酶的活性. 相似文献
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木聚糖酶产生菌的筛选鉴定及木聚糖酶基因(Xyn B)的克隆 总被引:2,自引:1,他引:1
采用富集培养、透明圈平板筛选的方法,从长期堆放青贮饲料的土壤中分离到7株木聚糖酶产生菌。选取透明圈最大的木聚糖酶产生菌X7作为基础菌,对其进行16S rRNA部分序列PCR扩增测定,经BLAST同源性分析确定X7为枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis strain GD3b(Genebank编码:HM055602.1)。然后设计特异引物,以X7基因组为模板,对其进行Xyn B基因序列PCR扩增,扩增产物经BLAST同源性分析表明已成功克隆了X7菌株的Xyn B基因,为日后构建木聚糖酶基因酵母表达载体,培育能够分泌表达具有高活性的木聚糖酶酵母工程菌奠定了基础。 相似文献
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该试验以黄色瘤胃球菌基因组为模板,通过PCR扩增获得目的基因xynB,将xynB与表达载体PET28a连接,获得重组载体PET28a-xynB。用IPTG对含有重组载体的大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达,镍离子层析柱纯化后检测其酶学性质。生物信息学分析表明,XynB理论大小为47 kDa,预测等电点为4.49,不含信号肽,含有1个糖苷水解酶11家族结构域和1个碳水化合物结合结构域。酶学性质研究结果表明,该酶的最适pH值为5.0,最适反应温度为40℃,金属离子Mg2+、Na+、K+和Ba2+对木聚糖酶XynB有较好的激活效果。综上可知,黄色瘤胃球菌木聚糖酶XynB属于GH11家族,最适pH值为5.0,最适温度为40℃,酶比活力为62.94 U/mg。 相似文献