白背毛木耳43-28胞外多糖的提取与纯化

[目的]对白背毛木耳43-28胞外多糖进行提取和纯化。[方法]利用液体深层发酵进行培养,水提-醇析法分级提取胞外多糖,通过DEAE—cellulose52和SephadexG-200柱层析纯化胞外多糖。[结果]提取得到白背毛木耳43—28胞外多糖,粗多糖得率为2．4％,总糖含量为54．67％;胞外多糖粗提物经DEAE—cellulose52柱层析后分成酸性和中性多糖,这2种多糖分别经SephadexG-200柱层析后。酸性多糖分离成大分子酸性多糖AP5和小分子酸性多糖AP62个组分,中性多糖只有AW1个组分。[结论]成功提取得到白背毛木耳43-28胞外多糖并进行了纯化,为对白背毛木耳多糖的综合利用提供参考。     

白术多糖的提取、分离纯化及分子量的测定

采用复合酶法对白术多糖进行提取,经过Scrag法脱蛋白、H2O2除色素,再过DEAE纤维素柱层析得到纯品白术多糖;经常压凝胶柱色谱法和高效液相凝胶色谱(High performance gel penetration chromatography,HPGPC)法证明白术多糖为均一多糖,红外谱图初步分析可知该白术多糖有多糖特征吸收峰,凝胶渗透色谱法(Gel penetration chromatography,GPC)测定其分子量(Mw)为4 360 Da.     

海藻多糖的分离纯化和组成分析

从海藻水提取液中得到一种多糖粗提物 ,经DEAE -Cellulose -5 2和Superdex 2 0 0柱层析分离纯化得到均一的多糖组分LJ-S -a ,高效液相色谱法测定其多糖的分子量为 6.8× 10 4 ,气相色谱分析其单糖组成为鼠李糖、葡萄糖和半乳糖 ,其摩尔比依次为 :4.3 0∶1.0 0∶1.88。     

丹皮多糖的提取纯化及其药理作用初步研究

中药丹皮用冷水浸提，粗提物用ＤＥＡＥ－纤维素柱纯化，得到丹皮多糖。凝胶柱层析和醋酸纤维薄膜电泳表明其为均－性多糖。咔唑反应和纸层析证明该多糖为酸性多糖。药理试验证实丹皮多糖具有显著的降血糖作用。     

白灵菇胞外多糖的分离纯化及其抗氧化活性的研究

从白灵菇菌株JZ-FH16发酵液中提取胞外多糖,并对该多糖的分离纯化技术、结构和抗氧化活性进行了研究。结果表明,白灵菇胞外粗多糖经DEAE-Cellulose52和Sephadex G-200柱层析后得到主要组成成分PNEP I-a;采用HPLC、Sephadex G-200柱层析、琼脂糖凝胶电泳、红外光谱以及化学反应等方法证明PNEP I-a是一种含有α-D葡萄糖、甘露糖等特征基团的中性纯多糖,其对.OH和O.2-清除率分别为49.50%和47.24%,具有显著的抗氧化活性。     

冠突散囊菌胞外多糖的分离纯化

冠突散囊菌液体深层发酵滤液经浓缩,醇析,透析冻干得多糖粗品.粗多糖经Sevag法脱蛋白,DEAE-52阴离子交换柱层析纯化得到4种多糖.将含量最高的多糖ECP-A经Sephadex G-100葡聚糖凝胶柱层析得到纯化的冠突散囊菌胞外多糖(ECP-A1和ECP-A2),并测定其相对分子质量.用紫外光谱和红外光谱分析鉴定该多糖,紫外光谱分析未见蛋白质(280 nm)与核酸(260 nm)的特征吸收峰,红外光谱揭示ECP-A1具有典型的多糖特征吸收峰,表明ECP-A1和ECP-A2为单一均匀组分的多糖.     

龙眼多糖清除自由基活性的研究

从清除1,1-二苯基-2-苦苯肼自由基（DPPH·）、羟基自由基（·OH）和超氧阴离子（O2^-·）三个方面,探讨纯化方法对龙眼多糖清除自由基活性的影响．以抗坏血酸为对照,利用分光光度法分别测定龙眼粗多糖（CLPS）、Sevag法脱蛋白制得的龙眼粗多糖半纯品（SLPS）、TEA法脱蛋白制得的龙眼粗多糖半纯品（TLPS）、经DEAE-Cellulose52离子交换柱层析纯化得到的龙眼多糖纯品（LPS-2）对DPPH·OH和O2^-·的清除能力．结果显示：多糖纯度越高,清除DPPH·活性也越强,其清除活性由强到弱依次为：LPS-2〉TLPS〉SLPS〉ELPS;对于·OH和O2^-·,SLPS清除活性最强,ITS-2清除活性最弱,说明杂蛋白质抑制了多糖清除·OH、O2^-·活性,而糖蛋白中的蛋白质则起到促进作用．     

灰树花多糖的分离、纯化与理化性质

灰树花子实体用热水提取，乙醇沉淀，透析冻干得灰树花多糖粗品，再经Sevag法脱蛋白，DEAE－Sephadex A-25柱层析纯化得到4种多糖分别为PGF－1，PGF－2，PGF－3和PGF－4。4种多糖经纸层析，Sephadex G-200柱层析及聚丙烯酰胺凝胶电泳分析。结果表明都为单一均匀组分：PGF－1经纸层及气相色谱分析证实它是一种葡萄糖；凝胶渗透色谱测定其分子量为11万。红外光谱揭示PGF－1含β－型糖苷键。     

茶树紫色芽叶中花青素的提取-层析分离及初步鉴定

[目的]为茶叶中花青素的提取、分离与鉴定提供方法支持。[方法]以茶树紫色芽叶为原料,通过提取、除杂获得花青素粗提物,再通过柱层析和薄层层析分离获得一种花青素,采用紫外-可见光谱法对其结构进行鉴定。[结果]花青素粗提物在465～550 nm波长范围内有花青素特有的吸收峰,可以初步确定花青素粗提物中含有花青素。花青素粗提物在浓盐酸中显粉红色,且其在KI·I_2试剂的作用下不产生棕色沉淀,表明花青素主要存在于花青素粗提物中,而且其中不含有咖啡碱。显色鉴定结果表明,柱层析出的F8含有花青素。显色和紫外-可见光谱法的鉴定结果表明,薄层层析出的C2为花青素组分。以紫芽茶为原料,采用乙醇水溶液提取花青素,并通过石油醚脱脂,三氯甲烷、乙酸乙酯除杂获得花青素粗提物,所得花青素产率为6.44%。[结论]该研究对茶树资源的开发利用具有重要意义。     

循环高速逆流色谱从银杏叶提取物中制备异鼠李素和山奈酚

为研究分离异鼠李素和山奈酚的方法,制备两者纯品.银杏叶经乙醇提取、氯仿苹取、D101大孔吸附树脂纯化后得到银杏黄酮粗提物,粗提物再经循环高速逆流色谱(循环HSCCC)分离结构类似的异鼠李素和山奈酚,溶剂体系为正已烷:乙酸乙酯:甲醇:水(5:5:5:5).结果表明:粗提取经循环HSCCC循环3次后,异鼠李素和山奈酚达到很好的分离,得到了两者的单体,纯度均在97%以上.     

凝集素亲和层析技术分离金花茶多糖的研究

以蓖麻凝集素（RCA）为亲和配体制备亲和层析树脂,在比较2种固定载体制备亲和树脂对金花茶多糖分离效果的基础上,探讨了多糖上样量、NaCl浓度以及洗涤量对RCA-Sepharose-2B亲和树脂结合率或再生效果的影响,并采用高效液相色谱（HPLC）对亲和多糖进行分离效果分析,为将亲和层析技术应用于金花茶活性多糖的分离纯化提供科学依据。研究结果显示,相比AF-Amino-650 m树脂,RCA-Sepharose 2B亲和树脂的分离效果比较好,而且可以进行反复使用多次。多糖上样量显著影响多糖与树脂的亲和效果,多糖结合率随上样量增加呈倒U型变化,当多糖上样量为10.4 mg/g亲和层析树脂时,其亲合率最高,达到57%左右;NaCl浓度对树脂的再生效果也有显著影响,用含0.2 mol/L NaCl的磷酸缓冲液洗涤树脂可以有效恢复树脂对多糖的亲和效果。HPLC分析结果显示分离获得的亲和活性多糖是由3种不同分子量的多糖组分组成。     

新疆芜菁多糖降血糖作用的研究

[目的]检测新疆芜菁多糖的组分结构与对血糖的作用.[方法]采用常规的水提法从芜菁中提取粗多糖,并用Sevag法对其进行脱蛋白,再通过回流、透析等步骤把粗多糖纯化获得芜菁精制多糖.用芜菁精制多糖进行小白鼠血糖实验.对芜菁精制多糖进行DEAE-52离子交换柱层析纯化,对第一个洗脱组分BRPS1再进行Sephadex G-200凝胶柱层析纯度鉴定.此外,用红外光谱法分析BRPS1,并且对离子交换柱层析的7种洗脱组分分别进行了GC-MS分析.[结果]当芜菁精制多糖剂量为400 mg/kg体重时,3 d后的受试小鼠血糖值下降差异显著(P<0.05);6和9 d后的血糖值下降差异极显著(分别是P<0.01和P<0.001);通过DEAE-52离子交换柱层析共分离出7种组分.对第一个洗脱组分BRPSl的Sephadex G-200凝胶柱层析的结果表明,BRPS1是单一的多糖组分;其红外图谱结果表明BRPS1具有多糖的一般结构.对7种洗脱组分的GC-MS分析表明芜菁精制多糖含有6种单糖.[结论]芜菁多糖具有显著的降血糖效果;作为芜菁多糖主要成分的BRPS1为单纯的多糖,具有多糖的一般结构.     

红稗多糖的分离纯化工艺

为研究红稗粗多糖不同的脱蛋白工艺,并确定DEAE-52纤维素交换层析柱纯化分离红稗多糖的最优条件。用Sephadex G-100柱层析分离纯化得到的红稗多糖并采用柱前衍生化高效液相色谱法对纯化后的红稗精多糖的单糖组成种类进行测定。结果表明:红稗粗多糖的最佳上样浓度为5 mg/mL,洗脱速度0.5mL/min,上样体积25mL;采用Sevage法除蛋白3次,得到的蛋白清除率以及多糖保存率均较高,通过DEAE-52纤维素的柱层析分离纯化后可得到大组份多糖;再由Sephadex G-100柱层析分离纯化得到的大组份红稗中性多糖;再利用柱前衍生化高效液相色谱法(HCLP)测定分离纯化后的红稗多糖主要由L-鼠李糖(rhamnose,Rham)、D-葡萄糖醛酸(glucuronic acid,Glu)和葡萄糖(glucose,Glc)3种单糖组成。     

无梗五加果实多糖抗氧化活性研究

【目的]评价无梗五加的抗氧化性能。[方法]以无梗五加果实为原料,采用水提醇沉工艺提取其中的多糖,用DEAE-cellulose52柱层析对多糖进行分离纯化;高温诱导猪油氧化,应用碘量法研究多糖对油脂的抗氧化作用;应用化学发光法研究多糖各组分对O2-和·OH的清除能力。[结果]无梗五加精多糖ASP对猪油具有明显的抗氧化作用,且其抗氧化效果随多糖添加量的增加而增强;各多糖组分对O2-·和·OH均具有较强的清除能力,且该清除作用存在明显的量效关系。[结论]无梗五加多糖具有明显的抗油脂氧化的作用。     

香菇·平菇·金针菇多糖提取技术研究

以子实体及菌丝体为试材对香菇、平菇及金针菇进行多糖提取技术研究。子实体按照粗品制备、半精品纯化、胃蛋白酶解3个步骤提取多糖。100g香菇、平菇及金针菇子实体中纯多糖平均提取量分别为15.0、7.8和26.6mg,并用咔唑反应、纸层析法对其进行鉴定。50g香菇、金针菇菌丝中多糖的平均提取量分别为15.2和20.4mg。对2个品种多糖提取率进行比较,结果表明:菌种液体培养提取多糖产量大且以金针菇最佳。采用子实体及液体培养菌丝提取多糖方法是有效的,且菌丝液体培养提取多糖产量高于子实体提取多糖产量。     

香菇子实体蛋白多糖Le-Ⅲ的分离、纯化及其性质研究

香菇子实体经热水提取,乙醇沉淀,脱蛋白,ＤＥＡＥ纤维素柱及纤维素凝胶柱层析得到淡黄色纤维状疏松固体Ｌｅ－Ⅲ,Ｌｅ－Ⅲ经聚丙烯酰胺凝胶电泳和Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＣＬ－６Ｂ柱层分析,证明了分子量分布均一的多糖－蛋白质复合物。Ｌｅ－Ⅲ红外扫描有典型的多糖吸收峰,气相色谱测单糖组成为阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖,摩尔比０．３１：０．４７：１．００：１．１５：８．９２。     

铁皮石斛对灵芝多糖深层发酵的影响

[目的]研究铁皮石斛对灵芝生长及胞外多糖分泌的影响,并分析灵芝多糖组分的变化。[方法]在发酵培养基中添加不同量的铁皮石斛,分析灵芝生物量和胞外多糖含量的变化,并采用KTA explorer柱层析分析多糖组分。[结果]铁皮石斛可促进灵芝胞外多糖的合成,添加量以10 g/L效果最佳;添加铁皮石斛发酵未改变灵芝多糖的组分。[结论]在灵芝深层发酵培养基中添加适量铁皮石斛有助于灵芝多糖的高效生产。     

碱提红景天中的多糖及抗氧化性研究

[目的]进一步开发利用大花红景天中的多糖。[方法]大花红景天经乙醇脱脂、水提、碱提后,用盐酸中和,乙醇沉淀得粗多糖,经柱色谱纯化得白色红景天多糖,对其进行抗氧化性试验和羟自由基、超氧阴离子自由基的清除试验。[结果]经验证,提取到的多糖不含单糖,为均一多糖。该多糖对猪油有一定的抗氧化作用,对其他油脂也应有一定的抗氧化性作用。羟自由基清除率为50%时,多糖、苯甲酸、甘露醇的浓度分别为208、1751、48μg/ml。超氧阴离子自由基清除率为50%时,多糖和抗坏血酸的浓度分别为1801、18μg/ml。[结论]碱提大花红景天获得的多糖具有较好的抗氧化能力,对超氧阴离子自由基和羟自由基均具有一定的消除作用。     

海带硫酸多糖的分离纯化及性质研究

[目的]研究海带硫酸多糖的纯化方法、理化性质和生物学活性。[方法]海带粗多糖经离子交换纤维素分离纯化;采用硫酸酚法、比浊法、HPLC法分别研究多糖含量、硫酸根含量和分子量等理化性质;采用促小鼠脾淋巴细胞增殖试验研究其提高免疫功能的作用。[结果]得到3种纯化的海带硫酸多糖,LPS-1、LPS-2、LPS-3,对其中LPS-3的理化性质检测表明,其糖含量为36.90%,硫酸基含量为11.91%,分子量2.69×10^6D。LPS-3能明显促进小鼠脾淋巴细胞增殖,具有有丝分裂原样作用,对地塞米松引起的小鼠脾淋巴细胞增殖抑制具有显著的拮抗作用,但LPS-3不具有协同有丝分裂原ConA的作用。[结论]该分离方法可得到3种纯化的海带硫酸多糖,其中LPS-3具有显著提高免疫活性的作用。