应用PCR检测猪氟烷基因的研究

应用PCR－RFLP技术对云南省原种猪场核心群中88头引进外种猪（长白31头，大白59头）进行了氟烷基因的检测，结果检出9头杂合子，未发现阳性猪（nn）。研究表明：（1）长白猪群中不存在氟烷基因；（2）大白群中有9头杂合子且呈现全同胸或父系半同胞；（3）用猪毛进行氟烷基因检测具有方便、减少应激、准确性高等特点。     

杜洛克猪及新姜曲海基础母本氟烷基因的检测

猪应激综合征 (Ｐｏｒｃｉｎｅｓｔｒｅｓｓｓｙｎｄｒｏｍｅ,ＰＳＳ)是ＰＳＥ或ＤＦＤ肉的直接原因。控制ＰＳＳ的基因称为氟烷基因 (Ｈａｌｏｔｈａｎｅ)。进一步研究表明猪兰尼啶受体(Ｒｙａｎｏｄｉｎｅｒｅｃｅｐｔｏｒ,ＲＹＲ1)基因突变是导致ＰＳＳ的主要原因。ＲＹＲ1基因的Ｃ183 4 →Ｔ ,使受体蛋白Ａｒｇ615→Ｃｙｓ,从而引起其结构和功能的改变 ,这种改变导致了应激状态下Ｃａ2 大量非正常释放 ,激活过量肌糖元酵解 ,引起ＰＳＥ肉。未突变的纯合子ＨａｌＮＮ 以及杂合子ＨａｌＮｎ个体抗应激能力强 ,突变的纯合子Ｈａｌｎｎ对…     

引进种猪氟烷敏感基因检测结果报告

猪氟烷敏感基因 (ＨａｌｏｔｈａｎｅｇｅｎｅＨａｌ)的隐性纯合子 (Ｈａｌｎｎ)是猪产生应激综合症 (ＰＳＳ)和ＰＳＥ肉的主基因。现代分子生物学研究的进展 ,采用ＰＣＲ技术 ,已能快速、准确地鉴别猪的氟烷基因型。该技术在猪的育种上的应用正在广泛展开 ,近期已有不少报告。     

猪氟烷及其标记基因的研究动态

本文就影响猪肉质的氟烷及其标记基因的测定方法、取得成绩、最新研究动态作了简要介绍,并提出对其开发利用的建议.     

通过猪毛检测丹麦长白猪氟烷基因的变异

采集５６头丹麦长白猪（其中１头为１周龄的仔猪，２６头种公猪，２９头种母猪）猪毛样品，粗提ＤＮＡ，进行ＰＣＲ扩增，得到６５９ｈｐ在氟烷基因中（即兰尼定受体基因）中第１８４３个碱基的异片段，经过ＨｈａＩ酶切和电泳来检测氟烷基的变异，即其基因型，结果表明，（１）５６头长白猪中，阳性猪（ｎ／ｎ）１头占１．７９％，杂合子猪（Ｎ／ｎ）为１８头，占３２．１４％，阴性猪（Ｎ／Ｎ）为３７头，占６６．０７％杂合子数实     

猪氟烷基因的研究进展

猪应激综合征(PSS)是产生PSE和DFD肉的主要原因,控制PSS的基因称为氟烷基因(Ha1)或兰尼受体基因(RYR1)。本文综述了猪氟烷基因的研究进展。相关的研究表明,氟烷基因杂合子猪具有较高的生长速度、瘦肉率及较好的肉品质、高的繁殖性能。总体而言,完全清除猪氟烷基因对畜牧业是不利的。     

皮特兰猪的氟烷基因检测与分子选育

以PCR-RFLPs法为检测方法,针对氟烷基因开展无应激皮特兰猪的分子选育,共检测从2003-2007年若干世代共28批次皮特兰猪。结果显示,在所检测的共994头样本中,具NN基因型的为361头,具Nn基因型的为374头,具nn基因型的为259头。试验结果表明,随着世代选育的进展,群体中N基因和NN基因型的频率逐渐升高,至第17批次时均达100%,后均维持在较高水平,Hard-Weinberg平衡亦呈现平衡-不平衡-平衡的现象,直至此基因最终在群体中失去平衡。试验结果还表明,利用基因技术对家畜进行分子育种是可行的。     

猪氟烷基因的研究进展

本文综述了猪氟烷基因的研究进展.相关的研究表明,氟烷基因杂合子猪具有较高的生长速度、瘦肉率及较好的肉品质、高的繁殖性能.总体而言,完全清除猪氟烷基因对畜牧业是不利的.     

山西地区6个猪种氟烷敏感基因的检测

采用PCR-RFLP技术对大白猪、长白猪、杜洛克猪、山西白猪、山西黑猪和马身猪等6个品种（系）482头猪进行了氟烷敏感（Hal）基因检测。结果表明,在山西黑猪和马身猪中,只检测到氟烷敏感阴性纯合子（NN）;而在长白猪、大白猪、杜洛克猪和山西白猪群体中,均检测到NN、Nn两种类型的个体,Haln的基因频率分别4.1%、1.8%、1.4%和1.7%。在今后的育种工作中,应加强对氟烷敏感基因的检测,选育抗应激群体。     

猪氟烷基因的RFLP技术检测及其对繁殖性能的影响

试验通过PCR-RFLP技术,利用HhaI内切酶检测261头大白猪、265头长白猪、140头杜洛克猪和40头福建槐猪氟烷隐性等位基因(Haln)的携带情况.结果被检测所有猪的基因型均为NN,未出现Nn和nn基因型,表明外来品种猪群中已很少存在携带隐性等位基因的个体.这为种畜的选择提供了信息,并为槐猪品种资源保护及合理开发利用提供理论依据.     

互助猪合成母系氟烷基因的鉴别

通过对互助猪合成母系白系的36头猪采血样，DNA提取，PCR扩增，产物电泳及产物酶基因型进行判定。结果表明，采用PCR酶切技术能快速，准确地从DNA水平上鉴别氟烷基因型，并且鉴别互助猪母系的氟烷基因型基本上属于氟烷敏感基因隐型。     

氟烷敏感基因在海南地方猪中的检测分析

猪氟烷基因（Halothane,HAL）又被称为氟烷敏感基因或兰尼定受体基因,是控制猪应激综合征（porcine stress syndrome, PSS）的一个主效基因[1]。PSS是一种遗传缺陷病,主要是由猪兰尼定受体基因突变造成的。该基因位于猪6号染色体上,当其cDNA中第1843个碱基由C突变为T时,会使受体蛋白第615位的精氨酸突变为半胱氨酸[2]。兰尼定受体是骨骼肌细胞内肌浆网上控制钙离子进出肌纤维的通道,应激敏感猪的基因突变改变了兰尼定受体结构,使该通道失常,表现出通道的关闭及泵的作用受到抑制。当受到某些环境因素刺激后,会造成大量钙离子析出,引起电解质代谢紊乱,析出的钙离子会激活过量的糖原酵解,引起肌肉pH的异常变化,从而产生劣质肉。     

辽宁省部分地区种猪氟烷基因检测统计与分析

为消灭种猪氟烷敏感基因,减少其对养猪业的危害,降低劣质肉造成的经济损失,本文对2011~2013年辽宁部分地区种猪氟烷敏感基因进行检测。本试验采用PCR-RFLP法,共检测样品14 392个,检测出的阳性种猪1 518全部淘汰。经统计,长白、大白、杜洛克氟烷基因阳性率分别为9.11%、10.15%、10.78%,其中种公猪氟烷基因阳性率分别为13.62%、11.19%、12.61%,种公猪的阳性率都比大群猪的氟烷基因阳性率高。     

猪氟烷基因的检测及其对生长与肉质的影响

对中国瘦肉猪新品系ＤＩ和ＳＪ系３０１头仔猪进行氟烷测验,阳性率为１．３３％。随机抽取氟烷阴性猪３４头进行基因型检测,有６头为杂合子,由此推知ＮＮ、Ｎｎ和ｎｎ的频率分别为８１．２６％１７．４１％和１．３３％,Ｎ和ｎ的频率分别为８９．９７和１０．０３％。对三种基因型的肉质进行评定结果显示,４头氟烷阳性猪（ｎｎ）肉质最差,出现３头严重ＰＳＥ肉和一头轻度ＰＳＥ肉,而氟烷阴性猪未发生ＰＳＥ肉。２８头ＳＪ系氟烷阴性猪用阳性公猪测交,对产出的２０窝２０８头后代进行氟烷测定,共检出４窝中的２１头阳性猪,对测交后代进行肥育性能和肉质测定,结果阳性猪的日增重和饲料转化率等较低,屠宰率、眼肌面积和瘦肉率等较高,肉质较差。     

规模化猪场Hal、H—FABP、ESR基因检测

随着中国畜牧业发展,越来越多的企业引进了外种猪,为了保证外种猪的肉质和繁殖性能的遗传品质,需要对猪群进行Hal（氟烷基因）、H—FABP（猪心肌脂肪结合蛋白基因）、ESR（雌激素受体基因）的检测。本试验利用稳定性良好的PCR—RFLP技术对重庆某规模化猪场引进的12l头加拿大SPF纯种猪纯繁后代的耳组织样品进行基因检测。结果显示,Haln基因携带者11头;H—FABP基因在HinfⅠ、MspⅠ、HaeⅢ位点上都存在多态性,具有优势基因型的猪分别有22、33、21头;ESR基因bb、Bb、BB型猪只分别有0、89、32头。表明该地区的猪氟烷基因突变率较高,在肉品质和繁殖力方面有待加强选育提高。     

互助猪合成母系氟烷基因的鉴别

通过对互助猪合成母系白系的36头猪采血样、DNA提取、PCR扩增、产物电泳及产物酶基因型进行判定.结果表明,采用PCR酶切技术能快速、准确地从DNA水平上鉴别氟烷基因型,并且鉴别互助猪母系的氟烷基因型基本上属于氟烷敏感基因隐型.     

三江白猪氟烷基因的基因频率分析

本试验随机抽取216头30日龄左右的三江白猪,从外周血液中提取基因组DNA,经纯化后应用所设计的引物进行PCR扩增,酶切鉴定后分析三江白猪氟烷基因(RYR1)的基因与基因型频率。结果表明:PCR反应条件优化后,扩增出659 bp的特异性基因片段,经HhaⅠ和HgiAⅠ两种内切酶消化后,发现三江白猪T/T(Haln/Haln)基因型频率为4.16%;C/C(HalN/HalN)型为88.43%;C/T(HalN/Haln)型为7.41%。HalN基因频率为92.13%,Haln基因频率为7.87%。此结果表明,三江白猪中氟烷敏感基因频率和基因型频率均较低,可以通过标记辅助选择方法很快予以剔除。     

新疆北疆地区某规模化猪场主要传染病抗体检测与分析

为了解新疆北疆地区某规模化猪场几种主要传染病的抗体水平,便于及时发现猪场潜在的疾病风险。本试验采用间接酶联免疫吸附试验（ELISA）方法对某规模化猪场各阶段猪群进行猪瘟病毒（CSFV）抗体、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒（PRRSV）抗体、猪圆环病毒2型（PCV2）抗体、猪O型口蹄疫病毒（FMDV-O）抗体,及猪伪狂犬病病毒（PRV）gB与gE蛋白抗体进行检测。试验结果表明,该场的CSFV、PRRSV、PCV-2、FMDV-O、PRV-gB蛋白、PRV-gE蛋白的平均抗体阳性率分别为83.57%、90.56%、90.29%、71.86%、82.84%、18.29%;不同类别猪群间抗体水平参差不齐,种猪群的PRRSV抗体阳性率仅为52.63%,保育猪群的CSFV抗体阳性率仅为44.12%,育肥猪群的PRV-gB抗体阳性率为30.00%,种公猪的PRV-gE抗体阳性率为30.00%,育肥猪群的FMDV-O抗体阳性率为6.25%,基于以上试验结果,为该场免疫程序的制定和优化提供参考依据,以期达到有效控制及逐渐净化疫病的目的。     

猪的氟烷基因和连锁标记基因蝉倍型推断

实验猪群由从ＥＳ特殊实验群和湖北白猪Ⅳ系选出的７头公猪、１４头母猪及其生产的１９窝１３６头仔猪组成。利用子代的氟烷测验结果和连锁标记位点的表型（ＰＨＩ、ＰＯ２、ＰＧＤ）推断了５头公猪、１０头母猪及其１５窝１０９头仔猪的氟烷和连锁标记基因的单倍型，并推断了其余４窝３７头仔猪亲代和子代的标记基因单倍型。结果发现，只有以家系为单位，在顺亲本一方为ＨＡＬ个体或是Ｈａｌ携带者，或者子代中有ＨＡＬ阳性个体条件     

猪氟烷及其标记基因与经济性状的相关研究

本文分析了猪氟烷及其标记基因与经济性状的相关。结果表明:Hal的Nn型肉质性状显著差于NN型,日增重高于NN型。PHI和6PGD的AA型肉质性状最好,BB型最差,但生长最快,PHI和AB型、6PGD的AA型生长最慢。H血型系统的a/b型日增重显著高于a/a、a/-和-/-两种基因型,但肉质性状最差。PHI~A、6PGD~A和PHI~APGD~A对肉质性状分别具加性或联合加性效益。Hal~N、H~a对肉质性状具加性和减性效应的趋势。60日龄时CPK酶活性与肌肉失水率呈极显著正相关。90千克时CPK酶活性与日增重、肉色评分呈极显著负相关,CHO的含量与肌肉粗脂肪含量呈板显著负相关,LDH酶活性与肉质性状相关不显著。本研究表明Hal、H、PHI、6PGD、CPK、CHO可作为经济性状的遗传标记。