天然丝胶蛋白及其酶解产物抑制酪氨酸酶活性研究

丝胶蛋白是一种拥有多种特殊功能的蛋白质,在化妆品、保健食品及医用材料等领域都具有重要的应用价值。本研究从全天然丝胶茧中提取丝胶蛋白,采用多种蛋白酶进行酶解,选取最佳蛋白酶;测定丝胶蛋白及其酶解产物的溶解性,分析其对酪氨酸酶活性的抑制作用。结果表明:丝胶蛋白经木瓜蛋白酶酶解后产物的分子量集中分布在14~29kDa,溶解性增强;丝胶蛋白及其酶解产物均能够抑制酪氨酸酶的活性,尤以分子量较小的酶解产物抑制能力较强;抑制能力与样品的质量分数呈明显的量效关系。     

丝胶蛋白液的护肤功能及应用研究

利用丝胶蛋白护肤功能,研制成抗菌抑菌、对人体皮肤起保护作用的“天然丝胶护肤乳”。经检验,产品符合企业标准和卫生部《化妆品卫生规范》(2002)的规定。本文简要介绍了丝胶蛋白护肤功能和“天然丝胶护肤乳”的研制过程。     

利用家蚕杆状病毒Bac-to-Bac系统表达大肠杆菌L-天冬酰胺酶Ⅱ

L-天冬酰胺酶（L-asparaginase,L-ASP）可以通过降解L-天冬酰胺从而抑制肿瘤细胞中蛋白质的正常合成,导致肿瘤细胞的死亡。通过杆状病毒的Bac-to-Bac方法,将大肠杆菌的asp基因在家蚕杆状病毒中表达,其活性较原核表达有明显提高,达到2800μ/mg。为利用家蚕生物反应器生产该蛋白提供了依据。     

丝胶蛋白滋养润白保湿面膜的毒理学试验结果

本品以丝胶蛋白为主要配料,经特殊工艺提取处理和配制,研制成功产品丝胶蛋白滋养润白保湿面膜。依据卫生部《化妆品卫生规范》(2007),对它进行了毒理学试验。本文简要介绍了丝胶蛋白滋养润白保湿面膜的毒理学试验检测结果。     

家蚕BmNPV多角体蛋白与大肠杆菌L-天冬酰胺酶Ⅱ的融合表达

L-天冬酰胺酶是一种重要的蛋白类抗肿瘤药物,可通过降解L-天冬酰胺从而抑制肿瘤细胞中蛋白质的正常合成,导致肿瘤细胞的死亡.通过基因融合的方法,将大肠杆菌的asp基因在家蚕杆状病毒中表达,其活性进一步提高到5 940U/mg,为利用家蚕生物反应器生产该蛋白打下了基础.     

茧层丝胶蛋白组成与蚕茧解舒的关系

丝胶蛋白的结构直接影响蚕茧解舒的优劣。丝胶突变系B84具有优良的蚕茧解舒性状,其茧层中含有特殊的Sericin2蛋白。本研究分析了3种主要丝胶蛋白的疏水性与二级结构,比较后发现,相比其他2种普遍存在于茧层的丝胶蛋白,Sericin2蛋白的亲水性更强、β片层结构含量更低,是B84蚕茧具有优良解舒性状的原因。     

彩色蚕茧与白色蚕茧中丝胶蛋白抗氧化能力的比较研究

以几种颜色不相同的彩色蚕茧和普通白色蚕茧为原料,采用高温水煮提取各种样茧的丝胶蛋白,并以无水乙醇纯化。通过测定丝胶蛋白清除自由基的能力,判定丝胶蛋白是否具有抗氧化能力,同时比较彩色蚕茧和普通白色蚕茧丝胶蛋白抗氧化能力的大小。结果表明,彩色蚕茧与白色蚕茧丝胶蛋白均具有较强抗氧化能力,且差异不显著。     

酶固定化技术的应用

固定化酶便于运输和贮存,有利于自动化生产,是近年发展起来的酶应用技术。介绍了酶固定化技术的应用,包括传统酶固定化技术的应用、利用不同载体材料的酶固定化技术的应用、利用不同载体材料改性后的酶固定化技术的应用以及新型酶固定化技术的应用。     

丝素—壳聚糖合金膜固定化SOD酶学性质研究

超氧化物歧化酶(SOD)是一种在生物体内广泛存在的金属酶,它以自由基O2-为底物催化与H+的反应生成H2O2和O2,H2O2再在过氧化氢酶、过氧化物酶和谷胱甘肽过氧化物酶等的作用下转变为H2O,从而对机体起保护作用,具有抗辐射、抗炎和抗衰老等功能;壳聚糖和丝素这两种高分子物质都可以作为固定化酶的载体,但单独使用效果不很理想.单纯丝素膜机械性能差,且当溶液pH大于其等电点时带负电,不利于与荷电负性酶结合.而壳聚糖膜中分子链间由于氢键作用强,游离氨基并不多.     

丝胶的分子结构与胶粘强度的相关研究

通过仪器分析和数理统计表明 ,丝胶的胶粘特性依存于分子结构的变化 ,丝胶的胶粘强度与丝胶分子 β结构比率 ( % )的变化呈“S”型曲线 ,其关系式为 :　　y[丝胶分子　β结构比率 ( % ) ]=59 701 +4 0 0 2e- 0 0 0 1X[胶粘强度 (N/mm2 ) ] 。     

丝胶效用的研究进展

论述了丝胶在制作高性能生物材料、抗氧化作用、培养细胞促进作用、冷冻保护作用等方面的研究进展情况,并探讨了其应用前景.     

高丝胶蛋白含量家蚕品种资源库的构建及应用

利用杂交育种、丝胶蛋白含量跟踪检测等方法,构建了能分泌白色、绿色、黄色、橘红色丝胶蛋白的18个品种组成的资源库,其丝胶蛋白含量位于93.92～100%,为制备纯天然、不变性的高品质丝胶蛋白及其在化妆品、医药、食品和纤维改性材料等领域的利用提供高品质原料。     

家蚕丝素固定化糖化酶的研究

茧丝经高浓度的氯化钙溶液处理或用稀碱溶液处理后,制成了粉末状丝素和碱化丝素,并以此为载体,用戊二醛为交联剂固定了糖化酶。经对固定化酶性质和动力学参数等的研究表明：丝素能较好地固定糖化酶;每克干粉末状丝素固定化酶的活力约为１８２２ Ｕ, 固定化酶的最适ｐ Ｈ 值比游离酶增加了１０ 到１２５ 个单位,最适温度比游离酶降低了５ ～１０ ℃;固定化酶具有较长的操作半衰期（１４ ～１８ｄ） ;通过米氏常数的测定,粉末状丝素固定化酶的 Ｋｍ １ ＝ ２ ．５３ ×１０ －５ , 碱化丝素固定化酶的 Ｋｍ ２ ＝３１５ ×１０ － ５ 。实验还发现： 在制备 固定化糖化 酶时, 酶的最适 浓度为 ８ ｍ Ｌ／ Ｌ,戊 二醛的 最适浓 度为０３ ％ 。     

家蚕丝胶基因研究概况

丝胶是茧丝的重要组成部分,起着胶粘和保护丝素的作用,同时在很多领域有着潜在应用。编码丝胶蛋白的主要有3个丝胶基因Ser1、Ser2和Ser3,都是在中部丝腺中被特异表达。Ser1基因的启动子上游存在3个转录调控位点:SA、SB和SC,转录因子SGF-1和SGF-3分别与SA和SB、SC结合对Ser1基因的表达进行调控。Ser1只在中部丝腺后部的150个细胞中表达,Ser2在5龄起始的时候在所有的中部丝腺细胞中都有表达,后来只在中部丝腺前部表达,而Ser3只存在于中部丝腺中前部。本文从分子生物学角度出发,概述丝胶基因的研究进展以及存在的问题。     

家蚕丝素固定化葡萄糖异构酶的制备方法及其理化性质

脱胶蚕丝用稀碱溶液处理后制成多孔的碱化丝素 ,分别经物理吸附和戊二醛交联方法制得固定化酶Ⅰ和Ⅱ。每克固定化酶Ⅰ的总活力为 791 0 4U ,活力回收率为 5 2 0 6 % ,活力表现率为 72 2 7% ;每克固定化酶Ⅱ的总活力为 811 39U ,活力回收率为 5 3 6 7% ,活力表现率为 72 97%。蚕丝经高浓度氯化钙溶液溶解、脱盐等处理后制成丝素粉末 ,经吸附后用戊二醛交联固定了葡萄糖异构酶 ,制成固定化酶Ⅲ。每克固定化酶Ⅲ的总活力为 84 4U ,活力回收率为 5 5 2 7% ,活力表现率为 72 4 2 %。经对固定化酶性质的研究表明 :碱化丝素和丝素粉末均能较好地固定葡萄糖异构酶 ;最适温度比游离酶升高了 15℃ ;最适pH没有变化 ,有较强的抗蛋白质变性剂 (8mol/L尿素溶液中的活力在 80 %以上 )能力 ;各固定化酶的Km值在 4× 10 -2 ～ 5× 10 -2 mol/L范围内。实验还发现Co2 + 和Mg2 +离子为固定化酶的激活剂 ,Fe3 + 和Ca2 + 离子为抑制剂。     

家蚕丝素固定化链霉菌的生物化学特性

脱胶蚕丝经不同处理制得多孔碱化丝素和丝素粉末 ,采用吸附和戊二醛交联法将链霉菌 (StreptomycesflavovirensA8)固定 ,制得不同的固定化链霉菌 (Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ )。实验结果表明 :其固定化链霉菌Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ的米氏常数分别为Km1=2 4 0 73× 10 -2 mol/L ,Km2 =2 5 36× 10 -2 mol/L ,Km3 =2 772 3× 10 -2 mol/L ,而游离链霉菌的Kmf 为2 3715× 10 -2 mol/L ;固定化链霉菌Ⅰ的酶活力半衰期在 6 4d以上 ,固定化链霉菌Ⅱ和Ⅲ的半衰期最长达 6 8d ;固定化链霉菌对尿素有较强的抵抗能力 ;Co2 + 、Mg2 + 对链霉菌葡萄糖异构酶有激活作用 ,而Fe3 + 和Ca2 + 是葡萄糖异构酶的抑制剂。     

蚕丝纤维组成的研究

综述了近年来蚕丝纤维组成研究的进展。从蚕丝分子生物化学学的角度，阐述了蚕丝纤维的化学组成。丝胶蛋白的分子生物学结构，蚕丝主成份丝素的H链、L链和P25糖蛋白的基因和蛋白质的结构特性及其组成的基本单位。     

Sericin Accelerates the Production of Hyaluronan and Decreases the Incidence of Polyspermy Fertilization in Bovine Oocytes During In Vitro Maturation

Fetal bovine serum (FBS) has been widely used as a supplement in the maturation medium of bovine oocytes in vitro. However, serum contains many undefined factors and is potentially infectious to humans and animals. As a serum replacement, we evaluated the feasibility of using the silk protein, sericin, derived from the cocoons of silkworm. To examine the rates of oocyte maturation and fertilization, cumulus-oocyte complexes were cultured in TCM-199 supplemented with 0.01%, 0.05%, 0.1% or 0.15% sericin or 5% FBS. The sizes of the perivitelline space that might relate to polyspermy, the expressions of Has2 and CD44 mRNA, the amount of hyaluronan (hyaluronic acid: HA) contained in the oocytes and the rates of blastocyst formation following insemination were then compared between the oocytes cultured with 0.05% sericin and 5% FBS, because the polyspermy rates in oocytes cultured with 0.05% sericin were significantly lower than in those cultured with 5% FBS. After in vitro maturation (IVM), the mean size of the perivitelline space was significantly greater in oocytes cultured with sericin than in those cultured with FBS, although the rates of nuclear maturation, fertilization and blastocyst formation of oocytes under both IVM conditions were not significantly different. The expression of HAS2 and CD44 mRNA and the amount of HA in the denuded oocytes cultured with 0.05% sericin were significantly greater than in those cultured with FBS. These results indicate the feasibility of sericin as an alternative protein supplement for IVM in bovine oocytes.