禽流感血凝抑制试验的影响因素分析

血凝抑制试验是检测禽流感抗体效价的一种常用方法,具有简便、快速、灵敏、准确等特点,被区县级动物疫病预防控制中心化验室所广泛应用。但由于试验中不规范的操作和细节注意不够,从而导致不正确的检测结果,而影响试验的准确性。     

禽流感血凝抑制试验(HI)的影响因素分析

血凝抑制试验是检测禽流感抗体效价的一种常用方法,具有简便、快速、灵敏、准确等特点,被区县级动物疫病预防控制中心化验室所广泛应用。但由于试验中不规范的操作和细节注意不够,从而导致不正确的检测结果,而影响试验的准确性。     

金昌市金川区规模养殖场主要疫病抗体监测分析

采用正向间接血凝试验、血凝抑制试验方法检测了金川区10家规模养殖场442份血清4种疫病抗体水平。检测结果显示:口蹄疫、猪瘟、高致病性禽流感、新城疫抗体合格率分别为88.53%、80.00%、82.82%、79.14%,4种疫病免疫效果良好。     

2018—2022年四川省达州市兽医系统实验室检测能力比对分析

为科学评估达州市兽医系统各实验室的检测能力,2018—2022年达州市动物疫病预防控制中心组织辖区内7个县级兽医实验室开展检测能力比对工作。比对结果显示,2018—2022年达州市兽医系统实验室的总体检测结果准确率为95.18%,各年度平均正确率在85.71%～100%,总体准确率较高但稍显不稳定。达州市县级兽医实验室能较好掌握实验室常用检测方法,可满足非洲猪瘟等主要动物疫病检测需要,但不同区域实验室检测水平不一,血凝与血凝抑制试验（HA-HI）检测的准确率较低。建议当地县级兽医实验室以自身实际情况为基础,进行针对性的抓重点补短板强弱项行动,加强实验室建设,提升检测能力,为达州市动物疫病防控体系提供有力保障。     

影响血凝抑制试验的因素

<正>目前,县级动物防疫站常常做血凝试验和血凝抑制试验。笔者多年从事禽病的检测工作,经过反复操作,不断摸索,逐渐找出一些影响血凝抑制试验的因素。现将多年来总结的经验及试验中遇到的问题结合一些研究资料,总结分析如下。     

禽流感血凝和血凝抑制试验的质量控制

禽流感血凝—血凝抑制试验是目前我国各地动物卫生监督机构和养殖场监测禽流感疫苗抗体水平的常用试验方法。该方法具有操作简易、能同时进行大量样品分析、结果灵敏快速等特点,在疫病流行病学调查、抗体监测、免疫程序制定等方面发挥了重要作用。但该方法在操作中受较多的因素影响,容易造成试验结果出现偏差。现结合基层实验室具体情况,对该试验方法操作中的影响因素进行了归纳分析。     

鸵鸟新城疫病毒微量血凝抑制试验影响因素的研究

对鸵鸟新城疫病毒微量血凝抑制试验进行了研究,找到了影响该试验的主要因素,即被检血清中的非特异血凝抑制因子和凝集因子、稀释剂及其pH值、实验室温度、鸡红细胞的来源等。消除这些因素的影响,可明显提高这一试验的准确性。     

影响血凝和血凝抑制试验因素的浅析

血凝和血凝抑制试验是当前抗体监测的主要手段,该试验具有操作简单、批量分析、结果判定快速等优点,基层实验室、养殖场应用该试验检测禽流感、新城疫等疫病抗体效价具有重要的临床指导意义。但在实际操作中影响试验的因素很多。为提高试验的准确性,该文从待检样品采集处理和保存运输、试验器材、操作步骤、数值结果判定及其他因素进行归纳分析。     

血凝和血凝抑制试验中的常见问题及解决方法

血凝和血凝抑制试验是用于检测受检血清抗体的试验。血凝（直接血凝）反应（HA）：某些病毒或病毒的血凝素,能选择性地使某种或某几种动物的红细胞发生凝集。血凝抑制反应（HI）：当病毒的悬液中先加入特异性抗体,且这种抗体的量足以抑制病毒颗粒或其血凝素时,则红细胞表面的受体就不能再与病毒颗粒或其血凝素直接接触,这时红细胞的凝集现象就被抑制。     

新城疫病毒诱导黄粉虫抗病毒肽的效果分析

观察鸡新城疫病毒(NDV)诱导黄粉虫是否产生抗鸡新城疫病毒肽.先用鸡胚培养鸡新城疫病毒以扩增病毒,然后提取病毒液备用,接着用鸡新城疫病毒液接种刺伤黄粉虫幼虫,2～3天后提取黄粉虫体内的抗病毒物质,测定其血凝效价和鸡新城疫病毒诱导鸡胚发病抑制试验结果.结果表明黄粉虫抗病毒肽在血凝抑制试验中的效价为1:64;在鸡新城疫病毒诱导鸡胚发病抑制试验中有一定效果,但不明显.     

鸡新城疫的诊断及病理分析

[目的]对疑似鸡新城疫病例进行诊断,从而对防控该病提供依据。[方法]应用常规病理剖检技术解剖死亡鸡只,观察病理变化。病死鸡组织脏器研磨等处理后接种10日龄SPF鸡胚,取尿囊液进行平板血凝试验（HA）与平板凝集抑制试验（HI）。取病鸡肠道、腺胃、脑、十二指肠、肺脏等组织制作石蜡切片,HE染色,镜检。[结果]HA和HI结果显示,收集的尿囊液可凝集鸡红细胞,同时这种凝集作用又可被抗新城疫阳性血清抑制。病理剖检可见,各组织脏器有明显的出血性病变,实质细胞均出现不同程度的损伤。[结论]该分离毒株被确诊为鸡新城疫病毒。     

抗生素与新城疫疫苗联合应用对肉鸡抗体生成的影响

为探讨抗生素与新城疫I系疫苗联合使用对肉鸡抗体生成的影响,选取青霉素、链霉素、利高霉素和头孢噻呋分别与新城疫I系疫苗联合使用,测定各组疫苗稀释液的pH值,并对9日龄鸡胚接种,检测鸡胚尿囊液血凝(HA)效价。同时对20日龄的肉鸡进行肌肉注射免疫,并于免疫当日及免疫后第7、14、21、28 d采血,测定血清抗体血凝抑制效价(HI)。结果表明,各加药疫苗稀释液的pH值与生理盐水疫苗组对比差异极显著;各加药疫苗组的鸡胚HA效价、HI效价与生理盐水疫苗组对比均无无显著差异。研究表明,青霉素、链霉素、利高霉素和头孢噻呋与新城疫I系疫苗联合使用不会降低免疫效果,可以联合使用。     

鹅副粘病毒感染的诊断

[目的]为了确定江苏省某养鹅场2007年春季发生传染病的病因。[方法]从发病鹅群采集病料进行流行病学调查、病原分离鉴定、红血球凝集试验和红血球凝集抑制试验,通过交叉HI试验测定F2代分离株和Lasota毒株的HI效价,并用稀释的F2代感染鸡胚尿囊液分别感染鹅和SPF雏鸡,观察其发病和死亡情况。[结果]通过SPF鸡胚接种与传代从病、死鹅的脑、脾、胰混合病料分离到1株病毒。经HA和HI试验证明该分离株为禽I型副粘病毒。人工感染鸡和鹅试验表明该分离株对鸡和鹅都具有高致病性,同群混饲试验表明该分离株具有很强的传染性,属强毒型NDV。这进一步证实该病毒属禽副粘病毒的新成员,即鹅副粘病毒I型。[结论]该研究为NDV出现了某些新的致病特点以及其对鹅同样具有致病性提供了佐证。     

兔瘟快速诊断的试验研究

使用醛化人“O”型红细胞和白瓷板进行血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验诊断兔瘟,1～2分钟即可判定结果,反应时间比常规法缩短60倍。具有快速定性、定量检测的特点。同时该法特异、快速、简易、经济,是一种易于在基层推广应用的新方法。     

H1亚型猪流感病毒的分离鉴定

从山东、浙江、湖南、广西等地区各猪场采集30份疑似猪流感病猪的病料,通过鸡胚培养、血凝及血凝抑制试验、电镜观察、RT-PCR和测序分析进行了分离鉴定。结果从山东和湖南两地分离到4株有血凝活性的病毒,其中山东的2株病毒与新城疫病毒阳性血清的血凝抑制试验为阳性,通过电镜观察湖南的2株病毒具有猪流感病毒的特征,且与抗H1亚型猪流感病毒阳性血清的血凝抑制试验为阳性;根据H1亚型猪流感病毒HA基因设计引物,利用RT-PCR扩增出543bp片段,经序列分析证实该病毒为H1亚型猪流感病毒。     

流感病毒快速诊断试剂中HA抗原热稳定性的研究

[目的]筛选流感病毒HA抗原保护剂。[方法]将H3N2和H1N1亚型流感病毒分别加入A～F组中,在37℃下进行加速试验,并通过血凝试验测定HA滴度。[结果]在28 d A组(添加PBS缓冲液)中H3N2和H1N1亚型流感病毒的HA抗原血凝滴度分别为20和32。F组(添加BSA、岩藻糖、Proclin 300、Triton 100)HA抗原的热稳定性最好,在28 d H3N2和H1N1亚型流感病毒HA抗原血凝滴度分别为48和96。[结论]F组成分对流感病毒HA抗原的保护作用最好,可作为保护剂候选配方。     

3种检测方法在野鸟禽流感监测中的应用与比较

分别应用血凝抑制试验(HI)、反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)与病毒分离3种检测方法对260份野鸟样品开展禽流感检测。结果表明,用HI方法检出禽流感样品57份,阳性检出率为21.92%;RT-PCR方法没有检出禽流感样品,阳性检出率为0;病毒分离方法检出禽流感样品15份,阳性检出率为5.77%。     

15株NDV地方株的分离鉴定与生物学特性

从1998~2002年河南省洛阳地区代表性新城疫发病禽群中分离鉴定了15株新城疫病毒(NDV),并对其生物学特性进行了研究。结果表明,15株NDV均呈现良好的血凝活性和特异的血凝抑制特性;对鸡胚的致病作用可被新城疫阳性血清所抑制;对鸡胚最小致死量的平均死亡时间(MDT),1日龄雏鸡脑内接种的致病指数(ICPI)和6周龄鸡静脉内接种的致病指数(IVPI)的测定证实,LD-6-01和LR-2-00株是弱毒株,其余均为强毒株;弱毒株的血凝素热稳定性较好,属慢速血凝解脱型;强毒株的血凝素热稳定性差,属快速或中速血凝解脱型;所有毒株均可较好地凝集鸡和人(O型血)的红细胞,但对其他动物的红细胞凝集性差异较大。对HI抗体为6log2的12日龄雏鸡攻毒试验结果表明,15个分离株中2个弱毒株可得到100%保护;13个强毒株中,LG-1-99,LR-1-98,LD-4-01和LD-3-00得到了70%~90%的保护,而其他9个分离株(LD-1-98,LD-2-99,LD-5-01,LD-7-02,LR-3-02,LW-1-02,LG-2-00,LA-1-99和LE-1-01)基本上得不到保护(0~20%),但所有得不到保护的试验组鸡的发病死亡时间均明显向后推迟。     

兔病毒性出血症Dot-IGSS检测方法的建立

[目的]建立一种检测兔病毒性出血症IgG抗体的斑点免疫金银染色法（Dot—IGSS）。[方法]选择抗原包被浓度20μg/ml,被检血清稀释度1：160;鼠抗兔IgG稀释度1：200、金标羊抗鼠IgG稀释度1：20的工作条件,用所建立的Dot—IGSS与血凝抑制试验（HI）对96头份被检血清进行平行检测。[结果]Dot—IGSS和HI的检测阳性率分别为94％和31％。[结论]所建立的Dot—IGSS是一种灵敏、特异和稳定的血清学捡测方法,适用于兔病毒性出血症的诊断和抗体检测。     

不同调理剂对猪粪堆肥腐殖质特性及元素含量变化的影响

分别以木屑、泥炭及水葫芦作为猪粪堆肥的调理剂，制作有机堆肥，研究了3种堆肥体系在堆肥进程中腐殖酸（HA＋FA）及其组成、腐殖化指数（HI=HA／FA）、pH的变化过程，以及堆制前后1mol／L NH4Ac-0．05mol／L EDTA浸提态金属离子含量的变化。在此基础上讨论了HI、pH和阳离子交换量（CEC）之间的关系。结果表明，在整个堆肥制作中，HA＋FA和HA均呈现先下降后上升再稳中有降的趋现势，总体表现为增加；HI则上升明显，这些是堆肥腐熟和品质提高的重要表；pH变化因调理剂的不同而有较大的差异；除重金属Cr外，1mol／L NH4Ac-0．05mol／L EDTA浸提的绝大部分金属离子含量堆制后均有增加，3种堆肥增加幅度的顺序为：猪粪＋水葫芦〉猪粪＋木屑〉猪粪＋泥炭；堆制前后pH和HI的变化与堆制前后CEC变化分别呈较好的正相关和负相关，它们可以作为堆制前后交换态金属元素含量变化的指示指标。