鸡马立克氏病毒抗独特型抗体苗免疫效果观察

探讨MDV(Marek’s Disease Virus)抗独特型抗体(Ab2)模拟抗原诱导抗MDV感染的能力。将MDV抗独特型抗体分别与福氏完全佐剂和福氏不完全佐剂按1：1比例乳化制备成抗体苗．对1日龄，10日龄SPF鸡进行两次免疫，同时设火鸡疱疹病毒疫苗(HVT)和非免疫空白对照。30日龄后用马立克氏病毒(MDV)标准Ⅰ型强毒——京-1毒行腹腔攻击，在第30天，第60天，第120天采血，分别检测免疫系统一淋巴器官重量、循环血淋巴细胞数量、病理组织学变化、孵化率及免疫抑制性反应。MDV抗独特型抗体苗免疫攻毒后淋巴组织器官增重、器官未见淋巴细胞浸润．120d保护率为83．45％．未见大肠杆菌继发感染发生。HVT苗免疫攻毒后淋巴组织器官，淋巴细胞的数量下降、出现病理损伤，120d保护率为73．80％。MDV感染法氏囊、脾脏的重量及循环血中淋巴细胞的数量减少，大肠杆菌的敏感性增加。MDV抗独特型抗体能诱导机体产生抗MDV感染保护。     

布氏杆菌抗独特型抗体苗豚鼠免疫试验

用新研制的抗牛布氏杆菌独特型抗体苗(简称二抗苗)免疫豚鼠并于免疫后4个月进行强毒菌株攻击保护试验表明,3个不同免疫剂量组豚鼠平均保护率为79.1％,血清凝集试验结果表明,免疫豚鼠产生了一定滴度的凝集抗体,这证明该抗独特型抗体苗具有良好的免疫原性。     

布氏杆菌抗独特型抗体苗小白鼠免疫试验

用布氏杆菌抗独特型抗体苗(简称二抗苗)进行试验表明,免疫小白鼠酸性α-醋酸萘酯酶阳性T淋巴细胞(TANAE~+)数明显高于对照组(P<0.01),且比19号苗免疫组还高,证实此二抗苗确有增强细胞免疫功能的作用。     

抗独特型抗体在小分子农药、真菌毒素免疫检测中的应用

小分子农药、真菌毒素免疫分析技术的发展,存在难以实现多残留检测、标准品昂贵且不易获得和检测灵敏度受限制等制约因素,而抗独特型抗体技术可以为这些问题的解决提供新的思路。文章阐述了抗独特型抗体的基本原理,该技术在小分子食品污染物免疫分析技术中的应用及优势,国内外在此领域的研究进展,以及该技术存在的制约因素与发展前景。     

兔源IBD抗独特型抗体疫苗的制备及对鸡的初试

用纯化的抗ＩＢＤＶ抗体作为抗原免疫家兔,并分离制得效价较高（１：１６）的兔源ＩＢＤ抗独特型抗体,分别与氏安全和福氏不完全佐剂按１：１比例乳化制成抗ＩＢＤＶ独特型抗体疫苗,免疫接种普通迪卡公雏鸡和ＳＰＦ鸡,然后用ＩＢＤＶ强毒株攻毒,得到保护率分别为１００／１００,１００／１００,５０／５０和大群免疫接种应答为１００％的免疫保护效果。     

猪生长激素抗独特型抗体的制备及生物活性检测

【目的】以鼠肝细胞为模型,在细胞水平上研究猪生长激素抗独特型抗体的作用机制。【方法】以猪生长激素单克隆抗体1A5-F(ab′)2部分免疫BALB/c鼠,采用杂交瘤细胞技术制备猪生长激素抗独特型单克隆抗体。分离Wistar大鼠肝脏细胞,以其为模型,采用流式分析、激光共聚焦显微镜观察、Western-blot等技术手段,研究猪生长激素抗独特型单克隆抗体的生物活性。【结果】成功制备了3株猪生长激素抗独特型单克隆抗体,分别命名为CG1、CG2、CG3。其中,CG1阳性信号最强,经鉴定,CG1为Ab2β类抗独特型抗体,属于IgG2a亚类。CG1能够以二聚体的形式激活鼠肝细胞表面的生长激素受体,并可激活信号转导蛋白JAK2。【结论】CG1抗体可与鼠肝脏细胞表面的生长激素受体特异性地结合,并可磷酸化信号转导蛋白JAK2。     

嗜水气单胞菌HEC毒素单克隆抗独特型抗体研究

用嗜水气单胞菌ＨＥＣ毒素免疫Ｂａｌｂ／Ｃ小鼠，通过一次性杂交瘤融合，在筛选ＨＥＣ毒素单克隆抗体（ＭｃＡｂ１）的同时，用兔抗ＨＥＣ毒素血清（ＰＡｂ）包板的ＥＬＩＳＡ方法，筛选到两株抗ＨＥＣ毒素的单克隆抗独特型抗体（ＭｃＡｂ２）。两株ＭｃＡｂ２腹水ＥＬＩＳＡ效价分别为１：２０４８０和１：５１２０，属于ＩｇＧ１亚类。ＨＥＣ毒素的模拟抗原ＭｃＡｂ２不能溶解人的Ｏ型红细胞，但能与相应的ＰＡｂ反应，并能阻断ＰＡｂ与ＨＥＣ毒素的结合。将ＭｃＡｂ２连接到同源小鼠红细胞（ＭＲＢＣ）后免疫小鼠，用ＨＥＣ毒素包板的ＥＬＩＳＡ检测其血清，呈阳性结果，说明ＭｃＡｂ２能模拟ＨＥＣ刺激机体产生抗ＨＥＣ毒素的抗体（Ａｂ３）。     

不同免疫程序对仔猪猪瘟抗体水平的影响

用阻断ELISA试验对不同免疫程序下仔猪猪瘟抗体水平进行监测。结果表明,0日龄首免、40日龄二免、100日龄三免的免疫效果要好于20日龄首免、60日龄二免的免疫效果。     

抗独特型单克隆抗体在鸡中诱导的抗新城疫病毒保护性免疫——新城疫单克隆抗独特型疫苗研究(Ⅲ)

用AFE_8Id_(16-6)和ALA_(15-6)Id两株新城疫病毒(NDV)的抗独特型单抗(MAb_2)分别免疫接种一组(18只)无HI抗体鸡,并以一组(7只)Lasota苗常规免疫鸡和一组(12只)不免疫的易感鸡分别作为免疫阳性和阴性对照。在两株MAb_2末次免疫后8天,用微量血凝抑制(HI)试验检测了4组鸡的血清中HI抗体水平。结果:两株MAb_2和Lasota苗免疫的鸡全都产生了HI抗体,非免疫鸡均未测到HI抗体。AFE_8Id_(16-6)免疫鸡的HI滴度为1～5log_2;ALA_(15-6)Id免疫鸡的HI滴度为1～4log_2;Lasota苗免疫鸡的HI滴度高达7～10log_2。在HI抗体检测后2天,用100LD_(50)F_(48)E_8株NDV强毒攻击4组鸡,隔离观察10天,AFE_8Id_(16-6)和ALA_(15-6)Id免疫鸡的保护比值分别为17/18和10/18,Lasota苗免疫鸡保护比值达7/7,而非免疫对照鸡在攻毒后6天全部死亡。试验结果证明,上述两株MAb_2是NDV保护性抗原的模拟物,在多次注射后可诱导鸡产生抗NDV的血凝抑制抗体,并能使鸡抵抗NDV强毒的人工感染。因此,这两株抗独特型单抗,尤其AFE_8Id_(16-6)有希望用作新城疫抗独特型疫苗。     

不同 PRRS 疫苗组合对仔猪免疫效果的研究

【目的】针对猪繁殖与呼吸综合征(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome,PRRS)毒株存在多样性和疫苗免疫效果不佳的问题,探索PRRS疫苗对仔猪最佳免疫方案。【方法】分别在A、B、C 3个猪场开展试验,每个猪场采用4种不同的PRRS疫苗组合:第1种,14日龄同时免疫PRRS弱毒苗和灭活苗;第2种,4日龄免疫PRRS弱毒苗和35日龄免疫灭活苗;第3种,14日龄和35日龄免疫弱毒苗;第4种,14日龄免疫弱毒苗。通过免疫后的抗体滴度、病毒血症和生产参数评估PRRS疫苗免疫效果。【结果】不同免疫组合比较发现,A2、B3、C3抗体水平最高,S/P值分别为2.50、2.63和2.99;A2、B2、B3、C1血清中PRRSV核酸阳性率最低,分别为12.5%、0、0、6.3%;A1、B2、C1发病率最低,分别为10%、2%和8%。【结论】14日龄同时免疫PRRS弱毒苗和灭活苗,14日龄免疫PRRS弱毒苗和35日龄免疫灭活苗,两种免疫组合免疫效果最好。     

Studies on Preparation and Characteristics of Monoclonal Antibodies Against Enrofloxacin and Cross-Reactivity of Related Fluoroquinolones

An ester activation method was employed to couple enrofloxacin(ENFX) to the carrier proteins BSA and OVA. The conjugates ENFX-BSA and ENFX-OVA were identified with an UV spectrophotometer and amino acid automation analysis instrument, and resulted in conjugates with 48 ENFX molecules per carrier molecule(BSA). Splenocytes from mice immunized with ENFX-BSA were fused with SP2/0 myeloma cells and hybridomas secreting antibodies against enrofloxacin were selected and cloned. Two stable monoclonal antibodies, 2C5, 5D5 of the subclass IgG2a, were isolated. Using antibody 5D5, an indirect competitive inhibition enzyme-linked immunosorbent assay (Ci-ELISA) was developed for the quantitative detection of enrofloxacin and its metabolites. The IC50 of the standard curve was 21.67 ng mL-1 and the limit of detection for enrofloxacin was 0.13 ng mL-1. This method was sensitive and had a linear range from 0.13 to 10 000 ngmL-1 (r=-0.9782). Monoclonal antibody 5D5 exhibited high relative affinity to enrofloxacin, and the cross-reactivities with ciprofloxacin,marbofloxacin, sarafloxacin and danorfloxacin were 110.8, 27.40, 71.05 and 37.41%,respectively. Three non-fluoroquinolones of cefadroxil, chloramphenicol, sulfadimethoxine were tested and there was no cross-reaction between them.     

恩诺沙星单克隆抗体的制备及鉴定

 碳二亚胺法合成了2种恩诺沙星(enrofloxacin,ENFX)人工抗原ENFX-BSA和ENFX-OVA,用紫外扫描和分析载体蛋白的氨基酸组成等方法对人工抗原进行鉴定,ENFX与BSA的结合比约为48∶1。用ENFX-BSA免疫BALB/C小鼠,采用显微克隆技术最终筛选出2株特异性分泌细胞2C5和5D5并获取腹水,纯化后腹水效价分别为1∶3200和1∶6400。2C5和5D5均属IgG2a型抗体。单抗5D5间接竞争ELISA(Ci-ELISA)的工作浓度为1∶1000,ENFX的抑制曲线在0.13～10     

添加嗜酸性乳酸杆菌对肉仔鸡免疫功能影响的研究

本文对肉鸡饲喂嗜酸乳酸杆菌时,鸡的体重及免疫器官及功能的影响进行了研究。结果表明:饲喂嗜酸乳酸杆菌可以提高鸡的体重,增加胸腺、法氏囊、脾脏的重量及淋巴细胞的 E-玫瑰花环率。     

细菌素对肉仔鸡血液生化指标、抗氧化及免疫指标的影响

试验旨研究在日粮中添加不同水平乳酸链球菌素(Nisin细菌素)对肉仔鸡血液生化指标、抗氧化及免疫指标的影响。试验采用单因素完全随机试验设计,选用1日龄爱拔益加(AA)肉鸡550只,随机分为5个处理组,每个处理5个重复,每个重复22只鸡。对照组饲喂基础日粮+土霉素6 mg·kg-1,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别在基础日粮中添加Nisin细菌素0.025%、0.05%、0.075%、0.1%,试验期56 d。结果表明,在肉鸡日粮中添加不同水平的细菌素Nisin,对肉仔鸡血液生化指标和抗氧化指标没有显著影响(P0.05),显著提高肉仔鸡胸腺指数和脾脏指数(P0.05),提高肉仔鸡的免疫能力。     

免疫乳及血液中抗痢疾志贺氏菌抗体消长规律的研究

[目的]为抗痢疾志贺氏菌抗体免疫乳的研制和开发提供理论依据。[方法]以痢疾志贺氏菌为免疫原对妊娠后期的奶牛进行强化免疫,定期检测奶牛血和乳中的特异性抗体水平,以研究抗体消长规律。[结果]首次免疫后60d内,试验和对照血中的抗体效价均急剧上升且试验组的上升幅度明显大于对照组。分娩当天,试验血和乳中的抗体效价分别为12.2和10.4,对照血和乳中的分别为6.4和4.6;分娩后3d内,试验乳中的抗体效价比对照乳高6个滴度左右。分娩后第7天,试验血和乳中的抗体效价分别为10.8和9.2,对照血和乳中的分别为4.2和2.6。在常乳期间,试验血和乳中的抗体效价均缓慢下降。分娩后大约84d,试验血和乳中的抗体效价分别降至5.6和3.6。[结论]该研究为免疫乳的开发和生产奠定了理论基础。     

防控烟草青枯病植物免疫诱抗剂的筛选及其防治效果测定

【目的】为了探索可用于烟草青枯病防治的植物免疫诱抗剂,对4种药剂的抑菌活性和防治效果进行筛选和测定。【方法】利用平板抑菌和盆栽防控效果测定分析,以及测定其最小抑菌浓度(MIC)值和最小杀菌浓度(MBC)值研究不同植物免疫诱抗剂对烟草青枯病的防治效果。【结果】氨基寡糖素和纳米NA NO ZnO显示了一定的平板抑菌效果,其中5 000μg/mL的氨基寡糖素平板抑菌效果最佳,抑菌圈直径达35.2 mm,其MIC和MBC分别为1 000、2 000μg/mL;不同浓度智能聪和阿泰灵均没有显示平板抑菌效果;而盆栽防治效果显示,智能聪对青枯病的防治效果最好,接种后10 d进入发病高峰期,此时其防效可达57%,显著高于同一时期链霉素处理37%的防治效果,且可延缓病害发生;而平板抑菌效果显著的氨基寡糖素盆栽防效仅为13%,纳米NANO ZnO和阿泰灵防效分别为3%、15%,防治效果较差。【结论】植物免疫诱抗剂智能聪具有较大的生防潜力,可用于烟草青枯病的绿色防控。     

硝基苯对鸭免疫器官及禽流感免疫应答的影响

为探讨硝基苯对鸭免疫器官及免疫应答的影响,以鸭为试验动物,按53.66 mgkg-1灌胃硝基苯,复制鸭硝基苯中毒及模型.结果表明:(1)硝基苯对免疫器官发育及体液免疫功能造成广泛的抑制效应.(2)硝基苯影响了禽流感抗体的产生,并在较低的水平上维持.(3)硝基苯中毒组胸腺、脾脏、法氏囊脏器指数均低于对照组,(4)硝基苯中毒组鸭胸腺、脾脏、法氏囊出现广泛实质性变化,包括淋巴细胞数量显著减少、变性、坏死、滤泡减少或无滤泡形成,胸腺皮质萎缩.     

生长抑素基因疫苗对肉用鸡血浆生化指标和免疫器官指数的影响

研究以减毒沙门氏菌为载体的生长抑素基因疫苗对肉鸡的血浆生化指标和免疫器官指数的影响。将28日龄的150只肉鸡随机分为5个组,每组30只,A、B、C组口服生长抑素基因疫苗,剂量分别为8×109CFU/只、4×109CFU/只、1×109CFU/只,D组口服生理盐水,作为对照组,E组口服减毒沙门氏菌CS022,2周后加强免疫1次。结果表明:口服pcS/2SS基因疫苗后,C组(1×109CFU/只)肉鸡的白蛋白含量较D组明显增加(P<0.05),8周龄时和10周龄时尿素氮含量较D组明显降低(P<0.05)。pcS/2SS基因疫苗对血浆总蛋白、葡萄糖、游离脂肪酸的含量影响不明显。免疫器官指数方面,各组差异不显著(P>0.05),但1×109CFU/只剂量组较对照组(D组)有升高趋势。由以上结果可以看出,口服生长抑素基因疫苗可以提高肉鸡血浆白蛋白的含量,降低肉鸡血浆尿素氮含量,对血浆总蛋白、葡萄糖、游离脂肪酸的含量影响不明显,免疫器官指数有升高趋势,1×109CFU/只为较适宜剂量。     

鸡马立克氏病二次免疫的效果

70日龄鸡在发生马立克氏病初期,紧急接种CVI988疫苗,收到较好效果。死亡率、高峰产蛋率、马立克氏病病死率均极显著(P<0.01)优于未接种疫苗的鸡群。