梨火疫病拮抗细菌FX1及其抑菌物质的防病作用

以前期从植物酵素液中初筛出的梨火疫病菌（Erwinia amylovora）拮抗细菌为供试菌株,采用打孔抑菌圈法、共培养法复筛出对梨火疫病菌具有强抑菌活性的贝莱斯芽孢杆菌（Bacillus velezensis）FX1菌株。FX1菌株的除菌发酵滤液对梨火疫病菌的抑菌圈直径为26.11mm,与梨火疫病菌共培养的抑菌率为99.99%。比较不同方法提取的FX1菌株发酵滤液粗提物的抑菌活性,结果显示：酸沉淀法和硫酸铵饱和沉淀法得到的粗提物具有显著的抑菌作用,酸沉淀法提取物抑菌活性更强。利用特异性引物在FX1菌株中扩增检测到脂肽类（bmyB、fenD、ituC、srfAA、srfAB、bioA、yngG和yndJ）和抑菌蛋白类（TasA）抑菌物质合成相关基因,表明该菌株可能具有合成脂肽类和抑菌蛋白类物质的能力。利用库尔勒香梨（Korla Fragrant Pear）离体花序和杜梨（Pyrus betulaefolia）盆栽苗测定FX1菌株抑菌物质的防病效果显示,喷施FX1菌株脂肽类物质粗提液、除菌发酵滤液和菌体发酵液对香梨花序3～5 d的保护性防效分别为79.07%、56.85%和50.02%;...     

新疆梨种质资源的火疫病抗性评价北大核心

在梨火疫病侵入我国的严峻条件下,鉴定31个新疆梨品种的抗病水平,为抗病种质资源筛选与培育提供理论参考及实践意义。嫩叶、嫩枝采用针刺接菌法,幼果采用半果接菌法,定时记录嫩叶、嫩枝病变长度和幼果剖面菌脓变化,评价供试梨品种对火疫病的抗性水平。结果表明:叶片抗性鉴定中也历克阿木特、棉梨等16个品种表现为高抗,绿梨等7个品种表现为中抗,沙01等3个品种表现为中感,库尔勒香梨等5个品种表现为高感;枝条抗性鉴定中棉梨、也历克阿木特和绿梨表现为中抗,句句梨表现为高感,其他品种均表现为中感。综上,供试梨品种抗火疫病水平整体偏低,其中棉梨、也历克阿木特和绿梨在新疆梨系统中选择抗病育种材料可优先考虑。     

5种蔷薇科果树对梨火疫病的抗性

以新疆常见的5种蔷薇科果树为试材,采用离体枝条接种法和梨幼果针刺接种法,比较5种果树对梨火疫病的抗性。结果表明:5种蔷薇科果树在枝条和果实的抗性表现一致,最好的是海棠,为高抗品种;其次为山楂和苹果,为中抗品种;最差的是杜梨和库尔勒香梨,为低抗品种。不同种蔷薇科植物在离体枝条与幼果上对Erwinia amylovora菌株的抗病性鉴定,对今后深入揭示蔷薇科植物抗病分子机制有重要意义。     

如何认识梨火疫病

梨火疫病是国家重点检疫对象,主要危害蔷薇科果树,在我国所有的梨和苹果产区均有可能发生危害。近日全国农技推广中心下发了《关于做好梨火疫病调查工作的函》,要求各地认真做好疫情监测工作。为认真做好疫情调查,充分发动群众,及早发现疫情,现将梨火疫病的相关知识介绍如下。     

梨轮纹病拮抗细菌的筛选与评价

采集南京、连云港、高邮3地梨园病叶、病果、健叶、健果、病枝、健枝和土壤样本90份,分离纯化后得到871个细菌分离物,对其进行梨轮纹病菌菌丝生长的皿内抑制试验,共获得21株拮抗能力较强的细菌,其中拮抗性能最好的细菌sf 628抑菌圈直径达45 mm,抑制率达59.21%。梨果接种试验结果表明,21株拮抗能力较强的细菌中有5株拮抗细菌对梨轮纹病菌引起的病斑扩展抑制率大于50%,其中菌株sf 628抑制率达60.61%。进一步的理化特性和分子鉴定结果表明,菌株sf 628为枯草芽孢杆菌枯草亚种。     

梨火疫病的发生初探及防治

近两年来,在内黄县及周围地区发生了一种新的果树病害,发病症状独特,传播迅速,危害严重。查询甘肃,山西等有关文献介绍,笔者认为内黄县新发生的这种果树病害可能是“梨火疫病”。经过对该病害的监测结果表明．河南内黄县及周边苹果裁培区均有大面积发生,尤其是在元帅、富士系苹果上表现较为严重。造成产量、质量严重下降。     

土壤中梨火疫病菌实时荧光定量PCR检测及动态分析

【目的】利用实时荧光定量PCR检测土壤中梨火疫病菌(Erwinia amylovora)浓度,明确梨火疫病菌在土壤中的动态变化规律。【方法】2021年3—11月采集库尔勒市发病香梨园810份土壤样品,应用所建立的实时荧光定量PCR检测体系,测定土壤中的梨火疫病菌浓度,同时对梨园发病率及病情指数进行调查。【结果】土壤中梨火疫病菌浓度值变化趋势与梨园病情指数变化趋势一致,4—5月梨园病情指数快速升高至最高值,随着果树生长期延长,病情指数逐渐降低。土壤中梨火疫病菌浓度值从4月逐渐升高,6月平均浓度值为914 CFU·g-1,7月平均浓度值最高为965 CFU·g-1,随后逐渐降低;6月土壤带菌率为42.2%,浓度值≥103CFU·g^-1的土样13份;7月土壤带菌率为44.4%,浓度值≥10³CFU·g^-1的土样26份;6月、7月土壤中梨火疫病菌浓度显著高于4月、10月、11月,致病风险较高。【结论】6月和7月土壤中梨火疫病菌浓度值最高,主要与4月、5月大量病花病果掉落造成病原菌积累有关。加强花期病害防治和梨园病残体清理可有效降...     

果树内生拮抗细菌的筛选鉴定及其生防作用研究

通过组织分离法,在不同健康果树的木质部中分离到235株内生细菌。通过平板对峙法对所得菌株进行了初筛和复筛,得到6株拮抗作用较强的菌株。用过滤和高温灭菌得到的菌株发酵液进行抑菌谱试验,最终获得拮抗作用较强的内生细菌X8。对X8菌株在植物体内定殖、分类鉴定和防治作用的深入研究。结果表明：X8菌株可以在杏、辣椒等植物中定殖。X8菌株发酵液对辣椒疫霉病菌（Phytophthora capsici）抑制作用最强,达80.3%,对3种链格孢菌（Alternaria）病原菌的抑制作用达到75%以上,对番茄灰霉病和辣椒疫病的防效达到75.4%和79.3%,显著高于50%腐霉利和25%甲霜灵的防效。经16S rDNA序列分析,X8菌株与枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis的16S rDNA序列的同源性达99%。综合形态特征、生理生化特性,最终将X8鉴定为B. subtilis,在GenBank中序列登录号为HQ647257。     

辣椒疫病拮抗菌的分离、筛选与评价

从67份不同土样中分离得到382株细菌、264株放线分离物,通过平板时峙培养,筛选出拮抗辣椒疫霉的株,其中放线的比例较高,为44.1%;而细菌所占比例则较低,仅为8.5%.测定了抑活性较强的26株株对6种植物病原真的拮抗作用及盆栽控病效果.试验结果表明,拮抗B-YD4-6,A-NP6-7和A-GD5-2对6种植物病原真菌均有抑作用.且抑能力较强,抑圈直径为22.0～26.0 mm,抑制率达45.18%～55.56%;且该3株拮抗株对辣椒疫病的防治效果较好,21 d后的防治效果分别为65.5%,67.4%,64.5%.     

蔬菜根结线虫生防细菌的筛选及菌株HJT2-1种类的初步鉴定

以天津地区7个区县的蔬菜大棚土壤中分离出的306株细菌菌株为试材,采用亚甲基蓝染色法,研究306株细菌菌株发酵液对南方根结线虫2龄幼虫的影响。结果表明:细菌菌株HJT2-1发酵液对南方根结线虫2龄幼虫的校正死亡率较高为81.3%,其温室盆栽防效为55.6%,略低于阿维菌素防效。采用对细菌核糖体DNA的内转录间隔区进行分析的方法将菌株HJT2-1初步鉴定为假单胞菌属细菌。该试验获得了对根结线虫2龄幼虫具有较高致死率的细菌菌株HJT2-1,为开发防治根结线虫的生防制剂奠定了基础。     

辣椒疫霉菌拮抗细菌L14-3的生防潜力及其鉴定

为探讨L14-3菌株对辣椒疫病的生防潜力,采用皿内对峙试验和孢子萌发试验,测定其对辣椒疫霉菌的抑制活性,通过盆栽试验验证其对辣椒疫病的防治效果,并根据形态特征、生理生化特性和16S rDNA序列同源性分析对其进行鉴定.结果表明,L14-3菌株对辣椒疫霉菌的菌丝生长、游动孢子囊的形成、游动孢子的释放和休止孢子的萌发均具有...     

番木瓜内生细菌MG-Y2的鉴定及其生防作用

为筛选具有防病作用的植物内生菌,采用组织分离法和稀释分离法,分离番木瓜果皮中的内生细菌,得到103个菌株。采用培养基平板抑菌圈测定法从这些菌株中筛选到1株具有拮抗活性的细菌MG-Y2,对番木瓜疫霉病菌(Phytophthora nicotianae)、番木瓜炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioides)等8种病原菌有较强的拮抗作用。通过对其形态特征和生理生化特性测定以及16SrDNA部分序列同源性分析,鉴定该细菌为恶臭假单胞菌生物变种Ⅰ(Psudomonas putida biovarⅠ)。采用喷雾接种处理,MG-Y2可进入番木瓜叶片、叶柄、果皮和果肉中定殖。进行番木瓜果实采后防病试验,MG-Y2对采后番木瓜疫病和炭疽病的防治效果分别达到88.8%和57.4%。试验结果显示MG-Y2具有潜在的生防应用价值。     

新疆山楂种质资源对梨火疫病的抗性鉴定与评价

以新疆地区5种山楂种质资源为试材,采用离体叶片法、离体枝条法和离体幼果法,研究了5种山楂资源在实验室内人工接种对梨火疫病菌的抗病性鉴定评价的影响,以期为今后新疆地区城市街道山楂绿化树品种的选择以及山楂种质资源选育抗梨火疫病的品种和防治提供参考依据。结果表明：5种山楂资源的叶片、枝条和幼果在相同时间内对梨火疫病菌的侵染表现出不同程度的感病性,中度感病品种为红果山楂、裂叶山楂、准噶尔山楂,高度感病品种为黄果山楂(阿勒泰山楂)、食用山楂。     

甘蓝霜霉病内生拮抗细菌的筛选鉴定及防效研究

以感染霜霉病和健康的甘蓝叶片为试材,研究筛选了对甘蓝霜霉病菌有拮抗作用的内生细菌。结果表明:从健康的甘蓝幼苗中分离到18株内生细菌;用离体叶法进行测定,发现其中2株内生细菌对甘蓝霜霉病菌有拮抗作用,对其中一拮抗效果较好的菌株AC8进行田间防治试验,其防效达61.4%;通过形态观察、培养特征和生理生化特性鉴定,菌株AC8属于蜡状芽孢杆菌。     

小白菜内生假单胞菌XBC-PS的生防作用

从小白菜植株内分离得到假单胞菌(Pseudomonas sp.)菌株XBC-PS,通过浸种或喷雾接种在小白菜、大白菜和菜薹植株内定殖。培养基平板培养测定,XBC-PS对7种病原菌有较强的拮抗作用。盆栽防病试验结果表明,XBC-PS对小白菜炭疽病和霜霉病的防治效果分别为76.7%和72.9%。     

辣椒疫霉病生防细菌的筛选鉴定及其防效

以筛选、获取优良辣椒疫霉病害生防菌株材料为目标,通过平板稀释法与对峙法对水稻土壤耕层可培养细菌进行 分离和筛选,成功从167 株可培养细菌中分离、筛选获得1 株拮抗菌LRS-1,并被鉴定为多粘类芽孢杆菌（Paenibacillus polymyxa）。该拮抗菌对辣椒疫霉菌具有68% 左右的室内持久抑菌率以及63.4% 的温室病害防效;Realtime-PCR 检测结果表 明该拮抗菌对根围疫霉菌侵染数量具有显著的抑制效果。     

核桃细菌性疫病的生防菌筛选与鉴定

以枇杷、茄子和水杉等45种植物的健康叶片或茎中分离得到的80株植物内生菌为试材,采用平板对峙法,研究了这些菌株对病原菌树生黄单胞菌核桃致病变种Xanthomonas arboricola pv.juglandis的影响,以期为核桃细菌性疫病的生物防治提供理论参考依据。结果表明:得到5株有明显拮抗作用的菌株,分别是PPE17-18、QCE17-2、QZYE-41、QZJ-42和SSE17-24。其中菌株QZYE-41抑菌能力最强,PPE17-18和SSE17-24的抑菌能力较弱,5株菌株均为革兰氏阳性菌。通过16S rDNA和gyrB基因测序分析,结合菌落形态和生理生化测试,初步确定QZYE-41和SSE17-24为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),PPE17-18和QZJ-42为鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii),QCE17-2为不动杆菌属(Acinetobacter sp.)。该研究为核桃细菌性疫病的生物防治菌的开发应用提供了潜在生物新材料。     

蜜蜂授粉对库尔勒香梨火疫病发生影响及综合防控

为摸清蜜蜂授粉对香梨火疫病防控影响,于2019-2021年在第一师3个团场的9个梨园进行调查,结果表明,香梨花期禁、放蜂授粉对梨火疫病防控效果存在明显差异,通过分析明确了禁蜂授粉病害防控效果明显好于放蜂授粉,可以显著减缓梨火疫病发病情况,为今后深入研究库尔勒香梨火疫病综合防控体系提供相关的参考依据。     

马铃薯早疫病拮抗菌的筛选及其代谢产物的抑菌活性

以马铃薯早疫病病原菌茄链格孢菌(Alternaria solani)为指示菌,通过平板对峙法,筛选出菌株及其发酵滤液对马铃薯早疫病病原菌均具有较强拮抗作用的生防菌株BAF-6;通过形态特征、生理生化特性鉴定以及16S r DNA序列分析,该菌株为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。菌株发酵滤液经60~80℃热处理,抑菌活性均在95%以上;紫外线照射8 h或在p H值为2~10的酸碱环境下,发酵滤液的抑菌活性稳定;经蛋白酶处理后抑菌活性仍达50%以上。     

根结线虫生防细菌的筛选及鉴定

以抗病番茄根际土壤、根为分离对象,采用稀释分离方法,进行了根结线虫生防细菌的筛选及鉴定。结果表明:从番茄根际土和根内分离出47株细菌,其中,根内细菌7株,根际细菌40株。经杀根结线虫活性检测,获得2株活性强且稳定的细菌菌株W49、W21,对根结线虫的校正死亡率均超过90.0%,对卵的孵化抑制率达96.0%。通过菌落形态特征、生理生化特征观察和16SrDNA序列分析,W49和W21分别被鉴定为简单芽孢杆菌(Bacillus simplex)和内生芽孢杆菌(Bacillus endophyticus)。