恩诺沙星新盐的制备、表征及溶解性研究

【目的】制备恩诺沙星(enrofloxacin, ENR)新盐并考察其溶解性,旨在提高ENR的溶解度,丰富其晶体形式。【方法】采用混悬法制备ENR新盐,并通过溶剂挥发法培养其单晶。利用粉末X射线衍射(PXRD)、单晶X射线衍射(SXRD)、傅里叶红外光谱(FTIR)、差示扫描量热分析(DSC)、热失重分析(TGA)和扫描电子显微镜(SEM)对新盐进行一系列表征分析。通过粉末溶解速率试验考察ENR和新盐在37℃、pH 6.8磷酸盐缓冲液中的溶解速率。【结果】制备的ENR新盐为ENR-2,6-二羟基苯甲酸半水合物(ENR-2,6-DHBA·1/2H₂O)。经单晶结构分析可知,ENR-2,6-DHBA·1/2H₂O属于三斜晶系,P-1空间群,晶胞参数为：a=13.2495(7)?;b=13.8266(11)?;c=16.0672(8)?;α=114.301°(6);β=90.322°(4);γ=114.438°(7)。不对称单元中包含2个ENR阳离子、2个2,6-DHBA阴离子和1个水分子。2,6-DHBA羧酸基团的质子转移到ENR哌嗪环的N原子上...     

恩诺沙星分子印迹聚合物的制备及表征

为了制备恩诺沙星分子印迹聚合物,以恩诺沙星（ENRO）为模板分子,甲基丙烯酸（MAA）为功能单体,采用沉淀聚合法合成了ENRO分子印迹聚合物（MIPs）纳米微球,优化了模板与功能单体的比例、溶剂种类及溶剂用量,并对MIPs进行了表征。结果表明,MIPs微球粒径（190—290nm）大于非印迹聚合物（NIPs）微球粒径;同时Scatchard分析表明,在研究的浓度范围内MIPs存在两个不同的结合位点,其离解平衡常数Kd-0最大表观结合量Qmax分别为Kd1=0．2313g／L,Qmax1=34．7540mg／g,Kd2=0．5841g／L,Qmax2=57．4298mg／g;与环丙沙星和氧氟沙星相比,MIPs对ENRO表现出更强的特异性吸附能力。     

恩诺沙星单克隆抗体的制备及其鉴定

采用碳二亚胺法和氯甲酸异丁酯法合成恩诺沙星的人工抗原,结合比为15∶1。用人工抗原腹腔免疫BALB/c小鼠,有限稀释法筛选获得分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株2H10C2F11,并将该细胞株注射小鼠腹腔获得腹水。纯化后的抗体效价为3.96×10-6,紫外分析方法计算蛋白含量为1.139 mg/mL,琼脂双扩实验表明抗体为IgG1型,SDS-PAGE电泳图谱显示纯化效果理想;经间接ELISA方法测定,抗体的亲和力为1.8×108L/moL。     

盐酸恩诺沙星制备及结构确证

恩诺沙星（Ｅｎｒｏｆｌｏｘａｃｉｎ）是德国拜尔公司率先开发的氟喹诺酮类兽医专用抗菌药,其抗菌谱广、抗菌活性强,对Ｇ＋、Ｇ－菌均有很强的抗菌活性。具有低毒、高效、体内组织分布广,对各种畜禽致病菌和支原体均有强大的杀灭作用。口服吸收快,组织穿透力强,该药已成为畜禽抗感染的主导药物。恩诺沙星的水溶性小使用不便,但恩诺沙星属二性化合物,可与酸或碱作用形成酸式盐和碱式盐从而增加水溶性。依据恩诺沙星的化学性质,研制了盐酸恩诺沙星并进行了化学结构分析。１　盐酸盐的制备１．１　粗制　将恩诺沙星溶于１ｖ２０倍的水…     

恩诺沙星可溶性原料制备工艺的研究

近年来,喹诺酮类药物在水产养殖中得到广泛的应用.特别是恩诺沙星在鱼、虾、蛙、龟等防病治病方面应用广泛.但由于恩诺沙星水溶性不好,在应用中造成物料损失,无形中增加养殖成本,因此制备出可溶性恩诺沙星就能有效地控制成本,同时使用方便.本文论述了恩诺沙星可溶性原料的制备工艺,用恩诺沙星为原料,一步制成可溶性盐.溶解度为易溶.     

恩诺沙星微囊的制备及急性毒性试验

采用乳剂制备技术与微囊制备技术相结合的方法,以甲基纤维素和可溶性淀粉为囊材,制备了恩诺沙星微囊。结果表明,制备的恩诺沙星微囊分散状态良好,平均粒径为47．6μm,粒径分布在20μm～70μm 范围内的微囊占88％,载药量为12．5％±0．40％,具有一定的缓释作用。急性毒性试验结果显示恩诺沙星微囊的 LD50为5968．81 mg／kg,95％可信限为5164．06 mg／kg～6978．86 mg／kg,表明恩诺沙星微囊毒性很低,可以进行药效学试验研究。     

恩诺沙星注射液刺激性试验

本文采用猪腿肌肉注射法进行局部刺激性试验,观测20％恩诺沙星注射液注射给药后对局部肌肉的刺激反映.     

恩诺沙星免疫抗原的制备与鉴定

通过N-羟基琥珀酰亚胺活化酯法合成恩诺沙星免疫抗原,用聚丙烯酰胺凝胶电泳、紫外光谱和酶联免疫法分析对恩诺沙星免疫抗原的结构、分子量、免疫原性等特征进行鉴定。经紫外光谱分析恩诺沙星-牛血清白蛋白偶联比为5:1,紫外光谱峰形发生变化并位移。间接酶联免疫法分析证明其免疫兔所获得的抗体与恩诺沙星有良好的特异性,半数抑制浓度为60ng/mL。实验结果表明成功合成了恩诺沙星免疫抗原,并获得了抗恩诺沙星抗体,为ELI SA或TRFI A等免疫方法的进一步研究提供了试验基础。     

恩诺沙星抗体的制备与鉴定

恩诺沙星（Enrofloxacin，ENR）又名乙基环丙沙星，为第一个畜禽专用的氟喹诺酮类药物，1983年由德国拜耳公司首先研制成功，国内产品于1994年投放市场。该药广谱抗菌，对霉形体和革兰氏阴性菌效力强，对革兰氏阳性及厌氧菌效果稍弱；内服及肌肉注射吸收迅速，且在体内代谢为同样具有抗菌活性的环丙沙星，代谢物生成与消除缓慢、分布广泛，是养殖户治疗畜禽疾病的常用药之一。     

恩诺沙星、恩诺沙星钠和盐酸恩诺沙星在鸡体内的比较药动学

36只黄羽肉鸡,随机均分为3组,每组12只,分别进行恩诺沙星、恩诺沙星钠和盐酸恩诺沙星的药动学试验,高致液相色谱法测定鸡只血浆中恩诺沙星浓度,MCPKP程序处理药-时数据。恩诺沙星、恩诺沙星钠和盐酸恩诺沙星溶液经内服给药后在鸡体内最佳药动学模型为一级吸收一室模型,峰浓度高（峰浓度分别为2．39、2．04和2．37μg／mL）,吸收快（吸收半衰期t1/2Ka分别为1．15h、0．76h和1．55h）,消除缓慢（消除半衰期t1/2K分别为8．39h、12．19h和10．95h）。以恩诺沙星做对照,恩诺沙星钠和盐酸恩诺沙星内服给药后吸收完全,其相对生物利用度高,分别为103．2％和126．8％。恩诺沙星钠和盐酸恩诺沙星内服给药后主要药动学参数与恩诺沙星给药后的药动学参数相比均无显著性差异．     

恩诺沙星聚合物胶束的制备及体外释放

通过比较3种不同质量比的两嵌段共聚物制备的聚合物胶束,优化恩诺沙星聚合物胶束的制备工艺,并考察该胶束的理化性质和体外释药特性。以自乳化溶剂挥发法制备恩诺沙星聚合物胶束,并采用单因素法优化处方;HPLC法测定其载药量、包封率、体外释药特性,激光粒度仪测定其粒径及分布,红外分光光度法（IR）确证含药胶束特征。结果显示,采用PLA16000-mPEG2000（聚乳酸-聚乙二醇单甲醚）共聚物为载体,以丙酮为有机溶剂,所制备胶束平均粒径为（117.2±8.2）nm,载药量为（3.3±0.17）%,包封率为（32.3±1.70）%;相对于另外2种材料制备的胶束有较好的载药量,且IR确证药物已被包封在胶束中。恩诺沙星胶束体外释药试验表明其具有一定的缓释特性。     

恩诺沙星固体分散体片的制备及体外溶出度的研究

为了提高恩诺沙星在水中的溶解度、溶出度,加速内服药物的溶解、扩散、吸收,达到速效、高效的目的,以ＰＥＧ６０００等高分子材料为载体,制备恩诺水利生的固体分散体,分别测定固体分散体与原料药的溶解度以及固体分散体片剂与普通片剂的溶出度,恩诺沙星－ＰＥＧ６０００固体分散体的体外溶出度均达到９５％以上,而普通片剂（自制）为５０％左右,市售片剂为１１％左右。ＥＮＲＯ在水中溶解度为１．０２５８,而普通沙星－ＰＥ     

沙拉沙星环糊精包合物的制备与体外释放度研究

为了制备沙拉沙星的新剂型,评价其体外释放度,采用响应面法优化沙拉沙星/β-环糊精包合物微囊的制备条件,用扫描电子显微镜(SEC)进行表征试验,对环糊精包合物微囊的粒径和释放度进行评价.响应面法优化后的参数为沙拉沙星和β-环糊精混合液以300 r/min转速在50℃下搅拌4 h,粒径试验表明包合物粒径平均值为1.0 μm...     

Preparation and evaluation of enrofloxacin microspheres and tissue distribution in rats

New enrofloxacin microspheres were formulated, and their physical properties, lung-targeting ability, and tissue distribution in rats were examined. The microspheres had a regular and round shape. The mean diameter was 10.06 µm, and the diameter of 89.93% of all microspheres ranged from 7.0 µm to 30.0 µm. Tissue distribution of the microspheres was evaluated along with a conventional enrofloxacin preparation after a single intravenous injection (7.5 mg of enrofloxacin/kg bw). The results showed that the elimination half-life (t_1/2β) of enrofloxacin from lung was prolonged from 7.94 h for the conventional enrofloxacin to 13.28 h for the microspheres. Area under the lung concentration versus time curve from 0 h to ∞ (AUC_0-∞) was increased from 11.66 h·µg/g to 508.00 h·µg/g. The peak concentration (C_max) in lung was increased from 5.95 µg/g to 93.36 µg/g. Three lung-targeting parameters were further assessed and showed that the microspheres had remarkable lung-targeting capabilities.     

恩诺沙星肺靶向明胶微球的制备及质量评价

研制恩诺沙星肺靶向明胶微球(ENR-GMS)并对其进行质量评价。采用乳化-化学交联法制备恩诺沙星肺靶向明胶微球,油镜下观察微球粒径大小及形态,并用显微照相机(Olym-pusDP12-2)拍照做记录。通过紫外分光光度法检测微球中恩诺沙星(ENR)的含量,进而计算得出其载药量和包封率,并通过溶出度测定法探讨其体外释放规律。制成的恩诺沙星肺靶向明胶微球为淡黄色粉末,油镜下大小较均匀,形态圆整、分散性较好,其内可见被包裹的黄色ENR粉末,平均直径约10.26μm。就粒径分布而言,5～12μm的微球占86.66%,载药量为4.51%,包封率为31%,在pH7.4的PBS缓冲液中的释药符合缓释特征,t1/2约为3.8h,比单纯的ENR延长3个多小时。体外释放实验显示前2.5h时释药量约37.02%,至第5.0h之间释药量达80.87%,之后逐步释放,至10h时药物释放累积量占总药量的87.96%。结果表明,制备出的恩诺沙星明胶微球符合肺靶向给药系统的要求,具有较好的缓释性和肺靶向性。     

恩诺沙星-羟丙基-β-环糊精包合物的制备

为提高恩诺沙星水溶性,采用溶液搅拌法制备恩诺沙星-羟丙基-β-环糊精包合物,并通过正交试验设计确定最佳制备方法及工艺。利用相溶解度法、紫外分光光度法、红外分光光度法对包合物进行鉴定。通过正交试验筛选的最优处方为恩诺沙星与羟丙基-β-环糊精的摩尔比为1∶2,包合温度60℃,包合时间3h,溶解度增大了165倍。结果表明,恩诺沙星与羟丙基-β-环糊精可形成稳定的包合物,羟丙基-β-环糊精可提高恩诺沙星的溶解度。