用弱毒病毒防治蔬菜病毒病

防治番茄花叶病新开辟的有效技术是利用弱毒病毒L11A。该法利用植物一度感染某种病毒时,就不会再受近缘的病毒感染的现象,就是像接种疫苗那样的预防方法。作者继培养出弱毒病毒LI1A以后,又成功地培养出能用于防治由TMV引致的甜椒花叶病的弱毒病毒Pal8。 1.在番茄和甜椒中发生的TMV株系 引致番茄发病的TMV大部分是番茄系统( TMV—T),一部分是普通系统( TMV—O)。对于引致甜椒发病的TM V则主要是TMV-T和TMV—O,但是最近,对该两系统具较强抗性的甜椒品种,也变得容易被感染了。调查结果:确认新发生了辣椒系统( TMV—P),并在全国…     

弱毒系病毒——生物技术的现状与展望

一、弱毒系病毒的研究现状植物一旦感染病毒,由于病毒的干涉作用,就能抑制同种或近缘病毒的第二次感染。因此,给植物接种弱毒系病毒预防强毒系的感染,已有不少试验成功的例子。日本农林水产省从1980年开始的五年     

接种AM真菌对不同育苗基质中甜椒苗期生长的影响

研究比较普通土、秸秆有机土和草碳蛭石3种育苗基质中接种两种丛枝菌根真菌GM、GV对甜椒苗期生长的影响,结果表明：在营养含量较高的有机土育苗基质中,接种AM真菌对甜椒苗的影响最弱,而在营养水平较低的草碳蛭石无土育苗基质中,接种AM真菌对甜椒苗有显著的促进作用,其中AM真菌在草炭蛭石中对甜椒苗根系的侵染率也最高,而GM的接种效果优于GV。     

柑橘衰退病毒侵染对寄主植物同工酶及酸性病程相关蛋白表达的影响

以柑橘衰退病毒(Citrus tristeza virus,CTV)不同致病力株系接种寄主植物,比较分析了寄主植物体内过氧化物酶(peroxidase,POD)和多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)活性变化特点。结果表明,该病毒侵染对这2种酶活性的影响因寄主品种和CTV株系而异,CTV强毒和弱毒株系侵染均导致墨西哥莱檬植株中POD活性明显降低;在甜橙上,CTV强毒株系接种植株中POD活性则显著性提高,而弱毒株系接种对POD的活性无明显影响;在对该病毒具有较高抗性的枳壳中,接种CTV不同株系对POD活性均无明显影响。而在接种强毒株系N25的墨西哥莱檬中PPO活性有所增强,在枳壳上则表现为接种植株的PPO活性降低,在甜橙上PPO活性无明显的变化。POD、PPO和酯酶(esterase,EST)同工酶酶谱分析的结果显示,CTV弱毒株系接种枳壳后诱导产生了2条新的EST同工酶谱带,而在其他CTV接种植株上均未诱导表达新的POD、PPO及EST酶谱。酸性病程相关蛋白分析结果显示,CTV强毒株系在甜橙上诱导产生有6条明显的酸性病程相关蛋白条带。     

沈阳研制出新型植物抗毒疫苗

一种防治植物病毒的新型、高效、活体生物制剂———抗植物病毒疫苗１号和２号已在沈阳研制开发成功。该成果系沈阳农业大学工厂化高新农业工程技术中心在“九五”期间承担国家科技部工厂化高效农业研究所取得的阶段性开发成果。经在辽宁、吉林、山东等保护地蔬菜生产中试验应用表明，抗植物病毒疫苗１号和２号不仅具有防病增产效果，还能减少农药施用次数，节省人力、物力和财力。抗植物病毒疫苗１号和２号的作用类似于预防针，幼苗期一次接种，弱毒疫苗可在植物体内大量增殖，使植物终生获得免疫，不再由同类病毒引起的病毒病，从根本上预…     

梨轮纹病菌弱毒株携带产黄青霉病毒水平传染力测定

梨轮纹病是由葡萄座腔菌（Botryosphaeria dothidea）引起。前期获得了感染葡萄座腔菌产黄青霉病毒（Botryosphaeria dothidea chrysovirus 1,BdCV1）引起弱毒的梨轮纹病菌菌株LW-C和LW-1，为进一步明确BdCV1介导弱毒菌株是否具有作为候选田间生防资源的潜力，将LW-C和LW-1分别与地理来源不同的梨轮纹病菌（B. dothidea）分离株和危害梨树严重的梨腐烂病菌（Valsa pyri）分离株XJ-28进行对峙培养试验，测定获得携带病毒的衍生菌株生长速率及致病力。研究结果显示轮纹病菌菌株弱毒因子BdCV1均能以一定频率水平传染至不同种类致病菌株中，可引起部分受体菌株生长速率下降，不同程度地抑制其生长。接种梨枝条和果实，原始受体菌株所形成病斑扩展长度约为带毒衍生菌株的2倍至4倍，表明病毒可抑制其受体菌株致病力。以上研究结果揭示了BdCV1可水平传染至不同种类受体菌株中，寄主范围广，具有作为生防因子应用于梨真菌病害中的可行性。     

利用弱毒株系7MV—N14防治番茄病毒病

番茄病毒病发生越来越严重,中国农科院微生物所研制出防治番茄病毒病的弱毒疫苗7MV-N14(简称N14),N14的防病作用原理是:没受病毒侵染的番茄苗接种弱毒株系N14,不表现症状,能对侵害的强株系产生抗性,使之不表现症状,或症状减轻,达到防治目的。     

黄瓜绿斑驳病毒人工诱变方法的研究

以黄瓜绿斑驳病毒(Cucumber green mottle mosaic virus)野生株系为试材,采用高温处理、亚硝酸处理及复合处理对其进行人工诱变,比较3种诱变方法致弱效果。结果表明:3种方法均具有削弱病毒群体在苋色藜上枯斑扩展的能力,野生株系接种苋色藜后,直径小于1mm枯斑比率为1.99%,亚硝酸处理、高温处理、复合处理小枯斑比率分别为11.41%、12.87%、14.20%,复合处理致弱效果最好。该结果有助于快速有效的筛选CGMMV弱毒株,也将为弱毒疫苗的开发和致病相关基因功能的研究奠定基础。     

卫星病毒CMV—S_(52)在甜椒体内增殖情况研究

本试验运用凝胶扩散法测定了卫星病毒CMV—S_(52)在甜椒“二猪嘴”上的浓度变化情况。自接种后第4天开始测定,以后每隔两天测定一次,一直测到第十八天。结果发现在接种后第十二天病毒相对浓度达到最大。此结果可作为大田应用S_(52)时接种率的监测及为苗期管理提供参考。     

春季大棚甜椒缺钙症的防治措施

１９９９年春季在简易大棚内种植德国六号特大甜椒，常规施肥，地膜覆盖。定植活棵后，长势茁壮，花繁果多，眼见丰收在望。谁料门椒长到重５０ｇ时，部分果实上出现浅褐色水渍状病斑，以为是病毒和细菌性病害。立即用病毒Ｋ、病毒Ａ、灰霉灵、速克灵等药剂防治，５天一次。可是不但无济于事，反而迅速蔓延，扩大到半数以上果实全部发病，感病果实全部停止生长干瘪或者腐烂。可是甜椒植株却郁郁葱葱毫无感病症状，后经查阅资料，方知是甜椒在生长过程中缺钙所致的生理病害，为此笔者在２０００年春季栽培中，采取如下措施，取得很好的效果…     

新发现的柑桔类病毒

很早以前知道柑桔裂皮病的病原是类病毒(柑桔裂皮类病毒CEV),可用埃特洛枸橼(Etrog citron)和爪哇三七的嫁接,汁液及伤口接种进行鉴定。根据这些指示植物的反应,知道在所谓的裂皮病植株中存在着弱毒系。Schlemmer等(1985)从表现裂皮病症状的枸橼中分离出类病毒状核糖核酸,命名为枸橼类病毒变株(CVaV)。日本佐佐木(1985)和加纳(1985)也报道埃特洛枸橼的反应是柑桔裂皮病的弱毒系。 作者等与广岛县果树试验场的佐佐木笃共同研究,探讨这种弱毒柑桔裂皮病的症状与类病毒的关系。从强毒系、弱毒系症状和健康的埃特洛枸橼的叶中提取低分子量的核     

抗病毒甜椒KDT系列选育初报

根据中国农科院蔬菜花卉研究所及湖南省蔬菜所等单位的鉴定和我所对先后引进的100多份国内外甜椒材料的试种和观察，发现这些辣椒资源中虽有个别单抗TMV或CMV的材料，但尚未见兼抗多种病毒的材料，尤其是达到高抗水平的更是连一份都没有。病毒病的危害不仅严重影响甜椒的产量，也大大限制了甜椒的种植范围和生产季节。     

托拉斯假单胞杆菌弱毒菌株诱导平菇抗细菌性褐斑病的研究

为了明确平菇细菌性褐斑病病原菌托拉斯假单胞杆菌（Pseudomonas tolaasii）弱毒菌株JPG250303的诱导抗病作用、弱致病性及诱导抗病作用的遗传稳定性,通过对其诱导抗病性表达、诱导接种浓度及诱导间隔期的研究,明确该弱毒菌株具有较好的诱导抗病效果。利用形态学及分子生物学技术,鉴定出该弱毒菌株为托拉斯假单胞杆菌（P. tolaasii）,将弱毒菌株经平菇子实体连续5代培养后均具有弱致病性,说明其弱致病性可以稳定遗传;同时对5代菌株分别进行了诱导抗病活性的验证,5代菌株对平菇细菌性褐斑病诱导抗病效果分别为67.2%、66.3%、69.1%、68.6%和65.0%,说明该弱毒菌株诱导抗病活性也具有稳定性,这一研究为该弱毒菌株作为生防菌株防治平菇细菌性褐斑病的应用提供了理论基础。     

来源于产黄青霉病毒科成员的分离物对梨轮纹病菌生长及其致病力的影响北大核心CSCD

【目的】明确产黄青霉病毒科成员(Botryosphaeria dothidea Chrysovirus 1,BdCV1)对寄主梨轮纹病菌(Botryosphaeria dothidea)菌株生物学性状的影响,证实单独感染BdCV1梨轮纹病菌分离株是弱毒菌株;以期确定BdCV1是否为引起梨轮纹病菌弱致病力的单一因子。【方法】从前期弱致病力复合感染双分体病毒科成员Bd PV1和BdCV1的梨轮纹病菌LW-1中经多代菌丝分离获得的疑似仅单独感染BdCV1分离株(命名为LW-C)为材料;采用dsRNA检测、RTPCR,鉴定LW-C菌株中仅携带BdCV1。采用菌丝块接种于PDA培养基以及3针针刺法接种梨果实,观察其菌落形态以及发病情况,测定菌落生长速度和致病性,明确LW-C生物学特性。将LW-C对无毒菌株Mock进行水平转染,检测其传染后衍生菌株的dsRNA并测定其生物学特性。【结果】证实了LW-C仅感染BdCV1,具有弱毒特性;水平转染结果明确了BdCV1因子对梨轮纹病菌的菌落形态、生长速度有抑制作用,对寄主有弱致病力。【结论】确认了BdCV1是引起梨轮纹病菌致病力衰退的主要因子,为真菌病毒防治果树轮纹病害提供了新颖的生防材料。     

来源于产黄青霉病毒科成员的分离物对梨轮纹病菌生长及其致病力的影响

【目的】明确产黄青霉病毒科成员(Botryosphaeria dothidea Chrysovirus 1,BdCV1)对寄主梨轮纹病菌(Botryosphaeria dothidea)菌株生物学性状的影响,证实单独感染BdCV1梨轮纹病菌分离株是弱毒菌株;以期确定BdCV1是否为引起梨轮纹病菌弱致病力的单一因子。【方法】从前期弱致病力复合感染双分体病毒科成员Bd PV1和BdCV1的梨轮纹病菌LW-1中经多代菌丝分离获得的疑似仅单独感染BdCV1分离株(命名为LW-C)为材料;采用dsRNA检测、RTPCR,鉴定LW-C菌株中仅携带BdCV1。采用菌丝块接种于PDA培养基以及3针针刺法接种梨果实,观察其菌落形态以及发病情况,测定菌落生长速度和致病性,明确LW-C生物学特性。将LW-C对无毒菌株Mock进行水平转染,检测其传染后衍生菌株的dsRNA并测定其生物学特性。【结果】证实了LW-C仅感染BdCV1,具有弱毒特性;水平转染结果明确了BdCV1因子对梨轮纹病菌的菌落形态、生长速度有抑制作用,对寄主有弱致病力。【结论】确认了BdCV1是引起梨轮纹病菌致病力衰退的主要因子,为真菌病毒防治果树轮纹病害提供了新颖的生防材料。     

瓜枝孢弱毒菌株诱导黄瓜抗病相关基因表达的cDNA-AFLP 分析

 利用cDNA-AFLP 技术,分析瓜枝孢弱毒菌株诱导黄瓜苗后72 h 内抗病相关基因的差异表达。结果显示,诱导的基因表达差异始于接种后3 h,接种后6 h 差异表达片段总数达到高峰。8 个取样时间点的诱导性差异表达片段数大于抑制性表达片段数。仅在接种后第12 h 呈现相反趋势。通过回收、克隆、测序和同源性比对,获得的5 个片段分别与拟南芥中病原菌诱导的水杨酸糖基转移酶、梨磷脂酶C编码的基因等具有较高的同源性,初步推断瓜枝孢弱毒菌株诱导黄瓜抗病可能是通过依赖于水杨酸介导的信号传导途径诱导黄瓜的系统抗病性（system acquired resistance, SAR）,作为胁迫抗性信号传递中的关键酶——磷脂酶C 可能参与了上述过程。经Northern 杂交结果证实,克隆分离的DNA 差异片段是瓜枝孢弱毒菌株诱导表达的特异片段。     

甜椒贮藏病害及其防腐措施的研究

鉴定发现，甜椒果实贮藏期间的主要真菌病害有：甜椒灰霉病（Ｂｏｔｒｙｔｉｓ ｃｉｎｅｒｅａＰｅｒｓ．）、甜椒果腐病［Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ ａｌｔｅｒｎａｔａ（Ｆｒ．） Ｋｅｉｓｓｌ］及甜椒根霉腐烂病（Ｒｈｉｚｏｐｕｓｎｉｇｒｉｃａｎｓ Ｅｈｒ．）等。化学药剂抑菌试验结果表明：ＣＨＣ（次氯酸钙）、ＤＭＦ（富马酸二甲酯）效果最好；ＳＢ（仲丁胺衍生物）、ＹＯＰＰ（乙酸ＯＰＰ）、ＫＭ（克霉灵－５０％的仲丁胺）、 Ｉ２（碘制剂）、 ＣｌＯ２（二氧化氯）次之。这些药剂用于处理接种灰霉病菌或未接种病菌的甜椒果实，其防腐效果以ＣＨＣ ０．０１５％、Ｉ２０．０５％、ＳＢ０．１ｍＬ／ｋｇ和ＫＭ０．１ｍＬ／ｋｇ较好。     

寄主凤凰柚对柑橘衰退病病毒甜橙分离株构成的影响

 为研究不同柑橘类型对柑橘衰退病病毒构成的影响，将9个保存在新会橙上的引起甜橙茎陷点症状的柑橘衰退病毒强毒分离株嫁接接种到凤凰柚后，比较了接种前后p25基因的HinfⅠRFLP 和SSCP变化情况。分离株 CT90与CT20接种前后的RFLP组群没有发生变化；RFLP组群发生变化的分离株中有6个由混合组群变为单一组群。此外，除分离株CT90接种前后的SSCP谱带保持不变外，其余8个分离株从新会橙接种到凤凰柚后，SSCP谱带数均呈减少趋势。试验结果倾向于表明某些能在甜橙上增殖的CTV株系在凤凰柚上的增殖受到了抑制。     

甜椒的无公害生产技术

我们南张特菜基地生产甜椒已有6年的光景，甜椒及其他蔬菜已申请了绿色食品证书。我们在生产和管理上严格把关，全部施用有机肥，杜绝了高毒和高残留化学合成农药的使用，在病虫害防治上广泛使用人工、生物防治接术，保证了蔬菜品质，基本上达到了绿色食品标准。现将我们的做法总结如下。     

弱毒疫苗N14和卫星病毒S52

弱毒疫苗N14和S52由中国农科院微生物研究所研制。可防治多种蔬菜的病毒病。预防番茄烟草花叶病毒病:当番茄幼苗生长到2-3片真叶时,进行第1次分苗时,用弱毒疫苗N14100倍液浸根