羊踯躅嫩叶离体培养和植株高效再生技术研究

【目的】建立羊踯躅嫩叶离体培养及植株高效再生体系。【方法】以羊踯躅新生嫩叶为外植体,筛选嫩叶愈伤组织诱导、再分化及生根培养基,并以再生植株茎节为试材,建立高效植株再生体系。【结果】最适合羊踯躅嫩叶愈伤组织诱导的培养基为1/2 DR+2.40 mg/L 2ip+0.80 mg/L NAA,诱导率为99.5%;愈伤组织再分化的最佳培养基为1/2 DR+2.90 mg/L 2ip+0.01 mg/L NAA+1.75 mg/L KT,分化率为99.7%;适宜生根的培养基为1/4 DR+0.06 mg/L ZT+0.02 mg/L NAA,生根率达99.0%。利用再生植株茎节的快繁结果表明,在28 d的培养周期内,每节段平均增殖达5倍以上。【结论】成功建立了羊踯躅嫩叶愈伤组织诱导、再分化芽苗和植株高效再生体系,可以满足羊踯躅工厂化育苗的需要。     

菜心离体培养植株再生的研究

菜心 (ＢｒａｓｓｉｃａｐａｒａｃｈｉｎｅｎｓｉｓＢａｉｌ.)离体培养时 ,由于基因型的差异 (ＡＡ基因型 )较其他芸薹属作物更为困难 ,植株再生频率仅为 10 %～ 30 % [1] .离体培养的主要问题是愈伤组织分化频率低 ,在分化成苗时先产生根而抑制了芽的分化[1,2 ] ,芽伸长困难 ,实验结果重复性差 ,不能满足遗传转化的需要 .本实验研究了不同外植体、培养基附加成份等因素对菜心离体培养植株再生和分化频率的影响 ,以ＡｇＮＯ3 和ＧＡ3 相配合 ,获得了高频率、芽壮且多的再生植株 ,对保存种质、扩大繁殖和遗传转化有一定的意义 .1　材料与方…     

狐米草离体培养植株再生

以狐米草种子的无菌苗和幼穗为外植体,在ＭＳ培养基上再生出完整的小植珠。在培养基中添加０．１ｍｇ／ＬＧＡ３,狐米草种子的发芽率由５．７％提高到２０．９％左右;仍不能发芽的种子,用刀剖开后再接种,发芽率达４９．０％。获得了两种类型的愈伤组织：白色、光滑的非胚性愈伤组织;绿色、结节状的胚性愈伤组织。非胚性愈伤组织诱导再生植株的频率为３．０％,胚性愈伤组织诱导再生植株的频率为１００．０％。研究建立起狐米草离体培养植株再生的技术体系。     

毛稔叶片离体培养及植株再生研究

以毛稔叶片作为外植体, MS为基本培养基,研究不同种类激素的浓度配比对毛稔叶片离体再生的影响。结果表明,黑暗条件与光照12 h·d-1有利于毛稔愈伤组织形成,毛稔叶片愈伤组织最佳诱导培养基为MS+0.5 mg·L-16-BA+2.0 mg·L-12,4-D+0.1 mg·L-1 NAA,光照12 h·d-1诱导40 d,愈伤诱导率为96%;叶片形成的愈伤组织分化率极低,分化率随6-BA浓度升高而升高,愈伤组织分化最适培养基为MS+0.1 mg·L-1 NAA+2.0 mg·L-16-BA,分化率为10%;最适生根培养基为1/2 MS+0.1 mg·L-1 NAA,生根率为88.89%。     

羊踯躅嫩茎离体培养和植株再生

本研究以羊踯躅嫩茎为外植体,应用均匀设计法筛选其最适合的嫩茎基部直接再生芽苗和生根培养基.结果表明,最适合羊踯躅嫩茎基部直接再生芽苗的诱导培养基为:1/4DR+ 2ip3.75 mg/L+IAA 0.03 mg/L+KT 1.30 mg/L,诱导率为99.8％;生根培养基为:1/4DR+ZT 0.06 mg/L+ NAA 0.02 mg/L,生根率达99.0％以上.以再生植株茎节为材料进行快繁的结果表明,在28 d的培养周期内,每段增殖倍数平均达5以上.成功建立了羊踯躅的离体培养和植株再生体系,所建立的植株再生体系可以满足羊踯躅工厂化育苗的需要.     

辽东楤木的离体培养及植株再生研究

以MS为基本培养基,通过调节6-芐氨基嘌呤(6-BA)、3-吲哚丁酸(IBA)、1-萘乙酸(NAA)、3-吲哚乙酸(IAA)等4种生长素的配比和浓度,成功地用组织培养的方法获得辽东楤木茎尖、茎等部位诱导产生的愈伤组织和再生植株,结果表明:辽东楤木离体培养的愈伤组织诱导、分化成苗和分化生根的最佳激素配比为NAA0.01mg·L-1+6-BA0.5mg·L-1、NAA0.02mg·L-1+6-BA0.5mg·L-1和NAA0.01mg·L-1+IBA1.5mg·L-1,应用该技术体系的愈伤组织诱导率、分化率和再生植株成活率分别为94%、22.5%、98%,该技术体系为国内外同类研究的首次报道。     

白鹃梅的离体培养及植株再生试验

【目的】探讨不同植物生长调节剂对白鹃梅芽苗再生和生根的影响,为白鹃梅的开发利用、工厂化育苗及遗传育种研究奠定基础。【方法】以白鹃梅的嫩茎段为外植体,接种前用1g/L的HgCl2溶液对材料进行不同时间(6,8,10,12min)的消毒处理,筛选适宜的消毒时间;采用均匀设计法,将无菌外植体接种在附加有不同质量浓度植物生长调节剂(0,0.5,1.0,1.5和2.0mg/L 6-BA,0,0.1,0.3,0.5和0.7mg/L NAA)的MS培养基中,筛选诱导直接再生芽苗的适宜培养基;将直接再生芽苗接种在附加有不同种类和质量浓度植物生长调节剂(0.1,0.3,0.5和0.7mg/L 6-BA,0.1,0.3,0.5和0.7mg/L IBA)的1/2MS培养基中,筛选诱导生根的适宜培养基。【结果】1g/LHgCl2溶液对白鹃梅嫩茎段的最适宜消毒时间为8min,在该条件下外植体的成活率为95.2%;白鹃梅直接再生芽苗的最适宜诱导培养基为MS+6-BA 1.0mg/L,在该培养基上直接再生芽苗的诱导率可达85.7%;生根培养基以1/2MS+0.3mg/L NAA的生根效果最好,生根率达到70.45%。【结论】获得了白鹃梅嫩茎段适宜的消毒时间及适宜的再生芽苗和生根培养基配方。     

苏丹草幼穗离体培养植株的再生技术

以苏丹草幼穗为外植体材料,研究幼穗发育期以及配比的激素组合对愈伤组织诱导发生、生长状态及其绿苗分化能力的影响。结果表明:长度为1.5~5.0 cm的幼穗,在愈伤组织诱导培养基中添加3.0 mg/L 2,4-D和0.2 mg/L KT,诱导频率达80%~90%,继代培养基中仍添加3.0 mg/L 2,4-D 0.2 mg/L KT,愈伤组织增殖速度快,且保持植株再生的能力;在愈伤组织分化培养基中添加2.00 mg/L 6-BA 0.01 mg/L NAA或添加2.00 mg/LCPPU 0.01 mg/L NAA,经继代培养3~5代的愈伤组织绿苗分化率保持在50%以上;在继代培养中选择外表呈白色、干燥、紧密、颗粒状的愈伤组织,是提高其再生植株能力的有效方法。     

海雀稗幼穗离体培养植株再生技术

海雀稗(Paspalum vaginatum Sw)具有较高的耐盐、耐干旱、耐涝和耐磨损性,作为草坪草,在世界热带与亚热带地区广为种植,是继狗牙根、结缕草和假俭草等暖季型禾草之后兴起的后起之秀[1].海雀稗在中国主要分布于台湾、云南、广东和海南等省.     

北五味子丰产株系离体培养及高效植株再生体系的建立

以北五味子新生嫩芽作为外植体,应用均匀设计法筛选其最适宜的基部直接再生芽苗和诱导芽苗生根的预处理培养基,结果表明:最适合基部直接再生芽苗的诱导培养基为ER+反式ZT2.20mg·L-1,芽苗诱导率为92%;茎段生根的预处理培养基为1/8MS+IAA0.80mg·L-1+KT0.50mg·L-1;以再生芽苗的节段为材料进行快繁,将节段在芽苗生根的预处理培养基上培养48h,取出后进行30d的砂培,其生根率达95%以上.     

高羊茅的组织培养与植株再生

以“猎狗5号”、“上农矮生高羊茅”和“98-19”3份高羊茅(FestucaarundinaceaSchreb.)品种为供试材料,成熟种子胚为外植体,在MS基本培养基上分别添加不同2,4-D浓度,并用2,4-D分别与BA、NAA不同配比进行愈伤组织诱导与分化试验。结果表明:2,4-D浓度对愈伤组织的诱导起决定性作用,9mg.L-1为较佳诱导浓度;BA对于愈伤组织诱导有负作用,与不添加BA的处理相比,愈伤组织诱导率降低了20%;NAA有利于减少根毛,改善愈伤质量。愈伤组织分化以MS+BA2.0mg.L-1较为合适。     

贯叶连翘茎段和叶片的离体培养及植株再生研究

以贯叶连翘的叶片和茎段作为外植体,培养在含有不同种类及浓度激素的MS基本培养基上,进行愈伤组织、丛生芽、根的诱导实验,并进行试管苗的移栽。结果表明,2,4-D有利于贯叶连翘愈伤组织的形成;加有6-BA0.5mg/L的MS培养基最适合丛生芽的形成;诱导生根较好的培养基是MS IBA0.5mg/L NAA0.5mg/L和MS IBA1.0mg/L。     

黄瓜子叶节离体再生体系的研究

以6个品系的欧洲温室型全雌系黄瓜子叶节为材料,比较了不同激素组合,苗龄,切割方式和基因型,从而建立了简单快速高效的黄瓜离体再生体系。结果表明:在MS+BA1.5mg·L-1+IAA0.2mg·L-1上启动培养3d为最佳芽启动培养方式,再转入最佳芽诱导培养基MS+TDZ0.02mg·L-1。10d苗龄的子叶节出芽率最高,保留两片子叶各切除1/3为最佳切割处理方式,六种基因型均能生芽,且每外植体出芽数均较高达1.93～3.15。整个过程从种子萌发到驯化移栽,仅需8周。     

不同培养条件下长寿花叶片再生体系的构建

以长寿花粉红色品种离体叶片为外植体,探讨了基本培养基、暗培养以及不同植物生长调节剂组合对不定芽再生的影响。结果表明,基本培养基以MS最为合适,以1/2MS BA2.0mg/L NAA0.1mg/L可以使粉红色品种的叶片不定芽的再生率高达5.2,暗培养15天可以将叶片的不定芽再生率提高到5.47。生根培养用1/2MS IBA0.1mg/L最好。     

马蹄金下胚轴离体培养与植株再生

探讨了马蹄金（Dichondra repens Forst.）下胚轴离体培养的方法。在黑暗条件下种子萌发培养无菌苗，可迅速获得大量下胚轴，然后将下胚轴接种到MS 0.2mg/L2，4-D 0.5mg/L6-BA中可迅速获得大量愈伤组织，再用B5 2mg/L6-BA 0.2mg/Lα-NAA作分化培养基出苗数效果较好。     

太白米离体愈伤组织诱导及植株再生

探讨了外植体类型及植物生长调节剂对太白米愈伤组织诱导的影响、植物生长调节剂对不定芽分化及生根的影响,初步建立了再生植株培养方案。结果表明：不同类型的外植体均可诱导出愈伤组织,但诱导率有显著差异,以鳞叶为外植体诱导愈伤组织的诱导率最高,为90．5％,最适培养基是MS＋0．5 mg· L-1 NAA;愈伤组织在MS＋0．1 mg· L-1 NAA的培养基上增殖效果较好。诱导分化不定芽阶段以 MS＋0．1 mg· L-1 TDZ培养基的诱导率最高,可达89．8％;最适培养基是MS＋1．0 mg· L-16-BA＋0．1 mg· L-1 NAA。诱导生根最适培养基是1/2MS＋1．0 mg· L-1 NAA,诱导率最高,可达91．4％。     

长寿花叶盘离体培养及植株高效再生研究

以长寿花叶盘做为外植体进行再生体系的建立,通过一定的激素组合诱导,结果表明MS 6-BA2.0mg/L NAA0.5mg/L组合愈伤组织诱导率可达86.6%,再生率达83.3%,外植体叶盘的摆放方式也对再生有显著影响,叶盘叶面向上放置,有利于其再生,反之不利于再生。加入AgNO3(4.0mg/L)溶液,对芽苗的分化有影响,再生苗开瓶练苗一周后容易生根,移苗入土后生长正常。     

马齿苋的组织培养和植株再生

用马齿苋的幼嫩叶片和茎段建立了马齿苋组织培养及植株再生系统。最适愈伤组织诱导培养基为MS 6-BA 0.5 mg/L 2,4-D 0.5 mg/L或2,4-D 1.0 mg/L,愈伤组织诱导率均可达100%。将生长良好的愈伤组织块转入分化培养基中以诱导不定芽的分化,其最适分化培养基为MS 6-BA 4.0 mg/L NAA 0.2 mg/L,分化率达到87.5%。再生苗在1/2MS IBA 2.0 mg/L的培养基上诱导生根,经过15d培养,100%生根成苗。     

窄冠白杨组培快繁与再生体系的建立

 以窄冠白杨为试材,对其组培快繁与再生体系的建立进行了初步的研究。研究表明,抗氧化剂聚乙烯吡咯烷酮（PVP）和抗坏血酸（Vc）能有效降低外植体的褐化;该品种外植体增殖的最适培养基为1/2MS+BA0.3mg/L+NAA0.05mg/L,平均分化率为87%,增殖系数达7.5倍,与其它处理组合均呈极显著差异。硝普钠（SNP）12mg/L极显著地促进叶片不定芽分化,其再生频率与再生芽个数分别达到96.5%与8.2。窄冠白杨适宜的生根培养基为1/2MS+IBA0.3mg/L。     

“凤丹白”胚离体培养和植株再生研究

以牡丹品种"凤丹白"的胚为外植体,研究了层积时闻、基本培养基、植物激素等因素对胚愈伤组织的诱导及不定芽分化的影响.结果表明:40天层积时间对胚萌发的效果最好.MS+Ca2+2 mg/L2,4-D+30 g/L蔗糖是胚诱导愈伤组织的最佳培养基,诱导率为85%;MS+Ca2+1.0mg/L6-BA+0.5 mg/L2,4-D+20g/L.蔗糖是诱导不定芽发生的最佳培养基;高约1.5cm的不定芽转入生根培养基,生根率可达80%.