芜菁花叶病毒侵染对不结球白菜光合及荧光特性的影响

以不结球白菜矮脚黄和短白梗为试验材料,探讨芜菁花叶病毒侵染对其光合及荧光特性的影响。结果表明:感染芜菁花叶病毒后,矮脚黄叶绿素的含量、净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)、胞间CO2浓度(Ci)、蒸腾速率(Tr)均显著降低,而短白梗各个参数下降幅度均不显著;2个品种的PSⅡ有效光化学量子产量(Fv′/Fm′)和最大光化学量子产量(Fv/Fm)降低幅度较小;矮脚黄的PSⅡ实际光化学量子产量(φPSⅡ)、表观光合电子传递速率(ETR)和光化学猝灭系数(qP)均显著降低,而短白梗则降幅较小;非光化学猝灭系数(qN)矮脚黄显著升高,而短白梗升高不明显。     

不结球白菜抗芜菁花叶病毒基因的遗传分析及SSR标记

为了找到与不结球白菜抗芜菁花叶病毒(TuMV)基因连锁的分子标记,采用群体分离分析法(BSA法)和SSR标记进行了与抗病基因连锁标记的筛选。通过对亲本、F1、BC1和F2群体进行病毒接种,研究了试验材料对TuMV的抗性遗传模型,结果表明:不结球白菜对TuMV的抗性由显性单基因控制。通过SSR引物筛选,得到在双亲间稳定表现多态性的引物54对。用这些引物筛选抗感池,得到1个与芜菁花叶病毒抗病基因连锁的SSR标记Ra3E05,连锁距离为8.7 cM。将该标记测序,得到1条184 bp的序列,根据该序列重新设计引物,将SSR标记转化为序列特异扩展区城(SCAR)标记SCRa2,用F2群体对其验证,带型与原SSR标记表现一致,可用于分子标记辅助育种。     

不结球白菜感染芜菁花叶病毒后4种防御酶活性变化及其抗病相关性

以4个不同抗性的高代自交系品种003-R-5、Y3-R-2、109-S-8、003-S-13为试材,研究了不结球白菜对芜菁花叶病毒的抗性与超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、多酚氧化酶(PPO)活性变化的关系,并通过苗期接种观测不同时期叶片中4种酶的活性,结合病情指数作简单线性回归分析.结果表明,抗病品种健康植株的SOD活性低于感病品种,CAT、PAL、PPO活性则高于感病品种.接种病毒后各品种的4种防御酶活性较对照明显升高,抗病品种对病毒表现出较高的敏感性,酶活性明显高于感病品种.相关性分析表明,抗病性与接种病毒后酶活性变化幅度关系密切,4种防御酶均与抗病性呈正相关,其相关系数分别为0.776 0、0.959 1、0.977 4、0.999 1,其中PPO活性与抗病性达到极显著水平,接种后第8天PAL活性与抗病性呈显著正相关(r=0.937 5).     

不结球白菜抗芜菁花叶病毒蛋白BcTuRsO的生物信息学分析

采用生物信息学方法,利用多种在线软件对不结球白菜抗芜菁花叶病毒(TuMV)蛋白BcTuRsO的系统进化、理化性质、亲水性、跨膜区、亚细胞定位、所含模体及蛋白质结构进行预测和分析。系统进化树分析结果表明,该蛋白在不同物种之间具有保守性。理化性质分析结果显示该酶含194个氨基酸,分子量为21 731.3,理论等电点pI值为6.60。TMpred跨膜分析结果显示,它含有1个显著的跨膜螺旋区,这个区域与ProtScale预测的疏水区基本重叠。用Target P server和WOLFPSORTserver程序预测该蛋白为细胞质蛋白。结构域分析结果显示该蛋白含多种磷酸化位点。二级结构以α-螺旋和随机卷曲为主。     

不结球白菜耐高温胁迫与内源激素含量的关系

在用隶属函数值综合评价8个不结球白菜品系不同耐热性的基础上,进一步在昼/夜温度设置分别为32℃/22℃、36℃/28℃人工模拟高温胁迫条件下(以20℃/12℃为对照处理),测定了8个品系ABA、GA3、IAA和Z ZR内源激素的含量。结果表明,在32℃/22℃和36℃/28℃处理下,各种内源激素的绝对含量和相对含量品系间有显著差异。相关分析表明,在32℃/22℃高温胁迫下,ABA、GA3、IAA的绝对含量均与品系的耐高温胁迫(隶属函数值)有显著或极显著的相关性(rABA=0.844 4**,rGA3=0.735 5*,r℃高温胁迫更有利于从内源激素水平上体现出不同品系的耐热性差异;36℃/28℃处理条件下,Z ZR的相对含量与不结球白菜的耐热能力存在显著的负相关性(r=-0.756 5*);在两个高温处理下,GA3的绝对含量与相对含量均与不结球白菜的耐热能力存在显著的相关性,而36℃/28℃处理下GA3的绝对含量与耐热性间达极显著相关(r=0.967 2**)。     

不结球白菜谷胱甘肽还原酶基因NhccGR1的克隆与表达分析

利用cDNA-AFLP技术,从芜菁花叶病毒(TuMV)侵染的不结球白菜(Brassica campestris ssp.chinensis Makino)幼叶中分离到1条编码谷胱甘肽还原酶的基因片段,通过电子克隆得到其cDNA全长为1 503 bp,编码501个氨基酸,命名为Nhc-cGR1。对该基因进行生物信息学分析,并利用实时定量PCR研究其在TuMV侵染和水杨酸(SA)、茉莉酸(JA)、乙烯(ET)诱导下的表达情况。结果表明:该基因作为病原相关基因参与了TuMV病害响应,并通过增加自身表达量来激活细胞内的信号转导途径,诱导各种防卫反应相关基因的表达;同时,SA和JA抑制该基因的表达,外施ET能诱导其正向表达。     

镉在不结球白菜中的积累及外源脱落酸对镉积累的影响

采用溶液培养的方法,研究了镉(Cd)和脱落酸(ABA)对不结球白菜幼苗生长以及Cd积累的影响。结果表明,10μmol·L-1Cd处理显著抑制不结球白菜幼苗的干物质积累,降低不结球白菜叶片的净光合速率、蒸腾速率、气孔导度、PSⅡ最大光化学效率、PSⅡ光合电子传递量子效率、电子传递速率和光化学猝灭系数,增加不结球白菜叶片的非光化学猝灭系数。5μmol·L-1ABA处理对不结球白菜地上部干物质的积累及净光合速率没有显著影响,但降低了不结球白菜的根系干重、叶片的蒸腾速率和气孔导度。而在100μmol·L-1Cd胁迫下,外源ABA处理明显增加不结球白菜根系Cd含量,降低Cd向地上部的转运能力,降低不结球白菜地上部Cd含量。试验结果还显示:不结球白菜地上部Cd含量占总Cd含量的百分比与叶片蒸腾速率呈显著正相关。     

不结球白菜抗病育种的研究：Ⅳ.不结球白菜抗芜菁花叶病,霜…

选取８４份经芜菁花叶病毒，霜霉病菌」Ｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａ ｐａｒａｓｉｔｉ ａ（Ｐｅｒｓ．）Ｆｒ。」黑斑病菌「Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ ｂｒａｓｓｉｃａｅ （Ｂｅｒｋ）Ｓａｃｃ．」单抗鉴定后筛选出的自交系，于１９９２－１９９３年对其上述３种病害苗期人工诱发接种多抗性联合鉴定，获得２１份三抗材料。经鉴定，确认为三抗抗源材料。探讨了多抗性联合鉴定的技术与方法。     

高温对不结球白菜幼苗光合特性的影响

[目的]探讨不结球白菜的高温胁迫机制。[方法]采用基质培养的方法,研究温度对不结球白菜幼苗光合作用的影响。[结果]在高温胁迫下,叶绿素a、叶绿素b和叶绿素a/b和净光合速率随着温度的升高而降低;气孔导度随温度的升高,变化不明显;细胞间CO2浓度和蒸腾速率,随着温度的升高,呈上升趋势。[结论]高温胁迫可抑制不结球白菜幼苗的光合作用;净光合速率的降低与非气孔因素有关。     

青菜和芥菜感染芜菁花叶病毒(TuMV)后的光合特性变化

研究了青菜(Brassica chinensis L. cv. Suzhou)和芥菜(B. juncea L. cv. Wenzhou)受芜菁花叶病毒(TuMV)侵染后的光合特性变化.结果表明:感病青菜和芥菜的叶绿素含量、净光合速率、气孔导度与健康对照相比出现了不同程度的下降,胞间CO2浓度也有所下降;叶绿体的电子传递活力尤其是光系统Ⅱ (PSⅡ)电子传递活力显著下降.叶绿素荧光动力学参数测定显示,感病青菜叶片的Fv/Fo和Fv/Fm值明显降低,而感病芥菜的叶片Fv/Fo和Fv/Fm值受影响程度较轻.根据以上结果认为,TuMV对两种寄主植物的光合作用均造成了伤害,并且对PSⅡ的伤害程度大于PSⅠ.     

LED光源不同光质对不结球白菜生长及生理特性的影响

采用发光二级管(LED)调制光质和光量,研究不同光质处理(白光(CK)、红光(R)、蓝光(B)、黄光(Y)、红蓝黄配比光(R∶B∶Y)=7∶2∶1、5∶4∶1和1∶8∶1)对不结球白菜生长发育及生理特性的影响.结果表明:在单色光质处理下,红光有利于不结球白菜根系生长,提高类胡萝卜素含量、可溶性糖含量及根系活力,蓝光有利...     

中国小麦花叶病毒(CWMV)侵染条件下小麦内参基因的选择

实时定量PCR(qRT-PCR)是分析功能基因表达水平的常用方法之一,qRT-PCR数据统计分析离不开合适内参基因的选择。为了选择中国小麦花叶病毒(Chinese wheat mosaic virus, CWMV)侵染条件下的小麦内参基因,本实验通过PCR扩增效率和扩增特异性分析,从10个持家基因中选择8个候选基因,然后以接种CWMV的小麦样品为材料,利用qRT-PCR技术进一步检测上述8个基因在CWMV侵染条件下小麦样品中的时空表达特性。基于这些数据,通过geNorm、NormFinder程序分析,结果表明,2个小麦基因(即26S和CDC)在CWMV侵染前后以及不同组织中表达最为稳定,26S和CDC组合可选作CWMV与小麦互作过程中功能基因表达分析的内参基因。     

Active oxygen metabolism in the floral buds and leaves of the new cytoplasm male sterile (CMS) line and its maintainer line of non-heading Chinese cabbage

The cytoplasm male sterile (CMS) line and its maintainer line of the newly-bred non-heading Chinese cabbage were taken as experimental materials. The production rate of superoxide anion radical (O₂ ⁻), contents of malondialdehyde (MDA) and hydrogen peroxide (H₂O₂), and the activities of superoxide dismutase (SOD), peroxidase (POD), catalase (CAT) as well as ascorbate peroxidase (APX) were determined in buds of different developmental stages and leaves during vegetative and florescence stages. As showed by the results, there were higher levels of MDA and H₂O₂ contents, higher O₂ ⁻ production rate and higher activities of SOD, POD, and CAT in the buds of the CMS lines than that in the buds of the fertile lines, while the APX activity was different from the other three enzymes above. There were differences in activities of protective enzymes in leaves but no significant differences in MDA contents and O₂ ⁻ production rate, which showed that the differences in metabolism of active oxygen between CMS and its maintainer were mainly apparent in reproductive organs. __________ Translated from Journal of Nanjing Agricultural University, 2006, 29(1): 18–22 [译自: 南京农业大学学报]     

芦丁和IAA对绿豆黄化幼苗伸长的影响及对相关基因的RT-PCR

就芦丁(20~100μg/mL)、IAA(0.5~2.0μg/mL)及芦丁(40μg/mL)加IAA(0.5~2.0μg/mL)对绿豆黄化幼苗伸长的影响进行了研究.结果表明,芦丁对黑暗中生长的绿豆黄化幼苗下胚轴和胚根的伸长均有抑制作用,添加IAA促进了这种抑制作用.RT-PCR扩增产物的分析表明,绿豆黄化幼苗经芦丁和IAA分别处理或混合处理之后,其体内吲哚氨基酸水解酶基因、吲哚-3-甘油磷酸合成酶基因及查尔酮合成酶基因的表达在不同处理间表现出差异和多态性,芦丁处理后,其吲哚-3-甘油磷酸合成酶基因不表达.不同的RNA提取程序的比较认为,异硫氰酸胍有助于绿豆黄化幼苗RNA的提取.RT-PCR反应中不同退火温度的比较显示,较高的退火温度(60℃)有助于特异性扩增.     

不结球白菜胞质雄性不育新种质花蕾和叶片中活性氧代谢的变化

对新育成的不结球白菜雄性不育系及其保持系不同发育阶段的花蕾和营养生长期及盛花期叶片中的活性氧（O2^.-）水平、丙二醛（MDA）含量及抗氧化酶活性进行了比较。结果表明：与保持系花蕾相比,雄性不育系花蕾中O2^.-产生速率、H2O2及MDA含量较高,超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、过氧化物酶（POD）活性也较高,但抗坏血酸过氧化物酶（APX）活性变化与上述3种酶不同。叶片中虽有保护酶活性的差异,但O2^.-产生速率、H2O2和MDA含量差异不显著。说明不育株与可育株的活性氧代谢的差异主要存在于生殖器官中。     

壳聚糖包衣对大白菜幼苗素质及内源IAA和GA含量的影响

对大白菜夏秋品种夏阳白种子进行壳聚糖包衣处理,研究了壳聚糖对大白菜幼苗素质及内源IAA、GA含量的影响。结果表明:壳聚糖可以促进苗期幼苗素质,增加株重、根长和最大叶面积,提高幼苗内源激素IAA和GA的含量。指出幼苗内源IAA、GA水平的提高可能是壳聚糖促进大白菜生长的主要原因。     

外源ABA对木薯叶片内源激素及淀粉合成相关基因的影响

在盆栽条件下,用外源脱落酸(Abscisic acid,ABA)处理块根形成期的木薯品种,测定处理及对照在不同时刻叶片中ABA等激素变化、ABA合成与失活以及淀粉合成途径关键基因的表达变化。结果表明:1)正常条件下木薯叶片内源ABA水平及ABA合成途径基因均存在明显的夜间低而白天较高的昼夜节律,ABA信号转导相关基因也表现出下午的高峰表达,它们与淀粉合成途径基因的夜间表达一般具有相反的趋势。2)ABA处理后,木薯叶片内源ABA含量迅速下降,与观察到的ABA合成途径基因表达下降与后期ABA失活基因激活表达相一致,同时发现细胞分裂素中的玉米素核苷(Zeatin riboside,ZR)和生长素(Indole acetic acid,IAA)水平发生改变,预示木薯具有迅速恢复ABA平衡态的机制,并且与其他类激素存在协同作用。3)与此同时,外源ABA处理明显抑制淀粉合成上游基因表达,特别是夜晚高峰期的表达,而对下游基因的抑制相对较小。说明这些基因及相关酶类不同程度受到ABA的调控;ABA明显倾向于调控淀粉合成上游相关基因;外源ABA处理改变了叶片临时淀粉合成速率。