木本植物老根老叶总RNA的提取方法

对于含有大量多糖、酚、酯、萜类等其他二次代谢产物的木本植物的老根和老叶,要从它们的组织中提取高质量的RNA一般都比较困难.以小叶杨的老根、麻黄的老根、沙冬青的老叶、梭梭老根为材料提取出质量比较好的RNA.     

木本植物组织总RNA提取的要点与原理

根据提取木本植物组织RNA时所获得的知识和经验，对木本植物组织总RNA提取时所遇到的提取产量低、RNA降解、多酚物质干扰、DNA干扰、多糖干扰、蛋白质干扰及杂质干扰等问题进行了探讨，并提出了具体的解决方法。同时，对各种常用的RNA提取方法进行了分类，并对它们的原理及优劣进行了论述与评价。     

一种适用于地黄不同组织器官的RNA提取方法

在药用植物中开展分子生物学研究时的常见困难是RNA提取困难,提取的RNA质量不能满足下一步试验要求。探索了一种适用于地黄不同组织器官的RNA提取方法并对提取的RNA质量在随后的分子生物学中进行了检验。结果证实通过该方法提取的RNA纯度和完整性较好,完全可以满足后续的分子生物学实验要求,也可以作为其它药用植物RNA提取的参考方法。     

一种木本植物RNA和DNA的简捷提取方法

将尾叶桉(Eucalyptus urophylla)叶片在液氮中研磨成粉,先用含山梨醇、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、牛血清白蛋白、聚乙二醇和亚精胺的提取缓冲液使总核酸沉淀,同时去除了大部分次生代谢物质。然后用山梨醇、月桂酰肌氨酸钠进一步裂解细胞,释放核酸。再用CTAB与核酸结合成复合物溶于高盐溶液。用氯仿/异戊醇除蛋白质后,离心得含总核酸的上清液。运用钙盐分步沉淀法,先在上清液中加入1/10体积的10%氯化钙溶液,使DNA与Ca2+结合成DNA钙盐。向溶液中加入1/5体积的乙醇,使DNA钙盐形成沉淀析出,离心得DNA后,再增大乙醇浓度使RNA钙盐沉淀。得到的DNA和RNA用非变性琼脂糖凝胶进行质量检测,可得完整的RNA和DNA条带。此法经济、快捷,可同时得到DNA和RNA。     

3种杜仲枝叶总RNA提取方法的比较

采用改良过的CTAB - LiCl法、RNApure Plant Kit法和RNAiso Plus法分别提取杜仲枝叶总RNA,以期筛选出适于杜仲枝叶高质量总RNA提取方法;用琼脂糖甲醛变性凝胶电泳检测总RNA的完整性,以紫外分光光度计检测总RNA的纯度和得率.结果表明,改良过的CTAB - LiCl法和RNApurePlant Kit法提取的RNA完整性好,纯度高,RT - PCR可获得目的基因cDNA片段;RNAiso Plus法得到的RNA降解严重,纯度低.改良过的CTAB - LiCl法和RNADure Plant Kit法提取杜仲枝叶总RNA完全能满足后续的RT - PCR和RACE等分子生物学研究.     

杜仲树皮总RNA提取方法的比较

[目的]从杜仲树皮中获得高质量的总RNA。为开展杜仲后续mRNA分离、杜仲抗真菌蛋白基因克隆、及杜仲树皮cDNA文库构建等研究奠定基础。[方法]以杜仲树皮为材料,分别采用改良CTAB-LiCl法、RNApure Plant Kit法和RNAiso Plus法进行总RNA提取,用琼脂糖甲醛变性凝胶电泳检测总RNA的完整性,用紫外分光光度计检测总RNA的纯度和得率。[结果]改良CTAB-LiCl法和RNA-pure PlantKit法提取的杜仲树皮总RNA纯度和完整性较高,A260/A280值均在1.800~2.000,28和18 SrRNA条带清晰,RNA得率较高;而RNAiso Plus法提取的杜仲树皮总RNA的纯度和完整性较低,A260/A280值为1.652,28S和18S rRNA条带存在降解和弥散现象,RNA得率低。[结论]改良CTAB-LiCl法和RNApure Plant Kit法抽提获得的杜仲树皮总RNA质量较高,能满足后续RT-PCR和RACE等试验的要求,这为成功克隆杜仲相关基因奠定了基础。关键词杜仲树皮;RNA提取;方法;比较     

一种改进的鸭梨总RNA提取方法

本文介绍了一种适应于鸭梨RNA提取的方法。该方法是在常规CTAB法的基础上,在植物匀浆中缓缓加入100%的乙醇2.5 ml,消除了梨皮中DNA、多糖、多酚和其它次生代谢物的污染,提取得到了高纯度、完整性较好的RNA,得到的RNA量大约是改进前的2倍,且上样孔无糖类物质干扰。该方法适合于富含多糖、多酚的植物RNA的提取,试剂简单经济,实验结果稳定。     

植物组织RNA的几种提取方法

以白菜叶为试材，用常用的异硫氰酸胍法、尿素法及Tris-硼酸法，比较其提取RNA的质量和纯度。结果表明异硫氰酸胍法提取RNA的质量好、纯度高、提取效率高；尿素法提取RNA成本低、RNA质量也较高；而Tris-硼酸法则较适合于酚类物质含量的材料RNA的提取，其RNA的产率较高。     

一种有效的葡萄叶片总RNA提取方法

RNA的提取技术是现代分子生物技术的基础,植物RNA的提取比较困难.实验以新鲜的葡萄叶片为材料,采用SDS、CTAB相结合的方法,进行酚/氯仿的提取,消除了DNA及植物中较多的多糖、多酚等污染,提取到较纯净的总RNA,此方法适合于葡萄叶片总RNA的提取,试剂简单经济,实验结果稳定,重现性强.     

一种改良的真菌总RNA提取方法

以棉花黄萎病菌株VD8为试材,利用改良的CTAB提取RNA方法,应用LiCl选择性沉淀RNA,减少沉淀时间,在醋酸钠条件下用异丙醇祛除多糖,结果表明,利用该方法从富含多糖的黄萎病菌菌丝中获得了质量较好的总RNA,缩短了提取时间。     

草坪植物RNA提取方法的比较研究

用CTAB法、SDS法、快速SDS法、异硫氰酸胍法、Tris-硼酸法和Trizol一步法等6种方法．分别从草坪植物草地早熟禾（Poapratensis L．）、高羊茅（Festuca arundinacea Schreb．）以及马蹄金（Dichondra repens Forst．）叶片中提取总RNA．并比较各种方法提取RNA的质量。结果表明，由异硫氰酸胍法、SDS法和Tris-硼酸法3种方法获得的RNA纯度较低，存在降解和弥散现象，或混杂的DNA、蛋白质较多，效果均不理想；而用CTAB法、快速SDS法和Trizol试剂盒提取的RNA很少有降解．所得的28SrRNA和18SrRNA条带十分清晰．且D260／D280在1．871至2．021之间。快速SDS法是一种从草坪植物中有效提取高质量RNA的方法．在完整性、纯度、产率上均优于其他几种方法。     

富含多糖·多酚植物组织RNA的提取

[目的]介绍一种适合于富含多糖、多酚植物材料的RNA提取方法。[方法]采用改进的异硫氢酸胍法提取植物材料的RNA,用紫外分光光度计测定其浓度和纯度,并通过RT-PCR进一步检测其质量。[结果]提取总RNA中的28、18、5s条带清晰,比例适中,OD260nm/OD280nm。为1．8—2．0。以提取的总RNA反转录合成的cDNA为模板,能扩增出预期长度的片段,无非特异性产物。[结论]该方法简便易行,成本较低,适合于富舍多糖、多酚植物材料的RNA提取。     

火地塘林区木本植物区系研究

火地塘有木本植物83科，206属，524种（合种下等级）。区系分析表明，该地区以温带成分为主，占总尾数的63．69％，热带成分占30．36％；稀有濒危植物、单种属、少种属、中国特有属均占较大比重，说明其历史起源的古老性；各类地理成分复杂、联系广泛，分布交错，具有明显的由暖温带向亚热带过渡的特征。     

木本植物抗旱性研究进展

从植物的形态结构、基础物质、活性氧代谢和内源激素等方面阐述了干旱影响木本植物的研究进展,并提出了该领域研究中存在的问题和以后的研究重点,为抗旱性木本植物应用于生产以及进一步深入地研究木本植物的抗旱性提供了理论依据。     

哈尔滨城市人工林木本植物的多样性

采用样地网格调查方法与多样性指数分析方法,定量评价了哈尔滨城市人工林在维持木本植物多样性方面的作用,并通过分析林分更新层、演替层、主林层的多样性指数,探讨了城市人工林自然化过程及其近自然经营途径,以便为哈尔滨城市森林经营与生物多样性保护提供依据。结果表明:哈尔滨城市人工林经过40余年的发展,其林分由11～16种木本植物所组成,其中乔木6～9种,灌木4～7种,存在着明显的自然化过程;不同城市人工林类型在维持木本植物多样性作用方面存在着较大的差异性,其多样性指数(0.8282～2.3411)由高到低排序为兴安落叶松林>樟子松林>白桦林>黄檗林>水曲柳林>胡桃楸林;城市人工林木本多样性指数仅相当于相应区域天然次生林的47.0%(24.0%～67.8%),表明其自然化程度不如天然次生林强烈。同时指出,对城市人工林应采取近自然化的经营模式,即保持城市人工林的树种组成结构和垂直层次结构,以维持其生物多样性与自然演替过程。     

木本能源植物黄连木研究进展

介绍了前人对黄连木生物生态与生理学特性、繁殖与栽培技术、病虫害防治等的研究工作;概述了黄连木的药用价值、用作工艺良材及阿月浑子砧木等用途;并对进一步的研究方向进行了论述.     

哈密市木本园林植物多样性

为指导哈密市园林景观植物合理搭配,以哈密市的木本园林植物为研究对象,对其物种组成、生活型以及物种来源等进行了分析研究。结果表明:哈密市木本园林植物共35科66属168种,物科属较丰富,种相对匮乏;优势科为蔷薇科、杨柳科、木樨科等;生活型组成中乔木种类灌木木质藤本;引进植物种类与乡土植物的种类比例约为2∶1。未来研究区景观规划和管理中建议根据当地立地条件和特色景观要求,将乡土观赏植物作为骨干,增加其种类和灌木比例。此外,通过适当改造景观结构,以保持较高的物种多样性,改善生态功能。     

四个树种在干旱下的生理适应性研究

研究了盆栽的山桃、山杏、柠条、沙棘四个树种的苗木,在人工控制土壤含水量条件下,对干旱适应过程中水分状况的变化。结果表明:四个树种可以通过自身蒸腾调节水分平衡。叶片含水量的下降,主要是自由水的丧失,而束缚水明显增加;在严重干旱下其叶绿素仍十分稳定。证明它们对干旱适应能力很强。