使用酶联免疫吸附法测定饲料中三聚氰胺的研究

<正>三聚氰胺[C3N3(NH2)3]是一种有机化工原料,俗称"蛋白精",常温下为一种无毒无味的白色结晶粉末。三聚氰胺添加到饲料中可以冒充蛋白质,少量添加即可大大提高蛋白含量。因为每个三聚氰胺分子中都含有6个氮原子,而在原料的粗蛋白检测过程中,用浓硫酸消化这一过程可以将三聚氰胺分解掉,这样在最后的计算中,三聚氰胺中的氮原子即可拉高粗蛋白的比率,造成蛋白含量虚假增高。在饲料中添加三聚氰胺是属于违规行为。     

饲料中三聚氰胺的检测

三聚氰胺简称三胺,学名三氨三嗪,是重要的氮杂环有机化工原料,在饲料工业中作为粘合剂使用。目前国际上通常采用凯氏定氮法测定饲料中粗蛋白质的含量,即求出氮的含量,再乘以一定的换算系数（通常用6．25系数计算）得出蛋白质含量。由于三聚氰胺分子中含有大量氮元素,每个三聚氰胺分子中都含有6个氮原子,而在原料的粗蛋白检测过程中,用浓硫     

饲料中三聚氰胺的检测方法

<正>三聚氰胺(melamine)简称三胺,学名三氨三嗪,是一种重要的氮杂环有机化工原料,在饲料工业中作为粘合剂使用。目前国际上通常采用凯氏定氮法测定饲料中粗蛋白质的含量,即求出氮的含量,再乘以一定     

饲料中盐酸克伦特罗快速测定-酶联免疫吸附测定方法

盐酸克伦特罗(clenbuterol)，商品名称为克喘素、息喘宁、舒喘宁、平喘素、安喘素、瘦肉精等，是一种人工合成的选择性β2-肾上腺素受体激动剂。临床用于防治支气管哮喘和支气管痉挛，且具有调节动物神经兴奋及其体内营养素重分配的功能。70年代美国人将之作为“促生长剂”和“营养重分配剂”引入禽畜生产，确实起到了改善动物肉质品质，     

酶联免疫法检测饲料中的三聚氰胺

三聚氰胺(C3H6N6),俗称蛋白精,常被用作化工原料,属于非蛋白质含氮化合物,进入人和动物体内难代谢,能导致肾衰竭、结石,诱发泌尿系统疾病甚至死亡[1]。但由于其含氮量高达66.67%[2],而常用的饲料蛋白质测试方法——凯氏定氮法是通过测出含氮量乘以6.25来估算蛋白质含量,添加三聚氰胺会使蛋白质测定结果虚高[3],从而可使劣质饲料蒙混过关。动物食用掺有三聚氰胺的饲料后,在其体内造成残留,进而威胁人类的食品安全。近年来,三鹿奶粉事件以及美国的数起饲料致死宠物的事件,     

酶联免疫吸附法在饲料安全检测中的应用

酶联免疫吸附法是一种简便、快速、准确性较高的免疫化学检测方法,其原理是利用固相吸附与免疫酶技术结合使用以进行相应的抗原或者抗体的检测。目前我国饲料安全问题较多,其中饲料成分中的有毒、有害、禁止使用的药物或者添加剂等不确定性会给畜禽食用带来较大危害。为此,本文介绍了我国当前饲料安全中存在的问题;简述了酶联免疫吸附法的实验原理和常用于几种成分(检测饲料中的盐酸克伦特罗、检测饲料中的沙门氏菌、检测饲料中的黄曲霉毒素)的检测;提出了在饲料不同安全问题中的检测应用以及在实验过程中应该注意的事项:对试剂及物料的条件要求,对操作步骤的条件要求。     

浅论酶联免疫吸附法在饲料安全检测中的应用

酶联免疫吸附技术作为先进的免疫化学检测技术正越来越广泛地应用于饲料安全检测。本文简要介绍了酶联免疫吸附法的原理在饲料安全检测中的运用及其试验的条件要求。     

酶联免疫吸附法在饲料安全检测中的应用

酶联免疫吸附技术是一项先进的免疫化学测定技术，目前正愈来愈广泛地应用于饲料安全检测，本文简要介绍了酶联免疫吸附法的原理在饲料安全检测中的运用及其试验的条件要求。     

酶联免疫法测定牛奶中三聚氰胺的注意事项

本文浅谈了使用三聚氰胺试剂盒,利用酶联免疫吸附试验方法测定牛奶中三聚氰胺含量时应注意的事项,分别从牛奶的储存和取样、试剂盒的选择、试剂盒的保存以及试剂盒检测时的操作步骤等几个方面进行讨论;并且将在检测过程中遇到的具体的实际问题在文章中进行讨论。     

不同稀释度对酶联免疫吸附法测定浓缩饲料中盐酸克伦特罗的影响

在用酶联免疫吸附法测定浓缩饲料中的盐酸克伦特罗时,笔者发现由于浓缩饲料成分较为复杂,且多数样品都添加有不同类型的微量元素添加剂、金属螯合剂、防霉剂、防腐剂、抗氧化剂、香味剂、甜味剂、色素及一些药物等等,使得样品在提取时不易得到纯净的待检成分,对样品进行稀释处理会导致检测结果发生偏差,出现假阳性现象,而且假阳性出现率与稀释倍数呈正相关.     

酶联免疫法检测生鲜乳中三聚氰胺的研究

用酶联免疫法对25个生鲜乳样品中的三聚氰胺残留进行检测,结果显示,离散系数小于10%,平均回收率高达97.7%,且所有生鲜乳样品的三聚氰胺含量均未超标。酶联免疫法可应用于生鲜乳三聚氰胺检测的筛选试验。     

ELISA一步法快速检测牛奶中三聚氰胺的研究

在制备三聚氰胺单克隆抗体的基础上建立了一种用于检测牛奶中三聚氰胺含量的间接竞争酶联免疫检测方法,采用一步法操作,评估了方法的回收率、准确度、精密度和特异性,并利用液相色谱―串联质谱法进行了盲样确证试验。结果显示,该方法的线性检测范围为10~810 ng/mL,灵敏度为10 ng/mL,回收率为84.0%~90.0%,同类似物交叉反应率均小于0.1%。本试验建立的ELISA一步法能满足牛奶中三聚氰胺的检测要求。     

ELISA试剂盒对饲料中霉菌毒素的检测与分析

饲料霉变产生的霉菌毒素是对饲料危害最大的天然生物性污染物,严重威胁着全世界畜禽及饲料的安全,给饲料企业及养殖业造成了极大的危害.最近的研究表明:霉菌毒素,即使检出水平只有我们过去认为的"微量"水平,也会对动物的生产性能和健康状况产生负面影响,特别是对当前高产基因品种的动物尤为如此[1,2].同时,霉菌毒素可通过畜禽产品间接威胁人类健康[3-5].因此,及时快速检测饲料中是否含有常见的几种霉菌毒素,对于保障饲料安全,预防和诊断动物疾病具有重要的意义.而酶联免疫吸附法(ELISA)检测饲料霉菌毒素具有特异性强、灵敏度高、快速简便、成本低廉的特点,为此,本试验采用ELISA试验盒对饲料中黄曲霉毒素B1(AFB1)、赭曲霉毒素A(OTA)、呕吐毒素(DON)的含量进行了检测,现将结果报告如下:     

食品及饲料中三聚氰胺检测方法的比较

介绍了国内外近年来对三聚氰胺定量检测的方法。主要涉及奶粉等乳制品及饲料中三聚氰胺的检测,包括色谱法、色谱-质谱联用法（GC—MS、LC—MS）、光谱法及免疫法等,通过分析和比较可以看出,上述典型的检测方法检测费用较高,仅限于实验室检测,难于推广,或者虽然检测费用低,但检测结果不准确,而纳米金、石墨烯等新型材料的引入,对微量的三聚氰胺检测能够更加快速、便捷、准确。     

农畜产品中三聚氰胺间接竞争ELISA检测方法的建立

利用制备的抗三聚氰胺单克隆抗体建立了间接竞争ELISA方法,采用棋盘滴定法确定最佳三聚氰胺-OVA包被浓度为1.0 μg/mL,单抗最佳稀释度为1∶1 000,最佳的封闭液为50 g/L的脱脂乳,标准曲线的线性方程为y=-15.12x+107.3(R2=0.997).批内变异系数(CV)为1.07％～5.53％,批间CV值为3.33％～11.92％,确定此方法精确度良好.利用建立的间接竞争ELISA方法,测定添加有三聚氰胺标准溶液的样品(宠物食品、小麦面筋、饲料、牛乳、鸡蛋),得到三聚氰胺在各样品中的回收率范围分别为宠物食品73.8％～84.32％,小麦面筋67.3％～88.27％,饲料70.3％～85.9％,牛乳83.47％～89.76％,鸡蛋76.2％～87.29％.确定可以利用此间接竞争ELISA方法检测样品中的三聚氰胺含量.     

水产养殖饲料黄曲霉毒素B1的ELISA快速检测

黄曲霉毒素B1(AflatoxinsAFB1)是二氢呋喃氧杂萘邻酮的衍生物,含有一个双呋喃环和一个氧杂萘邻酮(香豆素),前者为基本毒性结构,后者与致癌有关。AFB1可由黄曲霉、寄生曲霉和A.nomius产生,其理化性状稳定,可通过食物链从一种生物体转移到另一种生物体,导致人体中毒。鉴于此,欧盟规定用于动物饲料产品中AFB1最高残留限量(MRL)不能超过2.0μg/kg。基于抗原抗体特异性反应建立起来的ELISA方法,具有简单、快速、灵敏度高、处理样品量大、重复性好等特点,已成为实验室最常用的药物残留快速筛选方法之一。本实验利用荷兰E.D生产的黄曲霉毒…     

气相色谱-质谱联用法测定鸡肉中三聚氰胺

三聚氰胺(英文名Melamine),俗称蜜胺,分子式:C3N6H6,化学名称是2,4,6-三氨基-1,3,5-三嗪,是一种三嗪类含氮杂环有机化合物,重要的氮杂环有机化工原料.三聚氰胺不是食品原料,也不是食品添加剂,禁止人为添加到食品中.     

三聚氰胺检测方法的研究进展

全面分析和比较了目前三聚氰胺的检测方法,主要包括色谱检测法（高效液相色谱法、液相色谱—质谱/质谱法、气相色谱—质谱联用法和超高效液相色谱—质谱联用法）、离子色谱法、光谱检测法（拉曼光谱法、红外光谱法、近红外线吸收检测法和核磁共振法）、容量分析法（苦味酸法、升华法、电位滴定法、毛细管电泳检测法和试剂盒检测法）及其他检测方法（比色法、纳米粒子颜色法、化学发光法和浊度法）。     

饲料中三聚氰胺测定方法的比较

对饲料中三聚氰胺的两种测定方法即高效液相色谱法(HPLC)和气相色谱质谱联用法(GC-MS)进行比较分析.采用HPLC法测定三聚氰胺在1.0～50μg/mL范围内呈良好的线性关系(r2=0.9999),平均回收率为98.9%,RSD为0.4%.采用GC-MS法测定三聚氰胺在0.05～1.0μg/mL范围内呈良好的线性关系(r2-0.9965),回收率为91.0%,RSD 1.7%.结果表明,采用HPLC法测定操作简便,结果更精确,但易出现假阳性:采用GC-MS法测定操作复杂,但是确证法且定量限更低.