利用RAPD对中国热带地区疫霉菌分类的初步研究

以来自中国热带地区的2个疫霉种(柑桔褐腐疫霉P.citrophthora和芋疫霉P.colocasiae)16个菌株的菌丝体的总DNA为模板,使用5种随机引物进行PCR扩增,获得随机扩增多态性DNA(RAP- D),分析与各菌株相对应的RAPD的相似性。结果表明,RAPD 不但能辨别这2个疫霉种间的差异,而且可以辨别种内的分类单元。初步肯定了RAPD可以用于中国热带地区疫霉菌的分类鉴定     

高粱遗传图谱初探

ＲＡＰＤ（随机扩增多态性ＤＮＡ）是一种新兴的分子标记技术，本实验利用这种技术对高粱（Ｂｔｘ６２３×Ｉｓ３６２０ｃ）Ｆ８重组自交系基因组进行了分析。在３００个随机引物中２８个引物在ＰＣＲ扩增产物的电泳谱带中有差异。其中４２条扩增的多态性位点落于ＲＦＬＰ高粱遗传图谱所需添补的间隔。由此可见，利用ＲＡＰＤ增加ＲＦＬＰ高粱遗传图谱某些区域ＤＮＡ标记的数目是有效的     

高梁遗传图谱初探

ＲＡＰＤ（随机扩增多态性ＤＮＡ）是一种新兴的分子标记技术，本实验利用这种技术对高梁（Ｂｔｘ６２３×Ｉｓ３６２０ｃ）Ｆ８重组自交系基因组进行了分析。在３００个随机引物中２８个引物在ＰＣＲ扩增产物的电泳谱带有差异。其中４２条扩增的多态性位点落于ＲＦＬ扩增产物的电泳带有差异。其中４２条扩增的多态性位点落于ＲＦＬＰ高梁遗传图谱所需添加补的间隔。由此可见，利用ＲＡＰＤ增加ＲＦＬＰ高梁遗传图谱某些区域ＤＮＡ标     

RAPD标记技术的实用性及稳定性探讨

ＲＡＰＤ（随机扩增多态ＤＮＡ，ＲａｎｄｏｍＡｍｐｌｉｆｉｅｄＰｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃＤＮＡ）是建立于聚合酶链式反应（ＰＣＲ）技术之上的。它是以一系列人工合成的十聚体寡核苷酸单链为引物，对所研究的基因组ＤＮＡ进行ＰＣＲ扩增。扩增出的ＤＮＡ经琼脂糖等电泳分...     

随机扩增多态性DNA（RAPD）及其在茶叶科学领域的应用

随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）是用于作物种质资源鉴定及育种的分子标记。近年发展非常迅速，应用范围很广。本文就茶叶科学的几个方面论述了ＲＡＰＤ标记在茶叶科学研究的应用及前景：（１）茶树品种遗传连锁图谱的绘制，（２）茶叶种质资源鉴定及分类；（３）茶树目标性状基因的标记研究。     

抗真菌蛋白Rs—AFPs基因克隆与序列分析

从开花后５０－９０ｄ的萝卜种子中提取总ＲＮＡ,逆转录合成ｃＤＮＡ第一链,通过ＰＣＲ反应,得到Ｒｓ－ＡＦＰ１和Ｒｓ－ＡＦＰ２基因扩增产物。采用Ｔ－载体克隆技术,将二分别插入ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ／ＥｃｏＲＶ－Ｔ克隆载体,得到重组质粒ｐＧＲ－１和ｐＧＲ－２用其转化宿主菌Ｅ．ｃｏｌｉ ＤＨ５α,从阳性菌落制备测序用质粒ＤＮＡ样品,在ＡＢ１３７０Ａ ＤＮＡ测序仪上测序。     

油梨基因组DNA的提取及RAPD分析

用改进的ＳＤＳ法提取油梨基因组ＤＮＡ,即在细胞核被裂解之前,先去除细胞质中的酚类物质和蛋白质,然后用ＳＤＳ裂解细胞核,异丙醇和乙醇沉淀ＤＮＡ,成功地从油梨叶片中提取和纯化了ＤＮＡ。以１０个油梨品种的基因组ＤＮＡ为模板,４０个随机引物进行ＲＡＰＤ分析,结果表明,大部分引物可以在不同模板上扩增出条带,但仅有７个引物可以同时在１０个品种的油梨ＤＮＡ上扩增出条带;用ＲＡＰＤ结果对１０个油梨品种进行聚类分析,基本符合传统分类观点。     

利用RFLP和RAPD标记示踪高粱黑束病,霜霉病和丝黑穗病的抗性基因

利用ＲＦＬＰ和ＲＡＰＤ标记示踪高粱黑束病、霜霉病和丝黑穗病的抗性基因Ｏｈ，Ｂ．Ｊ．Ｇｏｗｄａ等限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）和随机放大多态ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）标记已经用于示踪具有重要农艺性状的基因。一旦ＲＦＬＰ或ＲＡＰＤ有效地用于特殊性状标记，就可根...     

海南主栽芒果品种基因组DNA的RAPD分析

采用６个随机引物对海南岛主栽的１０个芒果品种进行ＲＡＰＤ研究,共扩增出３２５个ＤＮＡ片段,其中清晰可辨,重复的有２０１条,占６１％;检测出不同品种的ＲＡＰＤ标记,计算了各品种间的相似系数;初步确立了ＲＡＰＤ技术进行芒果ＤＮＡ指纹图谱构建的研究体系。     

茶树优质资源遗传稳定性的RAPD分析

应用随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）技术,对汝城早芽、蓝标１号、云桂大叶、日铸茶、举岩茶等５份茶树优质资源及其扦插繁殖后代的遗传稳定性进行了分析。结果表明,基因组ＤＮＡ的平均得率为７７２μｇ／ｇ鲜重,Ａ２６０／Ａ２８０在１６９～１８３之间,２０个随机引物在５份资源中共扩增出４１２个位点,平均每个引物２０６个,每份资源８２４个位点,扩增产物片段大小约在０４～２５ｋｂ之间,多态性程度达８４９％。２０个随机引物在５份优质资源及其扦插繁殖后代的ＲＡＰＤ扩增结果显示,无论是谱带的类型还是谱带的强弱,资源内是一致的,从而在ＤＮＡ分子水平上证明了扦插繁殖的遗传稳定性。     

芦荟疫病疫霉种的鉴定

１９９７年１０月和１９９８年９月在海南儋州市海南省种苗组培中心芦荟苗圃和华南热带农业大学农学院花圃发现芦荟疫病,感病芦荟叶片病斑初呈水渍状,暗绿色腐烂。从病组织上分离到１０个疫霉分离菌。根据孢子囊形态、孢子囊梗脱落性、厚垣孢子有无、藏卵器形态、雄器着生方式、菌落形态,最低、最高生长温度,将其鉴定为烟草疫霉（寄生疫霉） Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ　ｎｉｃｏ－ｔｉａｎａｅ　 Ｖａｎ Ｂｒｅｄａ ｄｅ Ｈａａｎ．（Ｐ．ｐａｒａｓｉｔｉｃａ）。这１０个分离苗中存在Ａ１,Ａ２和Ａ１,Ａ２三种交配型。     

番茄1—氨基环丙烷羧酸ACG合成酶基因的克隆及其反义基因表达载？…

从成熟番茄果实中分离ｍＲＮＡ,以Ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）为引物在ＡＭＶ逆转录酶作用下合成ＡＣＣ２ｃＤＮＡ第一链,以ｃＤＮＡ为模板通过ＰＣＲ扩增ＡＣＣ２基因,获得１．４５ｋｂ的扩增片段,将此片段克隆到ＢＳ质粒的ＥｃｏＲＶ位点上,对插入片段两端进行部分序列分析。     

粒用高粱［Sorghum bicolor （L·） Maench］的DNA多态性

粒用高粱［Ｓｏｒｇｈｕｍｂｉｃｏｌｏｒ（Ｌ·）Ｍａｅｎｃｈ］的ＤＮＡ多态性——（Ｙ．Ｔａｏ等），ＴｈｅｏｒｅｔｉｃａｌａｎｄＡｐｐｌｉｅｄＧｅｎｅｔｉｃｓ，１９９３，Ｖｏ１．８６，Ｎｏ．６，６７９～６８８（英文）分子标记［随机放大的多态ＤＮＡ（ＲＡＰ...     

香蕉ACC合成酶含3''''末端的cDNA克隆

采用 ３＇ＲＡＣＥ方法对香蕉（Ｍｕｓａ ＡＡＡ Ｃａｖｅｎｄｉｓｈ Ｓｕｂｇｒｏｕｐ）ＡＣＣ合成酸含 ３＇末端的 ｃＤＮＡ进行扩增，扩增产物被克隆到ｐＣＲ■２．１载体上，转化大肠杆菌ＤＨ５ α，筛选到重组质粒（ｐＡＣＳ２），并对插入片段进行序列测定。结果表明，３＇ＲＡＣＥ产物长 １６８０ ｂｐ，其中一个 开放读框内的核苷酸序列编码４４４个氨基酸，氨基酸序列包括了ＡＣＣ合成酶中所应具有的７个高度保守区。同时该产物还有长２６９ ｂｐ的３＇末端，并具有完整的 Ｐｏｌｙ（Ａ）尾（２４ｍｅｒ）。     

甘蓝型油菜核不育基因的RAPD标记

用Ｏｐｅｒｏｎ公司ＯＰＡ－０１－ＯＰＪ－２０ ２００个１０碱基对随机序列引物对甘蓝型油菜隐性核不育株涪优Ａ和可育株涪优Ｂ、显性核不育株３７Ａ和可育株３７Ｂ、广恢系ＤＧＣＲ９８－３７５２、ＲＧＣＲ９７－１及Ｆ１材料基因组ＤＮＡ进行ＲＡＰＤ扩增,共获得１３３４条扩增带,平均每引物扩增带约６．７条扩增带表明甘蓝型油菜存在遗传多样性,引物ＯＰＡ－０５、ＯＰＡ－０９、ＯＰＡ－１２、ＯＰＡ－１３、ＯＰＡ－２０     

栽培大豆品种间RAPD标记的多态性分析及聚类分析

应用从６０００多份大豆种质资源中筛选的２１个抗大豆花叶病毒病的品种或品系及７个感病的品种或品素,选用２０个随机引物,对总ＤＮＡ进行了随机扩增。有１８个引物扩增得得到了稳定的ＲＡＰＤ图谱。ＯＰＨ－０６和ＯＰＨ－１０未能扩增到ＲＡＰＤ产物。     

粒用高粱的DNA多态性

粒用高粱的ＤＮＡ多态性──（Ｙ．Ｔａｏ等），ＵｓｅｏｆＭｏｌｅｃｕｌａｒＭａｒｋｅｒｓｉｎＳｏｒｇｈｕｍａｎｄＰｅａｒｌＭｉｌｌｅｔＢｒｅｅｄｉｎｇｆｏｒＤｅｖｅｌｏｐｉｎｇＣｏｕｎｔｒｉｅｓ，１９９４，５４（英文）分子标记（ＲＡＰＤ和ＲＦＬＰ）用于...     

外源DNA导入的大豆品种“黑生101”的RAPD初探

黑生１０１是利用花粉管通道技术育成的一第一个大豆品种,利用１３２个随机引物对黑生１０１及其供体,受体的ＤＮＡ进行ＲＡＰＤ扩增,其中３个单引物和２个双引物组合起来,均能在后代黑生１０１中扩增出与供体相同而与受体不同的ＤＮＡ片段,证明黑生１０１中确有供体ＤＮＡ片段的导入。     

几种麻类作物及其近缘种植物总DNA的提取与鉴定

采用Ｐｉｃｈ和Ｓｃｈｕｂｅｒｔ１９９３年发展的ＳＤＳ方法，经适当改进后，成功地从苎麻，红麻，黄麻，青麻四种麻类作物及其近缘种植物中提取了细胞总ＤＮＡ，并对其得率，质量和纯度进行了鉴定。所得的ＤＮＡ可进行限制性内切酶消化，ＰＣＲ扩增和ＲＡＰＤ分子标记。     

用DAF和AFLP方法对花生栽培种作DNA标记多态性鉴定

在作物中,花生栽培种有其独特性,通过随机扩增多态性（简称ＲＡＰＤ,下同）和核酸限制性片段长度多态性（简称ＲＦＬＰ,下同）方法测定,在花生基因型中未发现ＤＮＡ变异,同样在同功酶和种子蛋白质研究中只观察到有限的变异。但花生基因型确实存在形态、生理和农艺性...