Ⅰ型鸭疫里默氏杆菌荚膜免疫的研究

用盐浸法提取了I型鸭疫里默氏杆菌(RA)的荚膜,并制成油佐剂疫苗.其免疫原性测定结果表明:用荚膜粗提物免疫雏鸭可得到很好的免疫保护效果(9/10).同时进行了RA荚膜油佐剂疫苗与各常规佐剂疫苗的免疫效力比较,免疫保护效果依次为:荚膜油乳剂苗、油乳剂灭活苗、蜂胶灭活苗、铝胶RA灭活苗、无佐剂RA灭活苗.结果显示,鸭疫里默氏杆菌荚膜免疫的研究为进一步研制亚单位疫苗打下基础.     

科技动态

血清1型鸭疫里默氏杆菌灭活油乳剂疫苗的研制为研究血清1型鸭疫里默氏杆菌(R.anatipestifer,RA)的灭活油乳剂疫苗,中国农业科学院上海兽医研究所丁铲等将10株血清1型RA的临床分离株经腿部肌肉注射7日龄雏鸭进行动物体内复壮,结果表明所有被     

1型鸭疫里默氏菌3种不同佐剂灭活疫苗的比较

分别研制1型鸭疫里默氏菌（RA）灭活铝胶疫苗、RA灭活蜂胶疫苗和RA灭活油乳剂疫苗,并从副作用和免疫保护率等方面对比3种疫苗作了比较。结果表明,灭活油乳剂疫苗免疫保护率最高,免疫后9d保护率达83.3%,14d为92.8%－100％,24d时仍为100％;其次是灭活蜂胶疫苗,灭活铝胶疫苗最差,但副作用则从铝胶疫苗、蜂胶疫苗、油乳剂疫苗依次增强,对于同一种疫苗,颈部皮下注射的副作用明显小于腿部肌肉注射,因此,建议选择油乳剂疫苗以颈部皮下注射途径免疫接种雏鸭,即可获得较长时间的保护。     

血清10型鸭疫里默氏杆菌灭活油乳剂疫苗的研制

鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)感染是主要危害2~8周龄雏鸭的高致病性细菌性传染病。为研制血清10型RA灭活油乳剂疫苗,选取10株血清10型RA分离株进行动物体复壮、分离和鉴定后,分别对部分毒株进行了毒力测定和灭活油乳剂疫苗的研制。结果表明,所有试验用分离株对7日龄雏鸭均具有较强的致病力。分离株YXL1和HXb2的半数致死量分别为2.8×108 cfu和82 cfu,不同菌株之间的毒力差异很大。用研制的灭活油乳剂疫苗对雏鸭进行2次免疫后,免疫鸭可获得高水平的特异性抗体,并可抵抗强毒RA的攻击,以HXb2免疫后的攻毒保护性最好。抗体水平检测和攻毒保护试验结果表明,用血清10型RA分离株HXb2制备的油乳剂灭活疫苗具有良好的免疫保护作用。     

鸭免疫程序的建议

1雏鸭群免疫（1）雏鸭3日龄左右,应用病毒性肝炎活苗皮下注射免疫。（2）鸭疫里默氏杆菌病灭活苗或鸭疫里默氏杆菌病、大肠杆菌病二联灭活苗免疫：雏鸭7~14日龄时应用单苗或二联苗免疫,每羽皮下注射0.5ml。     

鸭疫里默氏菌油乳剂疫苗的免疫期和保存期的测定

鸭疫里默氏菌(Riemerellaanatipestifer,RA)病主要侵害7～42日龄的各种雏鸭,已成为危害我省养鸭业的主要细菌性传染病。去年,我们已研制出具有较高保护率的鸭疫里默氏菌油乳剂疫苗[1]。为了测定该疫苗的有效免疫期和保存期,我们进行了试验,现报道如下:1　材料与方法　1.1　菌株　系本室自行分离、鉴定、保存的型RA菌株,供制苗及攻菌保护试验用。1.2　疫苗　鸭疫里默氏菌灭活油乳剂疫苗(批号为980811),置于4～8℃保存备用。1.3　试验鸭　取3日龄健康半番鸭200羽,其中180羽用于免疫期测定,20羽用于保存期测定,试验分组情况见表1。表1　　RA…     

血清1型鸭疫里默氏杆菌灭活油乳剂疫苗的研制

为研究血清1型鸭疫里默氏杆菌(R.anatipestifer,RA)的灭活油乳剂疫苗,本研究将10株血清1型RA的临床分离株经腿部肌肉注射7日龄雏鸭进行动物体内复壮,结果表明所有被测菌株均具有较强的毒力,易感雏鸭致死率100％.对其中3株RA分离株CH3、WJ4和YL4的毒力测定结果表明其半数致死量(LD50)分别为2×108 cfu、3.25×108 cfu和2.37×106 cfu.选取5株RA分离株分别制备灭活油乳剂疫苗,分别于5日龄和18日龄对樱桃谷鸭进行两次免疫后,免疫鸭能够产生高水平的RA特异性抗体,对2 LD50 WJ4或CH3攻毒产生很好的保护效果,其中由CH3、CQ3和YXb12制备的灭活油乳剂疫苗对攻毒的保护率高达100％.     

鸭浆膜炎、鸭病毒性肝炎二联灭活苗研究

将自然分离的2株鸭疫里默氏杆茵接种适宜培养基,收获茵液用甲醛灭活;用Ⅰ型鸭肝炎病毒(DHV)接种易感鸡胚收获含毒胚组液,经甲醛灭活后与灭活的鸭疫里默氏杆菌液混合,制备3批油乳剂灭活苗,并对其安全性和免疫原性进行测定。3批灭活苗通过接种2周龄雏鸭(0．5mL／只),2周后可测到DHV中和抗体,3周后攻毒保护率达80％以上。鸭疫里默氏杆茵3周后攻毒保护力80％以上。2周龄雏鸭每只皮下注射1ml,观察14d,免疫鸭全部健活,局部无不良反应。     

血清2型鸭疫里默氏杆菌制苗用菌株的筛选及灭活油乳剂疫苗的研制

血清2型鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)分离株经雏鸭体内复壮、回收、鉴定后,选取其中2株细菌NJ3和Yb2进行毒力测定,结果表明其半数致死量分别为5.62×107CFU和1.07×105CFU。选取5株细菌制备灭活油乳剂疫苗后免疫鸭,并进行攻毒保护试验。结果表明不同菌株制备的疫苗均可使免疫鸭产生高水平的RA特异性ELISA抗体和攻毒保护力,但是攻毒保护性差异较大,NJ3免疫后的攻毒保护性最好。抗体检测及攻毒保护实验表明NJ-3是较理想的制苗用菌株。     

鸭疫里默氏菌病油佐剂灭活疫苗的研制

为了有效控制鸭疫里默氏菌病的发生,我们将本地区分离鉴定的鸭疫里默氏菌作为菌种,采用液体增菌培养后灭活,加入佐剂制成油乳剂灭活疫苗,经无菌和安全检验合格后免疫4日龄雏鸭(0.5mL/只)。结果表明该疫苗免疫效果良好,一次免疫后保护率达70%,两次免疫后保护率达95%。     

猪胸膜肺炎调查及地方适用型灭活疫苗的研制

对广东珠江三角洲地区31个猪场450份血清用IHA方法进行猪胸膜肺炎放线杆菌(APP)抗体检查,阳性猪场和阳性血清分别为96.8%和58.4%;分离鉴定了7株APP,血清分型为1、7、3和4型,且以1、7型毒力较强;用平板凝集法对263份APP抗体阳性血清进行抗体反向分型试验,结果1型、7型共占76.4%。确定了APP最佳液体培养条件,培养菌液CFU为2.4×109/mL;研制的APP 1型、7型二价灭活疫苗安全、稳定。兔和仔猪免疫抗体曲线显示,油乳剂疫苗明显优于铝胶疫苗,二次免疫优于一次免疫;APP双价油乳剂灭活疫苗一次免疫仔猪,能100%抵抗APP同源1、7型强毒菌株的攻击,保护期达110 d;田间试验明显提高猪群的生产成绩。     

ND不同免疫程序诱导鸡体的免疫动态比较

用鸡新城疫（ND）IV系，I系冻干苗，由NDV强毒制成的蜂胶灭活疫苗、油乳灭活苗，组合成不同的免疫程序对鸡群分别于20，27，35日龄进行免疫，以探讨ND疫苗弱毒苗和灭活苗诱导鸡体的免疫动态，为临床上合理地安排ND的免疫程序提供理论依据。试验结果表明：弱毒苗加油乳剂苗诱导免疫应答效果较为优越，也较为实用。     

IBDV地方野毒株不同毒源二价灭活油乳苗免疫效果的比较研究

对利用IBDV地方野毒株所制备的囊毒和胚毒二价灭活油乳苗免疫效果进行了比较研究。结果表明,所制备的囊毒灭活苗免疫效果显著优于胚毒灭活苗和活疫苗,在接种后各个时期所产生的抗体效价均显著高于其它两种疫苗(P<0.01),最高AGP效价可达4.8log2;胚苗的免疫效果虽然差于囊苗,但明显优于活疫苗,当活苗免疫组鸡血清中已无可测性抗体时,胚苗组仍具有1.0log2的AGP效价。在攻毒试验中,囊苗组鸡对IBDV标准毒、两株野毒株的攻击均100%地获得了保护;胚苗组也均可获得80%的保护,这两种由地方毒株所制备的疫苗均未呈现出对不同毒株抵抗性的不同,而活苗组对不同毒株的攻击则分别只有53.3%、40%和46.7%的保护率,呈现出一定的差异性。     

The efficacy of FMD vaccine reduced non-structural proteins with a mAb against 3B protein

A monoclonal antibody, 3BIgG, against the prokaryotically expressed foot-and-mouth disease virus (FMDV) non-structural protein (NSP) 3B was obtained. The 3BIgG-sepharose conjugant (3BmAb-6BFF) was prepared by adding the purified 3BIgG into epoxy-activated sepharose 6BFF, incubating with the inactivated FMDV, and then removing the sepharose by centrifugation. The vaccine was made from the supernatant emulsified with oil-adjuvant ISA206. Ten guinea pigs, 26 pigs and six cattle were vaccinated, and a vaccination control group was included without treatment with 3BmAb-6BFF. After 28 days, 9/10 pigs challenged with FMDV were protected, this result was the same as the control group, indicating that the vaccine potency was not reduced after treatment with 3BmAb-6BFF. The other animals were vaccinated weekly for nine weeks, and serum samples were collected to detect 3ABC-antibody titers. The results showed that 3ABC-antibody production was delayed and the positive antibody rates were lower when vaccination was carried out using vaccines treated with 3BmAb-6BFF compared with untreated vaccines. The findings of this study suggest that it is possible to reduce NSPs using a mAb-sepharose conjugant in FMD vaccines without reducing their efficacy.     

鸭疫里氏杆菌油乳剂三价灭活疫苗的研究

为了更有效地控制鸭疫里氏杆菌病的流行,选择鸭疫里氏杆菌3个不同血清型流行菌株GXRA01、GXRA07和RAGX09制备油乳剂三价灭活疫苗。对疫苗进行免疫接种剂量试验、安全性检验、免疫效力检测以及保存期试验。结果表明,疫苗安全有效,每只雏鸭颈部皮下注射0.5 mL,能抵抗鸭疫里氏杆菌的攻击,免疫保护期为50 d,4℃~8℃疫苗保存期为6个月。研制的鸭疫里氏杆菌油乳剂三价灭活疫苗具有良好的安全性和免疫原性。     

H7亚型禽流感病毒灭活疫苗的研制及其免疫效果研究

以H7N3亚型禽流感病毒接种鸡胚,收取鸡胚液为抗原研制禽流感病毒灭活疫苗,并对制苗抗原以及疫苗的物理性状、安全性、免疫效力、免疫剂量和保护期等进行了试验,结果表明,该灭活疫苗安全性好,对28日龄鸡的最佳免疫剂量为0.5 mL/只,抗体临界保护值为5log2,免疫后6周HI效价达到高峰值9.4log2,以后逐渐下降,第20周抗体仍能维持较高水平。此外,交叉免疫保护试验表明,同一亚型之间具有良好的免疫保护作用,而亚型间缺乏坚强的交叉保护作用。     

Immunogenicity of foot-and-mouth disease virus type O1 replicated in either monolayer or suspended BHK cell system

The efficacy of vaccines formulated from the 10th passage of foot-and-mouth disease virus (FMDV) type O1 in monolayer baby hamster kidney (BHK) cells and the 8th passage in suspension BHK cells was compared in steers. The vaccines were inactivated with ethylenimine, contained an equal amount of antigen and were emulsified in oil-adjuvant. Six animals were vaccinated with each vaccine. During the challenge of immunity (91 days post-vaccination, DPV), one out of the six steers from the monolayer vaccine group became infected with the challenge virus while none of the six steers from the suspension vaccine group contracted the disease during the test period. The neutralizing antibody titers (means) of the serum samples taken at different DPV also did not suggest significant variation between these vaccines. In addition exposure to FMDV infected animals demonstrated that both vaccines elicited an immune state in the vaccinates.     

乳牛衣原体病灭活疫苗效检小鼠模型的建立

为了解决以本动物效检乳牛衣原体病灭活疫苗成本高的问题，用11批乳牛衣原体病灭活疫苗做乳牛效力试验时同步做小鼠效力试验，除第3批次疫苗的本动物效检结果与小鼠效检结果略有差异外，其他批次疫苗的效检结果均一致。结果表明，用小鼠做牛衣原体灭活疫苗的效检动物模型是可行的。     

兔多杀性巴氏杆菌C51-17株在疫苗效力检验中保存方法的研究

通过将兔多杀性巴氏杆菌C51—17株菌液分装后置-80℃冻存的方法对菌液浓度进行预数,并与传统方法采用的将菌液置4℃保存过夜计算菌存率或通过测定菌液吸光值推算攻毒菌液浓度相比较。结果表明。用-80℃冻存保存方法估算的菌液浓度与实际浓度更接近,采用这种方法进行疫苗的效力检验,能确保对照成立,在兔多杀性巴氏杆菌病灭活疫苗效力检验中可以采用-80℃冻存的方法进行攻毒菌液的预数。     

3种猪口蹄疫O型油乳灭活疫苗的体液免疫效果比较

为了确定3种猪口蹄疫O型油乳灭活疫苗的体液免疫效果,将91头51日龄四元杂交猪随机分为7组（13头/组）,除1组作为健康对照组外,AA、BB及CC分别为A、B及C 3种油乳灭活疫苗的二次免疫组,AAA、BBB及CCC为上述3种疫苗的3次免疫组,在首免或二免后4周加强免疫,采用阻断ELISA方法检测首免后2、4、6、8、10及12周（WPI）特异性抗体的阻断率。研究结果表明,在8WPI,AA、BB及CC组抗体阻断率达到峰值,分别为60.1%、39.0%及45.2%,随后抗体水平迅速下降,在12WPI,AA、BB及CC组抗体阻断率分别降至19.7%、25.2%及31.0%;AAA、BBB及CCC组疫苗免疫的6组在8WPI后抗体阻断率呈现上升趋势,在12WPI,AAA、BBB及CCC组抗体阻断率分别为46.3%、48.1%及50.1%,且在10～12WPI抗体阳性率始终维持在46%以上;综上,6组疫苗免疫效果的次序为AA>CCC>BBB>CC>AAA>BB。