淡紫拟青霉产几丁质酶发酵条件的优化

[目的]优化淡紫拟青霉产几丁质酶的发酵条件。[方法]通过单图素试验和正交试验研究了淡紫拟青霉菌产几丁质酶的最适发酵条件。[结果]淡紫拟青霉菌在装液量80ml／250ml、接种量12％、初始pH6．0,培养潺度28℃及180r/min的条件下培养4d,发酵液中的几丁质酶活性达到最高,为O．115U／ml.[结论]为几丁质酶的进一步研究开发提供了理论依据。     

淡紫拟青霉FZ-0289产几丁质酶的条件优化

通过单因素和多因素正交试验对淡紫拟青霉FZ0289产几丁质酶的条件进行了研究.单因素试验表明:100目几丁质粉末对菌体产几丁质酶的诱导性最强;添加蛋白胨能使产酶高峰提前,产酶量增加.多因素正交试验表明,在添加2g·L-1100目几丁质粉末、2g·L-1蛋白胨、1g·L-1KH2PO4、0.5g·L-1MgSO4、0.2g·L-1CaCl2和0.2g·L-1NaCl的培养基中接入经马铃薯蔗糖培养基(PSA)活化10d的菌碟(接菌孢子量为6×109个·L-1,500mL摇瓶中培养体积为150mL),在28℃、150r·min-1的条件下培养3d,发酵液中几丁质酶活达到0.11U·mL-1.     

淡紫拟青霉几丁质酶及其在植物寄生线虫生防中的研究

淡紫拟青霉几丁质酶是一种对植物线虫有生防活性的酶。综合报导了国内外学对这类酶的主要性质、研究背景、生防作用等的研究结果。根据该酶的特点和作用,提出淡紫拟青霉几丁质酶为线虫防治、线虫病原真菌研究及资源调查、基因工程应用、植物病害防治等领域开辟了广阔的应用前景。     

淡紫拟青霉几丁质酶提取工艺的优化研究

[目的]为优化淡紫拟青霉几丁质酶的提取工艺.[方法]以硫酸铵溶液为提取剂,先通过单因素试验,确定硫酸铵浓度、透析温度、透析时间和透析液酸碱度的最佳水平,然后通过正交试验确定最住浸提条件.[结果]淡紫拟青霉几丁质酶的最佳提取工艺为：硫酸铵浓度60％、透析温度30 ℃、透析时间2d,透析液pH 6,在该条件下几丁质酶酶活可达0.0534 U.[结论]该结果可以为几丁质酶的进一步开发和工业化生产提供一定科学依据.     

根结线虫卵寄生真菌的研究 Ⅱ.淡紫拟青霉菌生长和产孢条件

淡紫拟青霉菌(Paecilomyces lilacinus)在室内和室外盆土中对根结线虫卵均有较高的寄生率。采用常规方法,研究了该菌的主要培养特性。寄生菌有轮状分枝的分生孢子梗。分生孢子多数稍呈棱形,少数近椭园形或园形,单细胞,无色。生长和产孢的最适温度范围为25—30℃;适宜的培养基pII为5—9。马铃薯蔗糖琼脂培养基是生长和产孢的最佳而比较廉价的培养基;马铃薯、蛋白胨、蔗糖、硝酸钙、磷酸氢二钠组成的培养基和猪粪浸出液琼脂培养基有利于寄生菌的营养生长。寄生菌对蔗糖、果糖和阿拉伯糖有较好的利用力。全黑暗条件有利生长和产孢,半光照次之,全光照最差。     

淡紫拟青霉MD1几丁质酶活性测定

应用胶体几丁质平板透明圈法和DNS法测定了淡紫拟青霉MD1的几丁质酶活性,首次获得淡紫拟青霉在胶体几丁质平板上的透明圈,DNS法测定MD1几丁质酶活性结果表明,粗酶液无论是否有几丁质诱导,MD1菌株的几丁质酶活力均在第7 d最高,而且几丁质诱导的粗酶液酶活明显比同期未经几丁质诱导的粗酶液酶活高.     

淡紫拟青霉对烟草根结线虫病的防治效果

利用盆栽试验研究淡紫拟青霉菌剂,杀线虫剂和日晒消毒土壤对烟草根结线虫病的防治效果及其对烟草植株生长的影响。结果表明,淡紫拟青霉能有效地抑制烟草根结线虫的发生并促进植株生长,施用菌剂的植株病情指数比对照下降３４％,根部和地上部植株鲜重,叶长和株高均有明显增加。     

淡紫拟青霉T-DNA插入突变体几丁质酶和蛋白酶活性及致病力的变化

【目的】明确食线虫真菌淡紫拟青霉T-DNA插入突变体几丁质酶和蛋白酶活性和致病力的改变。【方法】测定淡紫拟青霉T-DNA插入突变体几丁质酶和蛋白酶活性,及对南方根结线虫的致病力,分析它们与致病力的相关性。【结果】结果表明:14个淡紫拟青霉T-DNA插入突变体几丁质酶活力和蛋白酶活力由于T-DNA的插入均受到了不同程度的影响。对南方根结线虫卵的寄生率与原始菌株也存在分化,筛选获得了1株致病力增强的突变体BN-11和11株致病力明显下降的菌株;通过分析,这14个淡紫拟青霉T-DNA插入突变体几丁质酶和蛋白质酶的活性与寄生率之间不呈正相关性。【结论】获得了淡紫拟青霉T-DNA插入突变体几丁质酶和蛋白质酶的活性与致病力变化的证据,有助于淡紫拟青霉致病机制分析及致病相关基因的克隆。     

用食品废弃物培养淡紫拟青霉的研究

 用剩饭和西瓜皮、菠萝皮、香蕉皮等多种果皮制成的培养基, 淡紫拟青霉都能在其上生长,它们的生物学特征与标准培养基(PDA)上长出的生物学特征比较相差无几, 其中以西瓜皮最佳, 表明利用果皮做原料生产淡紫拟青霉菌剂具有巨大潜力.用淘米水代替玉米粉、麦皮进行振荡培养, 制成的菌剂孢子密度达到每g样品10⁸-10⁹数量级,完全符合菌剂质量标准,甚至超过用常规培养料制成的菌剂.用淘米水振荡培养、剩面条固体发酵的菌剂,以011g,012g,014g和018g分别拌入灭菌土,各接种306粒根结线虫卵, 各移入2株番茄苗, 经50d后翻盆解剖根系, 施018g菌剂的虫瘿、雌虫和卵块均明显减少, 证明用食品废料制造的淡紫拟青霉菌剂确是一种优良的生物杀线虫剂.     

淡紫拟青霉种内异核现象的初步研究

研究了淡紫拟青霉的不同田间分离菌株单孢子后代的异核现象。结果表明,来源于福建、江苏、安徽的4个菌株(19,20,459,641)的单孢子培养后代,在PPDA+1%活性炭的培养基上进行配接试验,仅在19和459 2个菌株间能形成异核体,其频率为12.25%;在配接试验中,2个亲和菌落交界处长出致密的菌丝簇组成的实线,可推测为异核体。从来自菌丝簇线的每个单菌丝尖端培养物中分离出30个以上的单孢子,将其分别移接到PDA平板上,将来源于单孢子的菌落与2个亲本菌落进行比较,有3个菌丝尖端培养物(459-8×19-2,459-7×19-10,459-6×19-1)重现了两亲本类型或出现了新的菌落类型,异核现象得到证实。     

淡紫拟青霉对根结线虫的防治作用

结果表明:淡紫拟青霉Paecilomyces lilacinus菌株FZ0289对根结线虫卵的侵染率达98.2%;FZ0289麦粒菌剂和麸皮菌剂对黄瓜根结线虫病的防治效果分别为77.7%和73.3%,增产19.7%.     

乳酸对淡紫拟青霉防治根结线虫的辅助作用研究

为提高淡紫拟青霉(Paecilomyces lilacinus)在土壤中的定殖率及对根结线虫病害的防治效果,在淡紫拟青霉制剂中添加了乳酸.室内试验表明,乳酸能增强淡紫拟青霉发酵液的杀根结线虫效果,培养基中加乳酸增加了淡紫拟青霉对根结线虫卵孵化的抑制效果,并且随着乳酸浓度的增加,杀虫、抑制孵化效果呈上升趋势;乳酸可以增加...     

淡紫拟青霉对烟草根结线虫病的防治效果

利用盆栽试验研究淡紫拟青霉菌剂、杀线虫剂和日晒消毒土壤对烟草根结线虫病的防治效果及其对烟草植株生长的影响．结果表明,淡紫拟青霉（Ｐａｅｃｉｌｏｍｙｃｅｓｌｉｌａｃｉｎｕｓ（Ｔｈｏｍ）Ｓａｍｓｏｎ）能有效地抑制烟草根结线虫的发生并促进植株生长．施用菌剂的植株病情指数比对照下降３４％,根部和地上部植株鲜重、叶长和株高均有明显增加．     

孔雀草与淡紫拟青霉协同作用防治烟草根结线虫效果

[目的]明确孔雀草与淡紫拟青霉2种生防因子协同作用防治烟草根结线虫的效果,为烟草根结线虫病的生物防治提供参考。[方法]通过田间试验研究烤烟间作孔雀草同时联合使用淡紫拟青霉对烤烟生长特性以及对根结线虫病发病情况的影响。[结果]孔雀草与淡紫拟青霉联合使用不仅能显著提高淡紫拟青霉对烟草根结线虫防治效果的稳定性,还能明显提高烤烟的农艺性状。烤烟间作孔雀草能显著增加烟株的叶片宽度,施用淡紫拟青霉能显著增加烤烟的叶片长度;在株高、茎围、最大叶长和最大叶宽上,孔雀草与淡紫拟青霉联合使用时均明显优于单一处理。单一施用淡紫拟青霉对根结线虫的平均防效为67.2%,施用淡紫拟青霉的同时间作孔雀草,平均防效在73%以上。[结论]孔雀草与淡紫拟青霉协同作用防治根结线虫有显著的增效作用。     

淡紫拟青霉研究进展与展望

综述了近年来国内外对淡紫拟青霉的分类、生防机制、分子生物学及次生代谢物等方面的研究概况,并对淡紫拟青霉菌的发展前景进行了展望。     

淡紫拟青霉与放线菌代谢物复配对南方根结线虫的防治

对淡紫拟青霉和放线菌的拮抗特性及其复配菌剂对南方根结线虫的防治进行了研究.采用杯碟法和平板对峙法测定了淡紫拟青霉菌株PL1和PL2与放线菌菌株LH117和LH121的拮抗性,结果表明两种生防菌4个菌株之间没有明显的拮抗作用;效价法测定结果显示,LH121的发酵上清液对PL2的菌丝生长有轻微抑制作用,抑制率为14.5%.室内生物测定表明,按等体积比例配成的淡紫拟青霉孢子液和放线菌发酵上清液组合的4种复配菌剂处理对根结线虫的卵孵化抑制率和二龄幼虫杀死率分别可达到66.6%和78.0%,明显高于各单菌株处理;温室盆钵试验结果表明,PL1孢子液和LH117发酵上清液的复配菌剂对番茄的根结形成和根结线虫卵块形成的抑制率分别为68.7%和58.4%.上述结果表明:淡紫拟青霉与放线菌的复配菌剂对根结线虫的防治效果比单菌株的防治效果显著,复配菌剂的防治效果与生防菌株间的相瓦拮抗性可能密切相关.     

淡紫拟青霉和厚壁轮枝霉防治南方根结线虫

从寄生在番茄上的南方根结线虫（Ｍｅｌｏｉｄｏｇｙｎｅｉｎｃｏｇｎｉｔａ）卵中分离到的淡紫拟青霉（Ｐａｅｃｉｌｏｍｙｃｅｓｌｉｌａｃｉｎｕｓ）和厚壁轮枝霉（Ｖｅｒｔｉｃｉｌｉｕｍｃｈｌａｍｙｄｏｓｐｏｒｉｕｍ）在室内、小区和大田试验中对南方根结线虫有防治效果,并能促进植物生长。     

淡紫拟青霉角蛋白酶特性初步研究

【目的】对淡紫拟青霉PL-HN-16角蛋白酶的酶学特性进行初步研究。【方法】以鸡毛(黄色和黑色)、鹅毛、猪毛角蛋白为发酵底物,并作为培养基中的惟一氮源,观测发酵液的变化及培养液中的角蛋白酶活性,同时以鹅毛为发酵底物,对淡紫拟青霉角蛋白酶粗酶的最适作用温度和pH进行了初步研究。【结果】PL-HN-16对鸡毛、鹅毛、猪毛均能降解,PL-HN-16角蛋白粗酶最适作用温度为40℃、最适pH为8.0。【结论】在最佳作用温度与pH条件下,PL-HN-16角蛋白酶活性为41U/mL,PL-HN-16对不同发酵底物的降解活性不尽相同。     

淡紫拟青霉PL04菌株抗逆性及其对香蕉根结线虫的寄生作用

抗逆性测定结果表明,淡紫拟青霉PL04菌株有较强的抗逆性和对化学农药的兼容性.PL04菌株在PSA培养基上菌落生长和产孢的适温为5～40℃ (最适温度为29℃). PL04菌株在pH4～13(最适pH为7)范围内的培养基上均可生长;PL04菌株在40℃和50℃条件下的LT50分别为78.8 min和40.8 min.PL04菌株有较强的耐盐碱能力;PL04菌株对氯霉素有较强的耐受性;PL04菌株对杀菌剂多菌灵、百菌清、苯醚甲环唑、除草剂百草枯以及消毒防腐剂福尔马林较敏感,其EC50分别为0.021、0.013、0.006、0.016和0.120 mg/mL,PL04菌株对杀线虫剂阿维菌素和辛硫磷,杀菌剂三唑酮不敏感,其EC50分别为0.175 、0.338和0.337 mg/mL.采用双温测定法,室内测定淡紫拟青霉PL04菌株对香蕉根结线虫的寄生作用,不同处理具有显著性差异,PL04菌株孢子悬浮液处理18 d后对香蕉根结线虫卵的相对寄生率为94.3%.