人参叶肉原生质体的游离与培养研究初报

人参是一种珍贵的药用植物。由于其生长周期长达6～7年,用常规育种方法育成一个品种需要20～30年。同时,由于人参病害严重,在生产上不仅造成大量减产,而且每一次栽参都需另辟新地,容易破坏生态平衡。人参野生资源已经濒危,生产品种匮乏。因此,保存种质、创造新品种成为当务之急。     

二倍体马铃薯原生质体的游离与培养

以3种不同基因型的二倍体马铃薯为材料，研究了材料来源和不同预处理及游离过程中渗透浓度对原生质体游离质量和后期发育的影响。结果表明，不同基因型二倍体马铃薯细胞酶解时的适宜渗透浓度不同，Dd-Ⅲ-5为0．35～O．40mol／L，JK3为0．35mol／L，而Dd-Ⅱ-10的适宜渗透浓度范围较广，在0．30～O．45m01／L内均可；不同预处理所游离的原生质体质量及后期发育存在差异，经预处理后的原生质体活性均高于85％，且分化能力强；同一基因型的叶肉和愈伤组织所游离的原生质体活性差异不大，在产量上叶肉细胞高于愈伤组织；愈伤组织分化时，分化培养基附加的3个激素组合中，NAA1mg／L＋ZT 0．2mg／L时愈伤组织全部褐化死亡，而NAA1mg／L＋2，4-D1mg／L＋GA3 0．2mg／L和NAA1mg／L＋BA1mg／L上的愈伤都分化，后者分化较早；基因型对原生质体后期发育影响较大，经培养后，仅Dd-Ⅲ-5得到完整植株。     

影响菜豆（Phaseolus vulgaris L.）叶肉原生质体游离效果因素的研究

酶的种类与水平、酶液pH、渗透浓度以及供试植株的生理年龄等是影响菜豆原生质体游离效果的主要因素。在对各因素与游离效果间的关系进行了探讨后,建立了通过酶解途径获得丈量有活力的菜豆叶肉原生质体的有效方法。     

马铃薯叶片原生质体的游离纯化

文章以马铃薯四倍体普通栽培品种Desiree、东农303和二倍体野生种S.pinnatisectum品系脱毒试管苗叶片为材料,研究了不同的酶组合、酶液浓度、酶解时间以及温度等因子对原生质体游离纯化的影响。结果表明,低温预处理有助于提高原生质体的产量;最佳酶液组合为纤维素酶1.0%+离析酶0.5%;对于四倍体栽培种较短的酶解时间(13 h)较为适宜,而野生种需要较长的酶解时间(18 h)。     

番茄叶肉原生质体培养的研究

适合番茄叶肉原生质体培养的材料是３－４周龄无菌苗顶端开展的叶片，在２７℃下，采用１０ｇ／Ｌ纤维素酶“Ｏｎｏｚａｋａ”Ｒ－１０，５ｇ／Ｌ果胶酶Ｐｅｃｔｉｎａｓｅ，５ｍｍｏｌ／Ｌ ＭＥＳ，９０ｇ／Ｌ甘露糖醇，ＣＰＷ盐的酶液游离撕去下表皮的嫩叶，１４－１６ｈ，效果最好。研究表明，“红玫瑰”番茄和Ｌ．ｅｓｃ。ｘ，ＢＣ１Ｆ１的酶解效果最好，原生质体的产量和活力都最高；秘鲁番茄和Ｌ．ｅｓｃ，ｘ，Ｓ，ｌｙ，Ｆ１     

金线莲原生质体游离的研究

采用生物化学的方法对兰科药用植物金线莲Anoectochilus formosanus Hayata原生质体的分离进行了试验探讨.结果表明，从金线莲叶片组织分离原生质体的效率很高，以含有ω=1％的Macerozyme R-10和ω=2％的Cellurase ONOZUKA R-10的酶解溶液进行5-6h的处理，可以从1g鲜质量的嫩叶材料得到820万个以上的原生质体．     

马铃薯叶肉细胞原生质体培养

马铃薯叶肉细胞原生质体培养后 ,再生细胞形成细胞团和愈伤组织。愈伤组织经MS+2 ,4_D 1 0mg/L +NAA 1 0mg/L +ZT 0 5mg/L +蔗糖 2 %继代后 ,移至分化培养基MS +6_BA 1 0mg/L +NAA 0 1mg/L +ZT 1 0mg/L +AC 2g/L +蔗糖 2 % +甘露醇 1%上分化效果较好。小植株在培养基MS +NAA 1 0mg/L上形成完整植株     

原生质体培养及其在果树育种上的应用

综述了近年来原生质体技术的研究进展及其在果树育种上的应用,并讨论了原生质体技术存在的问题及应用前景。     

论人参种植业发展途径

讨论了传统伐林栽参模式的缺陷及农田栽参、林下护育山参的优势,明确了农田栽参是我国人参种植业发展的首要途径;林下护育山参是人参种植业发展的主要途径;同时提出解决老参地问题是目前人参种植业的关键所在。     

植物原生质体研究概况

植物原生质体分离、培养及植株再生技术是进行植物育种、基因工程、遗传理论及细胞生理生化特性研究的平台,具有重要的研究意义。该研究对影响原生质体分离和培养的重要因素包括酶、酶解时间、渗透压稳定剂和培养方法等进行了综述,同时提出植物原生质体再生植株遗传性状稳定性、变异规律等问题,为今后植物原生质体分离和培养研究提供借鉴。     

草木樨愈伤组织的诱导及其原生质体的制备

为建立草木樨的细胞融合原生质体杂交体系,以白花草木樨嫩叶为材料,以MS为基本培养基,在2,4-D和6-BA不同激素水平下研究愈伤组织诱导率,并在不同的酶液组分和酶解时间下对愈伤组织进行酶解制取原生质体。结果表明:随着激素2,4-D和6-BA浓度的增大,愈伤组织的诱导率呈先增大后减少的趋势变化,当激素2,4-D和6-BA浓度分别为1.5、0.3 mg/L时,诱导率最高,可达90%。草木樨愈伤组织在2.0%纤维素酶、0.3%果胶酶、1.0%离析酶中酶解15 h为最佳,此时有活力的原生质体产量最高,可达1 890×104个/g。     

诱导子在人参细胞培养中的应用研究进展

诱导子是调控植物次生代谢产物合成的一种重要手段,将其用于人参细胞培养,对于人参皂苷的生物合成效果显著。本文分别就诱导子的分类及其在人参细胞培养研究中的应用进行了综述。     

人参,西洋参根系活力的初步研究

测定了人参，西洋参不同生育期的根系活力，发现人参根系活力在６月中旬（开花期）较低，是人参红皮病发病的主要时期，７月上旬（结果期）明显升高，西洋参根系活力在６月中旬（展叶期）较低，７月上旬（开花期）达高峰，随后降低。     

罗布麻愈伤组织原生质体分离培养

[目的]探究罗布麻愈伤组织原生质体的分离培养及其影响因素,[方法]以罗布麻无菌苗子叶与下胚轴诱导的愈伤组织为材料,研究MS培养基附加不同激素组合对原生质体分离培养的影响以及愈伤组织继代培养、不同浓度纤维素酶与离析酶组合、DPD和MS等4种培养基对原生质体产量的影响。[结果]激素组合中以6-BA0．5mg／L＋NAA0．5mg／L组合获得最高愈伤组织诱导率,达100％;用固体培养基进行继代培齐的愈伤组织的原生质体产量高于液体培养基,尤其以从继代1次愈伤组织收集的原生质体最为适宜;纤维素酶0．30％＋离析酶0．30％组合获得的原生质体产量最高,且细胞碎片较少;DPD培养基的原生质体较其他培养基的分裂得早,MS培养基的培幂效果最差,[结论]该研究为罗布麻遗传转化、突变体筛选及体细胞融合育种提供了技术途径：     

老参地短期轮作技术体系的建立Ⅰ.人参西洋参轮作体系

老参地问题是制约参业发展的重大难题，笔者在总结前人关于老参地研究成果和经验的基础上，采取了测土施肥，有益微生物菌剂处理，酸碱度调整等土壤处理方法，成功地实现了老参地的短期再利用，建立了周期为1－3年的人参和西洋参的短期轮作体系。在处理后的老参地上种植西洋参，其长势，产量，病虫害及烧须情况，总皂苷含量等，与对照地新林土栽参无显著差异（P＞0．05）。并开展了中试规模的推广，试验结果显示，老参地短期轮作制是改造老参地的有效措施之一，该轮作技术方法应用简便，实用，可操作性强，轮作效果好。     

小麦愈伤组织状态调控与原生质体培养

 愈伤组织及其细胞的状态可通过调整培养基成分来调控。一般情况下，生长素、还原态氮、KCl促进愈伤组织生长，细胞分裂素、硝态氮抑制愈伤组织生长。绝大多数易培养基因型诱导的愈伤组织往往表现为质地紧硬或外软内硬，不适于进行悬浮培养和原生质体培养。利用不同水平的2，4-D、NH#++#-4、谷氨酰胺、水解酪蛋白、KCl、KT、6-BA、NO#+-#-3等进行处理，可使不适的愈伤组织变成适宜的类型，也可使那些生长过旺而不分化的愈伤组织分化出植株。用这些方法，从6个小麦基因型的原生质体中培养出了再生植株。