影响籼粳稻杂交F1花药培养效果的因素分析

以津稻291/IRBB60籼粳杂交F1、反交F1及其亲本的花药为外植体,对诱导和分化培养基、激素配比及有机附加物和高温预培养时间等影响花药培养效果的因素进行研究。结果表明,在SK3基本培养基中添加2 mg/L 2,4-D,1 mg/L NAA和1 mg/L KT比只添加2 mg/L 2,4-D的愈伤诱导率高0.67～2.78个百分点;在诱导培养基中添加水解酪蛋白能明显提高正交F1的愈伤诱导率;MS 1 mg/L NAA 2 mg/L 6-BA 0.5 mg/L KT分化培养基得到了较高的绿苗分化率;正交F1的愈伤诱导率、绿苗分化率和花培力显著高于反交F1;30℃高温预培养36 h,正交F1花培力达到最高值。     

EMS诱变对不结球白菜愈伤效果及其抗热性的影响

以四倍体不结球白菜种子为材料，研究两种激素(NAA、6-BA)浓度配比对不结球白菜愈伤组织诱导和植株再生能力的影响，而后研究不同浓度(0.4%、0.6%、0.8%)EMS诱变剂和不同处理时间(2 h、4 h、6 h)对不结球白菜愈伤组织存活率的影响。结果表明，7 d苗龄的子叶诱导愈伤组织效果最好，以4.0 mg/L 6-BA和0.2 mg/L NAA组合有利于愈伤组织的形成；以3.0 mg/L 6-BA和0.4 mg/L NAA诱导不定芽的效果最佳；EMS对不结球白菜愈伤组织最佳的浓度是0.6%处理4 h。诱变后检测植株的相关酶活性均有明显增加，表明EMS诱变获得植株的抗热有明显增加。     

两种藏茵陈植物种子萌发能力研究初报

研究了几种不同处理对两种藏茵陈植物川西獐芽菜、椭圆叶花锚种子萌发能力的影响.结果表明,使用不同浓度青霉素、KCN、KNO3、IAA、GA3、6-BA处理试验材料后,10 mg/L浓度青霉素、25mg/L6-BA分别对川西獐芽菜、椭圆叶花锚种子发芽率、发芽势有极显著提高.使用20 mg/L KNO3、2 mg/L CaCl2处理试验材料后,种子脱氢酶吸光度与对照差异不显著,电导率与对照差异极显著.使用10 mg/L青霉素、25 mg/L 6-BA处理试验材料后进行盆栽,种子发芽率较对照有提高,但差异不显著.     

不同草地早熟禾品种愈伤组织再生体系研究

草地早熟禾(Poa pratensisL.)是一种复杂的多倍体植物且具有兼性无融合生殖方式,建立高效的愈伤组织培养体系是进行基因工程育种的重要环节。本研究利用生产中常用的6个草地早熟禾品种为材料,经愈伤组织诱导后,对其愈伤组织分化及再生体系进行了研究。结果发现,不同草地早熟禾品种的分化再生能力具有明显的差异,不同激素处理组合对草地早熟禾愈伤组织的分化有显著的影响:品种如"帝王"、"超级伊克利"、"蓝鸟"等较易分化和再生,品种如"盛宴"、"布鲁克"等则只在特定条件下分化和再生;培养基激素处理组合Ⅴ(2mg/L6-BA+0.1mg/L2,4-D)较适合于所有检测的品种,处理组合Ⅳ(2mg/L6-BA)和Ⅵ(2mg/L6-BA+0.2mg/L2,4-D)对部分品种的分化有较大的促进作用。研究同时评估了2种激素配比(6-BA和2,4-D)对早地早熟禾愈伤分化再生的影响,发现不同草坪草品种对单独使用的6-BA浓度敏感性不同,补加2,4-D后不同品种的分化率也存在明显差异。研究建立的不同草地早熟禾品种的高效再生体系,不仅有利于这些品种的基因工程改造,也为草地早熟禾愈伤组织再生体系研究奠定了重要的理论基础。     

抗坏血酸调控水曲柳成熟胚褐化和体胚发生的适宜浓度

抗坏血酸(ascorbic acid, ASA)可以调节水曲柳(Fraxinus mandshurica)体胚发生外植体的褐化和体细胞胚发生(somatic embryogenesis, SE)的诱导率。为了确定体胚发生最佳的处理浓度，本研究基于前期基础细化ASA处理的浓度梯度，检验来自不同地点不同母树的水曲柳成熟合子胚外植体对处理的响应。结果表明，低浓度(5～20 mg/L)和高浓度(150～200 mg/L)的ASA会抑制外植体的褐化和体胚发生，90～120 mg/L的ASA会促进外植体的褐化和体胚发生；110 mg/L的ASA为诱导水曲柳成熟合子胚子叶外植体体胚发生的最佳处理浓度，体胚发生率比对照提高65.05%，褐化发生时间比对照缩短5 d，体胚发生时间比对照缩短9 d；体胚大部分发生于3/4褐化的外植体上，占总体胚发生数的65.17%；未褐化外植体的体胚发生数仅占总体胚发生数的0.67%；来源于不同地点和同一地点不同母树的外植体的体胚发生率差异较大，不同地点外植体体胚发生率排序为东北林业大学哈尔滨实验林场>韦河青山种子园>临江金山种子园；同一地点不同母树来源外植体...     

资源植物藏茵陈种子萌发能力研究

研究了几种不同处理对2种藏茵陈植物川西獐芽菜、椭圆叶花锚种子萌发能力的影响.结果表明,使用不同浓度青霉素、KCN、KNO3、IAA、GA3、6-BA处理试验材料后,10mg/L青霉素、25mg/L 6-BA分别对川西獐芽菜、椭圆叶花锚种子发芽率、发芽势的提高达极显著水平.20mg/L KNO3、2mg/L CaCl2处理试验材料后,种子脱氢酶吸光度与对照差异不显著,电导率与对照差异极显著.10mg/L青霉素、25mg/L 6-BA处理试验材料后盆栽,种子发芽率较对照有提高,但差异不显著.     

铝对白银豆种子萌发的影响

以温州白银豆为材料,设置了5个不同的铝处理浓度,研究了不同的铝处理对白银豆种子萌发的影响.结果表明:低浓度的铝(1、10mg/L)处理对白银豆种子萌发有一定的促进作用,高浓度的铝处理(500、1 000 mg/L)对白银豆种子的萌发产生较大的抑制作用,当铝浓度达到1000 mg/L时,白银豆绝大部分死亡.     

不同培养基和激素浓度处理对草地 早熟禾愈伤组织诱导的影响

以3种不同的草地早熟禾种子为外植体，研究了不同培养基、不同浓度的2，4-D、BA及水解酪蛋白对愈伤组织诱导的影响。试验表明：(1)MN6培育基有利于愈伤组织的诱导；(2)种胚愈伤组织的诱导和继代宜采用MN6 +2,4-D 3mg/L+BA0.2mg/L的培养基；(3)水解酪蛋白对草地早熟禾种子愈伤组织诱导的影响不大；(4)3种草地早熟禾种子中，新哥莱德(Nuglade)出愈率较高。     

不同浓度胺鲜酯浸种对藜麦种子萌发的影响

为研究不同浓度胺鲜酯(DA-6)浸种对藜麦种子萌发的影响,以陇藜1号藜麦种子为试验材料,设置5mg/L、10mg/L、15mg/L、20mg/L、25mg/L等5个浓度处理,以蒸馏水为对照,浸种2h,测定其对种子发芽率、发芽势、发芽指数、活力指数、种苗茎长、根长及鲜重的影响。结果表明,不同浓度DA-6浸种均能促进种子萌发,种子的发芽率、发芽势、发芽指数、活力指数随浓度的增大呈抛物线变化,除5mg/L处理与对照差异不显著外,其它几个浓度处理与对照差异均达到显著水平,尤其以15mg/L和10mg/L浓度为最优;不同浓度DA-6对藜麦种苗茎和根的生长影响程度不同,对种苗茎的生长影响不显著,但明显能促进种苗根的生长,且随着浓度的增大而增强;种苗鲜重则随浓度的增大先增后减,10mg/L和15mg/L浓度处理种苗鲜重较大,与其它处理差异达显著水平。综合分析,初步确定10~15mg/L为最适宜的DA-6浸种浓度。     

水稻植株再生与农杆菌介导的遗传转化研究

本研究以不同籼稻品种的成熟胚为材料，研究了不同培养基对愈伤组织诱导、分化和植株再生的影响，并研究了利用农杆菌介导bar基因和ipt基因的遗传转化技术。结果表明，采用NBD(N6salts B5Vitamin casamino acids 500mg／L proline 500mg／L glutamine 300mg／L mannitol 36．4g／L sucrose 30g／L 2，4-D 2mg／L 6-BA 0．2mg／L phytagel 2．5g／L，pH 5．8)为诱导培养基，MSD(MS casamino acids 500mg／L proline 500mg／L glutamine 300mg／L mannitol 36．4g／L sucrose 30g/L 2，4-D 2mg／L 6-BA 0．2mg／L phytagel 2．5g／L，pH 5．8)与NBD培养基交替继代培养，籼稻愈伤组织诱导率高、质量较好；采用MSR3^e(MS casamino acids 500mg／L glutamine 300mg／L proline 500mg／L mannitol 36．4g／L maltose 30g／L TDZ 0．2mg／L phytagel 5g／L pH 5．8)为分化培养基，愈伤组织分化率均在90％以上。本研究利用农杆菌介导，将Act启动子驱动的抗除草剂基因(bar)和异戊烯基转移酶基因(ipt)构建的融合基因表达载体对水稻进行遗传转化。初步确定了愈伤组织筛选及分化培养基附加除草剂(glufosinate ammoniun)4mg／L、头孢霉素300mg／L，愈伤组织预培养2-3天，共培养基中加入乙酰丁香酮浓度为39mg／L，共培养2-3天。通过上述培养条件，已获得移栽成活的水稻转基因植株。     

天蓝苜蓿花药愈伤组织诱导及再生体系的建立

为获得天蓝苜蓿单倍体再生植株,本研究以野生天蓝苜蓿花药为外植体,采用正交设计L₁₆(4⁴)筛选适宜天蓝苜蓿愈伤组织诱导培养基,比较不同基本培养基及生长调节剂组合筛选适宜的分化培养基,并用1/3MS、1/2MS和MS添加不同浓度的NAA研究不定生根。结果表明:天蓝苜蓿现蕾15~25 d的花药其愈伤组织诱导效果最好,高达60.5%。4℃低温预处理2~4 d有利于愈伤组织诱导,诱导率达77.2%。适宜花药愈伤组织诱导的培养基为NB+2,4-D 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+6-BA 0.5 mg/L+TDZ 1.0 mg/L,诱导率达78.5%。比较不同基本培养及生长调节剂的不同组合发现,NB培养基愈伤组织分化效果优于B₅和MS,NB+NAA0.5 mg/L+6-BA 2.0 mg/L适宜愈伤组织的分化,分化率为66.3%。不定芽在1/3MS+NAA 0.5 mg/L中培养,生根率最高,为86.55%。本研究建立了天蓝苜蓿花药培养再生体系,获得了单倍体植株,为天蓝苜蓿的育种实践及基因组学研究提供基础材料。     

白芦笋花药愈伤组织诱导及绿芽分化

为建立芦笋单倍体育种技术体系以解决国内芦笋新品种资源贫乏问题,笔者以白芦笋花药为外植体进行了愈伤组织的诱导及绿芽分化研究。试验结果表明,芦笋花药经过4d的冷藏(4℃)处理后,接种于含有NAA2.0 mg/L、6-BA1.0mg/L及6%蔗糖的1/2MS培养基上,可产生愈伤组织;每年的4月份接种花药的愈伤组织诱导率最高,8月份次之,11月份最低。品种间、同一品种不同单株间花药的愈伤组织诱导率不同,以‘UC155’品种(18.9%)最高,显著高于其他三个品种‘UC142’(11.6%)、‘Gijnlim’(10.3%)、‘Thielim’(5.8%),所有试验株系中以‘UC155’-8的愈伤组织诱导率最高,达83.5%;每日补充光照强度为1000 lx的光照,比全暗培养更有利于芦笋花药愈伤组织的形成;花药接种前进行离心处理(4000 r/min)30 min,不能提高愈伤组织诱导率;愈伤组织转瓶培养于NAA 0.5 mg/L、6-BA 1.0 mg/L及3%蔗糖的MS培养基上,能分化出无根绿芽;不同品种间绿芽分化率有差别,以‘Gijnlim’品种最高(67.2%),‘UC142’品种最低(14.1%);未分化绿芽的愈伤组织再转入于不含植物生长调节剂的MS培养基上培养,部分愈伤组织能分化出绿芽     

通过花药漂浮培养提高花椰菜小孢子胚胎发生率

通过花药漂浮培养,成功地诱导两个秋花椰菜基因型的小孢子胚胎发生.在液体培养基与固、液体双层培养基上,小孢子胚胎产量相仿,但后者褐色胚产生较多.在液体培养基中加入62.5mg/L的硝酸银对诱导小孢子胚胎发生效果较好.试验结果表明,采用花药漂浮培养方法可以明显提高花椰菜小孢子胚产量.     

萝卜花药愈伤组织诱导及褐变因素初探

以萝卜为试材,研究了不同激素配比、供体基因型、光照与温度以及蔗糖浓度对花药愈伤组织诱导的影响,同时比较研究了花药愈伤组织褐变过程中几种抗氧化酶活性变化。结果如下：P403在2.0mg/L 2,4-D+1.0mg/L 6-BA+2.0mg/L KT的MS培养基中愈伤组织的诱导率最高,愈伤组织开始褐化的时间晚,抗氧化酶的活性较高;同时进行低温预处理、高温预培养和初期暗培养的协同效果较任何一种单独处理好;6%的蔗糖浓度有利于愈伤组织的诱导。     

冬枣花药愈伤组织的诱导及原生质体分离

【研究目的】研究冬枣花药愈伤组织的诱导,悬浮系的建立和培养及愈伤悬浮系原生质体的分离。【方法】以冬枣花药为试材,通过选择愈伤诱导培养基和原生质体分离所用酶的浓度找到最佳诱导和分离条件。【结论】使用1/2MS基本培养基附加TDZ0.2mg/L、NAA0.5 mg/L和 PVP2.0g/L,对诱导冬枣花药愈伤组织有较好效果;愈伤组织增殖采用培养基1/2MS+TDZ0.4 mg/L +NAA0.2 mg/L;悬浮细胞系培养采用1/2MS+TDZ0.4 mg/L +NAA0.2mg/L液体培养基;冬枣花药愈伤组织悬浮系原生质体分离时以0.6M甘露醇+0.1%MES+20~25 g/L纤维素酶,酶解时间为16h时得到的原生质体产量和活力较高。     

5个酿酒葡萄品种组织培养及再生体系的建立

为了建立酿酒葡萄离体培养及植株高效再生体系,以5个酿酒葡萄品种花药和茎尖为外植体,利用组织培养法,研究了外源激素、基因型对外植体培养及再生的影响。结果表明,茎尖愈伤组织诱导及分化均优于花药。茎尖愈伤组织诱导培养基为：B5+NAA 0.5 mg/L+6-BA 1.0~2.0 mg/L;在此培养基上添加AgNO3 10 mg/L或PVP 1000 mg/L对花药愈伤组织诱导较好。茎尖愈伤组织分化培养基为：B5+NAA 0.01 mg/L+6-BA 0.5 mg/L+GA3 0.2 mg/L,最高分化率达100%。本试验成功地建立了酿酒葡萄茎尖愈伤组织诱导、再分化芽苗再生体系,该结果可为酿酒葡萄良种快繁以及遗传转化体系建立奠定良好的基础。     

重庆野生百合花蕾诱导再生植株技术研究

为了重庆野生百合资源的有效保护和开发利用,以重庆地区野生百合花蕾为试验材料,采用植物组织诱导培养的方法对其再生植株技术进行了研究。结果表明：以即将开放的百合花蕾为外植体材料,消毒容易,无污染;通过对花蕾各器官（花冠、花托、花丝、花药、花柱、柱头、花梗）的诱导培养,表明试验所选的1号培养基MS+ 6-BA 1.0 mg/L+ NAA 0.5 mg/L能诱导花冠、花托、花丝出芽,2号培养基MS+ 6- BA 0.5 mg/L+ NAA 0.5 mg/L仅能诱导花冠出芽;幼芽增殖以MS+ 6-BA 1.0 mg/L+ NAA 0.5 mg/L的增殖系数最高,为3.2,增殖幼苗生长健壮;生根培养以14号培养基(MS+ NAA 0.4 mg/L)诱导百合生根最佳,生根率为100%;移栽结果以18号培养基(MS+ IBA 0.5 mg/L)的生根培养苗成活率较高,达到了85%。     

铁在寒地早粳花药培养中的效应研究

摘要：铁是水稻花培培养基的重要成分。通过对7份寒地早粳组合F1（或品系）花药在不同Fe2+含量培养基上离体培养,发现培养基中的Fe2+的含量对诱导率、绿苗分化率影响较大。结果表明在N6培养基中将Fe2+提高到32-40mg/kg诱导率最大,高于N6培养基（Fe2+含量为5.6mg/kg）1.4倍以上。在此以内随着Fe2+含量的增加诱导率增加,大于此含量诱导率降低,呈单峰曲线分布。分化培养基中Fe2+含量增加到40mg/kg分化率显著降低。但在32-40mg/kgFe2+培养基上诱导出的愈伤组织在MS培养基上的绿苗分化率差异明显,71.4%材料可使绿苗生产率提高到9.2%左右。因此适当提高诱导培养基中Fe2+含量可提高寒地早粳的花培效率。     

激素和低温预处理对胡麻花药愈伤组织诱导的影响

本文以胡麻杂交组合IS×95005的F_1为材料,研究了激素和低温预处理对花药愈伤组织诱导的影 响.研究结果表明,不同培养基不仅对花药愈伤组织的诱导率有影响,而且对愈伤组织的颜色、生长速率和质地也有较大的影响.KT+2,4-D激素组合对花药愈伤组织的诱导效果优于KT+NAA.接种前花蕾4℃低温预处理能显著提高化药愈伤诱导率.在相同培养基中,低温预处理大数对愈伤诱导率起主要作用.综合考虑愈伤组织的质量和诱导率,胡麻组合1S×95005的F_1代花药愈伤诱导率存低温预处理5 d,附加KT 1.0 mg/L+2,4-D2.0 mg/L的MS固体培养基上诱导效果最好.     

不同品系橡胶树花药愈伤诱导和体胚发生研究

为建立橡胶树不同品系的体胚发生和植株再生体系,为不同品系橡胶树良种生产奠定基础。以橡胶树优良品系‘热研106’、‘热试59’、‘热试62’的花药为材料,采用正交设计,对不同品系、不同植物生长调节剂配比培养基的花药愈伤和体胚诱导效果进行了研究。[结果]结果表明：3个品系的愈伤诱导率和体胚诱导效率差异明显,同一品系不同培养基的愈伤诱导率和体胚诱导效率差异明显;愈伤诱导培养基中的植物生长调节剂对下一阶段的体胚诱导有明显影响。根据本研究,‘热研106’的花药愈伤诱导最佳浓度组合为2,4-D 1 mg/L+NAA 2 mg/L+KT 1 mg/L,‘热试59’的花药愈伤组织诱导最佳浓度组合为2,4-D 0.5mg/L+NAA 1 mg/L+KT 1 mg/L,‘热试62’的花药愈伤组织诱导最佳浓度组合为2,4-D 1 mg/L+NAA 1 mg/L+KT 1 mg/L。‘热试62’的体胚发生最佳浓度组合为KT 3 mg/L+NAA 0.05 mg/L+GA3 0.05 mg/L+6-BA 0.5 mg/L。[结论]本研究获得了不同品系的愈伤诱导和体胚发生最佳培养基组合,为多品系橡胶树花药植株再生体系的建立奠定了基础。