咳喘穴位敷贴对哮喘大鼠肺组织JAK1、STAT6表达的影响

目的 观察咳喘穴位敷贴对慢性支气管哮喘大鼠肺组织JAK1、STAT6表达的影响。方法 将40只SD大鼠随机分为对照组、哮喘模型组、咳喘穴位敷贴组、地塞米松组,每组10只。除对照组外,其余各组采用卵清蛋白致敏并激发的方法制备慢性支气管哮喘大鼠模型。造模成功后,咳喘穴位敷贴组大鼠相应穴位贴敷咳喘穴位敷贴进行干预治疗,地塞米松组大鼠腹腔注射地塞米松磷酸钠注射液0.5 mg/（kg·d）。治疗14 d后取大鼠肺组织,HE染色观察肺组织形态学变化,免疫组织化学、Real time PCR检测肺组织JAK1和STAT6蛋白及mRNA的表达水平。结果 与对照组相比,哮喘模型组大鼠肺组织可见大量炎性细胞浸润,气道内有大量分泌物,肺泡结构紊乱;与哮喘模型组相比,咳喘穴位敷贴组和地塞米松组大鼠肺组织炎性细胞浸润减少、气道分泌物减少、肺泡排列规则。与对照组相比,哮喘模型组大鼠气道上皮 JAK1、STAT6蛋白和mRNA表达明显升高（P<0.01）;与哮喘模型组相比,咳喘穴位敷贴组和地塞米松组大鼠气道上皮JAK1、STAT6蛋白表达下调（P<0.05或P<0.01）,JAK1、STAT6 mRNA表达下调（P<0.01）。结论 咳喘穴位敷贴能够改善支气管哮喘大鼠支气管及肺组织炎症,其机制可能与降低JAK1、STAT6 mRNA和蛋白表达有关。     

支气管哮喘患者外周血单核细胞Th1/Th2型细胞因子水平的检测及其临床意义

目的 :观察支气管哮喘患者在发病期外周血中的Th 1/Th 2型细胞因子水平的变化。方法 :采用双抗体夹心ELISA方法分别对哮喘患者发作期组 (n =15 )、缓解期组 (n =15 )及正常人对照组 (n =2 0 )外周血单核细胞 (PBMC)产生的Th 1/Th 2型细胞因子 (IL 2、IL 4、IL 10 )进行了测定。结果 :哮喘急性发作期患者PBMC产生的IL 2水平较正常对照组明显下降 (P <0 .0 5 ) ,而IL 4、IL 10水平均增高 (P <0 .0 5 ) ,缓解期恢复至正常水平。结论 :哮喘发病过程中Th 1/Th 2型细胞因子处于失衡状态 ,为哮喘的治疗提供指引     

六周递增负荷游泳运动过程中小鼠免疫平衡的动态观察* ——流式细胞仪对Th1/Th2细胞的直接检测

研究目的：以Th1、Th2细胞为指标,观察递增负荷游泳运动过程中免疫平衡的动态变化。研究方法：雄性8周龄SPF级昆明小鼠进行六周的递增负荷游泳训练,每天一次,每周六天。分别在0周、2周、4周和6周取血,流式细胞术直接测定血液Th1、Th2细胞数量。研究结果;六周递增负荷游泳运动过程中Th1细胞数量第2周明显下降,2周、4周呈上升恢复趋势,6周时基本恢复到正常; Th2细胞运动后2周、4周和6周各组均显著上升。提示在六周的运动过程中,小鼠的体液免疫功能呈增强趋势;在六周的运动周期中,各个采样时点Th1/Th2比值都显著下降。研究结论：六周递增负荷游泳运动过程中,Th1细胞数量的下降,同时Th2细胞增多。Th1/Th2平衡向Th2一侧极化,提示免疫平衡向体液免疫侧漂移。     

Ⅱ型糖尿病猕猴部分靶器官中Th1/Th2型细胞因子表达分析

检测Ⅱ型糖尿病猕猴部分靶器官中Ⅰ型辅助T细胞(Th1)因子IL-2和IFN-γ以及Ⅱ型辅助T细胞(Th2)因子IL-4、IL-10的表达及分布变化情况,研究Th1/Th2型细胞因子在Ⅱ型糖尿病发病中的变化。取Ⅱ型糖尿病及健康猕猴胰腺、肝、肾和心脏,通过石蜡切片、常规染色观察病理变化,同时采用免疫组织化学SABC法检测各靶器官IL-2、IFN-γ、IL-4和IL-10的表达及分布情况。病理结果显示:糖尿病猕猴肝血窦增宽伴中性粒细胞浸润,肾、心脏和胰腺细胞呈不同程度肿胀、萎缩及坏死。免疫组织化学结果显示:在肾中Th1型细胞因子IFN-γ表达水平高于健康组(P0.01)并分布于近曲小管、远曲小管及集合管。胰腺中IFN-γ表达水平与健康组相比差异无统计学意义(P0.05),阳性产物分布于胰岛部及外分泌部。胰腺及肾中Th1型细胞因子IL-2表达水平与健康组相比差异无统计学意义(P0.05)。胰腺及肾中Th2型细胞因子IL-4表达水平显著低于健康组(P0.01),阳性产物分布于远曲小管、胰腺胰岛及外分泌部。在胰腺、肾、肝及心脏中,Th2型细胞因子IL-10表达水平显著高于健康组(P0.01),阳性产物分布于近曲小管、远曲小管、胰腺胰岛、胰腺外分泌部、心肌细胞及肝细胞的胞质中。Th1/Th2型细胞因子在Ⅱ型糖尿病(type 2diabetes mellitus,T2DM)的发病过程中发生了显著变化。     

泛发性皮肤瘙痒症患者Th1/Th2 细胞因子平衡状态的初探

采用ELISA的方法检测35例泛发性皮肤瘙痒症患者的外周血单核细胞 (PBMC) 在体外经PHA诱导后T辅助细胞不同功能亚群细胞因子IL-4、IL-6及IFN-γ的分泌,同时以20例正常人的PBMC作对照. 结果表明: 泛发性皮肤瘙痒症患者PBMC中T辅助-2型 (Th2) 的细胞因子IL-4的产生明显高于正常对照(P<0.05), 而T辅助-1型 (Th1) 的细胞因子IFN-γ的产生明显低于正常对照(P<0.05),细胞因子IL-6的产生在泛发性皮肤瘙痒症患者PBMC与正常对照的PBMC中无明显差异 (P>0.05).同时,患者的瘙痒程度评分分数与其IL-4的产生呈正相关,而与其γ-IFN的产生呈负相关(P值均<0.05).     

芎归胶艾汤对RU486致流产小鼠Th1/Th2型细胞因子的影响

为了研究芎归胶艾汤的促孕保胎作用及其对母胎界面Th1/Th2型细胞因子的影响,取怀孕小鼠分成4组,分别为对照组、RU486组、RU486+孕酮组、RU486+芎归胶艾汤组。除对照组外,其它3组于孕4 d(GD4)7:00皮下注射RU486 0.5 mL,同时孕酮组注射0.1 mL孕酮,中药组灌服芎归胶艾汤0.8 mL,各组分别在GD4下午19:00,GD5上午7:00,GD5下午19:00取材。统计胚泡数,酶联免疫吸附法(ELISA)测定子宫匀浆中IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10的含量。结果表明:RU486显著降低胚泡数,Th1型细胞因子IFN-γ和IL-2的水平显著升高,Th2型细胞因子IL-4和IL-10的含量显著下降。补充孕酮或芎归胶艾汤显著逆转了RU486引起的流产,同时降低了Th1型细胞因子水平,提高了Th2型细胞因子水平,表明芎归胶艾汤能够作用在母胎界面,调节着床和妊娠期细胞因子平衡,利于胚胎着床和妊娠维持。     

急性化脓性扁桃体炎证候层次与Th1/Th2漂移相关性研究

目的研究急性化脓性扁桃体炎患者不同证候层次外周血Th1/Th2漂移变化。方法通过流式细胞检测技术,对急性化脓性扁桃体炎患者卫分证、气分证、营分证和正常人外周血Th1/Th2细胞进行检测,采用ELISA法测定血清细胞因子IL-4和IFN-γ水平,并比较IFN-γ/IL-4比值。结果与正常对照组比较,急性化脓性扁桃体炎卫分证组Th1、IFN-γ、Th1/Th2、IFN-γ/IL-4比值显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);气分证组Th1、Th2、IFN-γ、IL-4明显升高,差异有统计学意义(P<0.05~0.01);营分证组Th1、Th2、IFN-γ、IL-4继续明显升高,Th1/Th2比值却明显降低,差异有统计学意义(P<0.05~0.01)。与卫分证组比较,气分证组Th1、Th2、IFN-γ、IL-4显著升高,Th1/Th2、IFN-γ/IL-4比值明显降低,差异有统计学意义(P<0.05~0.01);营分证组Th2、IL-4继续明显升高,Th1/Th2、IFN-γ/IL-4比值明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。与气分证组比较,营分证组Th1、IFN-γ水平、Th1/Th2、IFN-γ/IL-4比值显著降低,Th2、IL-4显著升高,差异有统计学意义(P<0.05~0.01)。结论急性化脓性扁桃体炎卫分证、气分证、营分证证候层次变化与Th1/Th2漂移存在相关性。     

IL-18对小鼠Th1和Th2细胞免疫应答作用的研究进展

IL-18在IL-12的协同下能诱导T、B、NK细胞产生大量的IFN-γ,促进Th1细胞产生IFN-γ、IL-12、GM-CSF及上调IL-2Rα的表达;IL-18在没有IL-12的协同下,能诱导T细胞、NK细胞、嗜碱性细胞和肥大细胞产生IL-13和(或者)IL-L等Th2相关细胞因子,促进Th2细胞的分化。所以IL-12和IL-4等主要细胞因子对IL-18Ra的这种正负调节决定了IL-18在免疫反应中的不同作用。因此,IL-18能增强Th1和Th2引起的免疫应答。本文就IL-18对小鼠Th1和Th2细胞免疫应答作用的研究进展作一综述。     

口腔鳞癌Th1/Th2平衡漂移中IL-4、IL-10、TGF-β表达与肿瘤发展关系探讨

目的探讨口腔鳞状细胞癌Th1/Th2平衡漂移中IL-4、IL-10、TGF-β表达与肿瘤发展的关系。方法采用免疫组织化学的方法对49例口腔鳞癌标本进行IL-4、IL-10、TGF-β染色,观察肿瘤不同区域IL-4、IL-10、TGF-β的分布情况,同时利用HIPAS100图象分析软件获取各指标表达水平灰度值,综合分析3种指标的表达水平与口腔鳞癌发展的关系。结果肿瘤细胞以及部分间质浸润淋巴细胞表达IL-4、IL-10、TGF-β,3种指标在肿瘤组织中的阳性表达有差别,中央区阳性细胞较多,呈现高水平表达,肿瘤浸润前沿内阳性细胞较少,表达水平明显降低,两区域各指标的表达水平差异有统计学意义(P<0.05);IL-4在口腔鳞癌的表达水平与细胞分化、淋巴结转移、脉管内癌栓密切相关(P<0.05);IL-10在口腔鳞癌的表达水平与临床分期、淋巴结转移密切相关(P<0.05);TGFβ在口腔鳞癌的表达水平与口腔鳞癌的体积、淋巴结转移、脉管内癌栓密切相关(P<0.05);肿瘤中央区IL-4、IL-10、TGF-β表达水平之间两两密切相关(IL-4、IL-10间r=0.6617,P<0.05,IL-10、TGF-β间r=0.8862,P<0.05,IL-4、TGF-β间r=0.5731,P<0.05),肿瘤浸润前沿组织中IL-4、IL-10表达存在明显相关(r=0.7529,P<0.05)。结论口腔鳞癌及其间质中浸润淋巴细胞与肿瘤相互作用使Th1/Th2平衡向Th2漂移,肿瘤处于免疫抑制状态,并且可能是导致肿瘤细胞更具侵袭性,远处淋巴结转移的关键因素。     

Polysaccharide Nucleic Acid of Bacillus Calmette Guerin Modulates Th1/Th2 Cytokine Gene Expression in Lipopolysaccharide-Induced Mastitis in Rats

The aim of this study was to evaluate, in rats, the changes in the T helper type 1 (Th 1)/Th2 radio in mammary glands after an intramammary infusion of lipopolysaccharide (LPS) and to characterize the moderating effects of the polysaecharide nucleic acid of Bacillus Calraette Guerin (BCG-PSN) on the mammary gland. In the control group, the levels of IL-2 and INF-γ, mRNA expression increased, whereas IL-4 mRNA expression decreased after LPS challenge. As a consequence, the INF-γ/IL-4 mRNA ratio was significantly higher at 3, 6, and 9 h post-infusion (PI) compared to the control value (O h; P<0.01).BCG-PSN increased mRNA expression of both INF-γ' and IL-4 before infusion of LPS. LPS challenge significantly the reduced Th1/Th2 eytokine ratio due to Th1 cytokine IFN-γ suppression and Th2 cytokine IL-4 upregulation compared with the control group. A significant reduction ofN-acety1-β-D-glucosaminidase (NAGase) was observed at 24 h PI in the BCG-PSN treatment group compared to the control group (P<0.05). Thus, it was demonstrated that level of BCG-PSN might change the Th1/Th2 ratio mainly by enhancing the Th2 immune response. This is the first report of a Th1/Th2 change induced by coliform mastitis and characterization of the effect of BCG-PSN on mammary gland inflammation. This study makes a better understanding of the mechanisms of coliform mastitis and provides a putative novel strategy for the prevention and/or treatment of mastitis.     

Polysaccharide Nucleic Acid of Bacillus Calmette Guerin Modulates Th1/ Th2 Cytokine Gene Expression in Lipopolysaccharide-lnduced Mastitis in Rats

The aim of this study was to evaluate, in rats, the changes in the T helper type 1（Th1）/Th2 radio in mammary glands after an intramammary infusion of lipopolysaccharide （LPS） and to characterize the moderating effects of the polysaccharide nucleic acid of Bacillus Calmette Guerin （BCG-PSN） on the mammary gland. In the control group, the levels of IL-2 and INF-7 mRNA expression increased, whereas IL-4 mRNA expression decreased after LPS challenge. As a consequence, the INF-γ/IL-4 mRNA ratio was significantly higher at 3, 6, and 9 h post-infusion （PI） compared to the control value （0 h; P〈0.01）. BCG-PSN increased mRNA expression of both INF-γ and IL-4 before infusion of LPS. LPS challenge significantly the reduced Th1/Th2 cytokine ratio due to Thl cytokine IFN-γ suppression and Th2 cytokine IL-4 upregulation compared with the control group. A significant reduction of N-acetyl-β-D-glucosaminidase （NAGase） was observed at 24 h PI in the BCG-PSN treatment group compared to the control group （P〈 0.05）. Thus, it was demonstrated that level of BCG-PSN might change the Th1/Th2 ratio mainly by enhancing the Th2 immune response. This is the first report of a Th1/Th2 change induced by coliform mastitis and characterization of the effect of BCG-PSN on mammary gland inflammation. This study makes a better understanding of the mechanisms of coliform mastitis and provides a putative novel strategy for the prevention and/or treatment of mastitis.     

电针迎香穴对嗅觉功能障碍大鼠胰岛素样生长因子-1的影响

目的 探讨电针迎香穴对嗅觉功能障碍大鼠胰岛素样生长因子-1（insulin-like growth factor 1,IGF-1）的影响。方法 将50只SD大鼠随机分为5组,分别是正常组、嗅觉功能障碍组、嗅觉功能障碍+眶下神经切断组、嗅觉功能障碍+电针组、嗅觉功能障碍+眶下神经切断+电针组,电针干预迎香穴后,运用嗅觉迷宫实验和对大鼠嗅球组织及血液中IGF-1进行ELISA、免疫组织化学等方法进行分析研究。结果 嗅觉功能障碍+电针组大鼠与正常组相比,其嗅觉功能明显改善（P<0.01）,其嗅球组织及血液中IGF-1表达明显升高（P<0.05）,而嗅觉功能障碍+眶下神经切断+电针组大鼠与正常组相比,其嗅觉功能和嗅球组织及血液中IGF-1表达无明显改善（P>0.05）。结论 电针迎香穴对嗅觉功能障碍模型大鼠具有显著干预效应,其作用机制可能是通过三叉神经通路,促进大鼠体内IGF-1的产生,从而有利于嗅觉系统嗅感神经元（ORN）再生,改善嗅觉功能障碍。     

Influence of Radix scutellariae on Th1/Th2 cytokine balance in RU486-induced abortion in mice

The aim of this study is to investigate the significance of Th1/Th2 cytokine balance in the uterus in the early embryo loss (or resorption), and to elucidate immunological modulation at the maternal-fetal interface with Chinese herbal medicine Radix scutellariae (Huang Qin) and its constituents (Baicalin and Baicalein). Mifepristone (RU486) was given via subcutaneous injection in the scapular area to induce abortion in mice at day 7 of gestation. The levels of uterine Th1 cytokines (IFN-γ, IL-2) and Th2 cytokines (IL-4, IL-10) were analyzed by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), respectively. The mean values of Th1 cytokines in the uterus of RU486-treated abortion mice were significantly higher (P < 0.05) than that of the control mice, but no significant difference was observed regarding to the contents of Th2 cytokines of different groups (P > 0.05). However, when the Radix scutellariae and its constituents were used to prevent RU486-induced abortion, the levels of IFN-γ and IL-2 decreased while that of IL-4 and IL-10 increased. The embryo loss induced by RU486 was closely related to the Th1/Th2 immune balance at the maternal-fetal interface. Radix scutellariae and its constituents have an anti-abortive effect through restoring the Th1/Th2 balance at the maternal-fetal interface.     

穴位埋药线对难治性癫痫大鼠癫痫样波的发放及大脑海马和颞叶皮质多药耐药相关蛋白MRP1、P-gp表达的影响

目的 探讨穴位埋药线对难治性癫痫大鼠癫痫样波的发放及大脑海马和皮质中多药耐药相关蛋白MRP₁、P-gp表达的影响。方法 （1）造模：大鼠海马区注射红藻氨酸（KA）,经过点燃和再次亚惊厥剂量点燃造模,且脑电图检测有癫痫样波发放者筛选为造模成功耐药难治性癫痫模型鼠。（2）分组与处理：普通线组（PTX组）与药线组（YX组）,先埋一侧穴位,间隔15 d后埋对侧穴位。拉莫三嗪组（LTG组）按照人用拉莫三嗪剂量换算灌胃大鼠,每日2次;空白对照组（Normal组）和模型组（Model组）给予灌胃同等体积的蒸馏水,均灌胃30 d。（3）采用VEEG-1518K型数字化视频脑电监测分析系统检测脑波基本节律的波幅与频率变化。（4）标本处理与检测：采用免疫组织化学技术,检测多药耐药相关蛋白MRP₁、P-gp在海马与颞叶皮层不同部位的表达。结果 各组治疗前比较差异无统计学意义（P>0.05）;各组治疗后,YX组、LTG组分别与Model组、PTX组比较差异有统计学意义（P<0.05）,YX组与LTG组比较差异无统计学意义（P>0.05）;与Model组相比,LTG组和YX组干预后能降低致痫鼠EEG痫波放电持续时间与发放频率以及海马区和颞叶皮质区多药耐药蛋白MRP₁、P-gp的表达水平（P<0.05或P<0.01）;YX组与PTG组比较差异无统计学意义（P<0.05）。结论 （1）埋药线使KA致痫鼠EEG痫波放电持续时间缩短,发放频率减少。（2）KA点燃难治性癫痫模型大鼠大脑海马区存在多药耐药蛋白MRP₁、P-gp的表达较皮质区明显升高。（3）埋药线逆转与降低致痫鼠海马区多药耐药蛋白MRP₁、P-gp的表达水平,可能是其抗癫痫生物学作用机制之一。     

中药硬膏穴位贴敷联合中药喷雾治疗乳腺癌术后淋巴水肿疗效观察

目的 探讨中药硬膏穴位贴敷与中药喷雾联合应用于乳腺癌术后淋巴水肿的治疗效果。方法 纳入本院收治的80例乳腺癌术后淋巴水肿患者为研究对象,随机分成对照组、观察组各40例。两组术后均予以常规治疗（肢体锻炼+空气波压力循环治疗）,对照组在此基础上加用安慰剂穴位贴敷,观察组在常规治疗基础上利用中药硬膏穴位贴敷与中药喷雾联合治疗。观察两组术后淋巴水肿改善效果,并比较两组中医证候积分（水肿、疼痛、肩部活动受限、乏力、食欲不振）、上肢周径、肩关节活动度及不良反应。结果 观察组总有效率95.0%高于对照组70.0%,差异有统计学意义（P<0.01）。治疗后,两组各项淋巴水肿中医证候积分较治疗前均明显降低,且观察组各项积分均低于对照组,差异具有统计学意义（P<0.05）。两组治疗2周、4周后上肢周径均小于治疗前,且同时段比较观察组小于对照组,差异具有统计学意义（P<0.01）。治疗后,两组肩关节活动度均明显提升,且观察组肩关节活动度大于对照组,差异具有统计学意义（P<0.05）。观察组不良反应率为15.0%,与对照组10.0%比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论 临床针对乳腺癌术后淋巴水肿患者可采用中药硬膏穴位贴敷与中药喷雾联合治疗,有利于减轻不适症状,提高肩部活动能力,不良反应较少,值得临床推广。