肌松Ⅱ号胶囊对兔膝骨性关节炎关节液中NO水平的影响

目的:研究肌松Ⅱ号胶囊对骨关节炎家兔关节液中NO和滑膜组织NOS的影响,探讨其治疗骨关节炎(osteoarthritis,OA)的机制.方法:应用关节制动的方法复制OA模型,12只造模成功的中国家兔,随机分为肌松组和对照组.肌松组用肌松胶囊和手法治疗,对照组仅予以手法治疗,疗程为1月.检测治疗前后关节液中NO和治疗后滑膜组织中NOS的含量.结果:治疗后肌松组NO和NOS水平均低于对照组(P＜0.05),各组NO的含量较治疗前均明显下降(P＜0.01).结论:肌松Ⅱ号胶囊能抑制滑膜组织NOS的活性,减少关节液中NO的含量,而治疗膝骨性关节炎.     

Ⅱ型胶原分解产物与骨关节炎软骨退变的研究现状

骨关节炎是一种以关节软骨退行性变、继发性骨质增生为主要特征的慢性退变性关节疾病。软骨基质的降解在关节软骨退变过程中起了主要作用。Ⅱ型胶原分解后的片段被实验证明有诱发骨关节炎和促进软骨降解作用,其机制可能与整合素α2β1、α5β1和膜联蛋白V受体、细胞免疫或反馈机制等有关,但具体机制有待进一步研究明确。该文综述了Ⅱ型胶原的分解产物与骨关节炎软骨退变的研究现状。     

桑生除痹合剂对兔膝骨性关节炎 组织形态学和血液流变学的影响

〔摘要〕目的观察桑生除痹合剂对膝骨性关节炎家兔组织形态学和血液流变学的影响、方法将健康6月龄新 西兰大白兔36只,随机分为正常组,模型组,壮骨关节丸组,桑生除痹合剂高、中、低剂量组〔每组6只,按照Hulth方 法造模,分别灌服高、中、低剂量桑生除痹合剂,壮骨关节丸组灌服壮骨关节丸、12周后,测定血液流变学指标再处死 动物,取股骨内侧耀关节负重区软骨及膝关节滑膜标木行光镜观察、结果关节软骨及滑膜标木光镜卜呈显著退变表 现;壮骨关节丸组和桑生除痹合剂高、中、低剂量组全血熟度、全血还原熟度、血浆熟度及红细胞聚集指数与模型组比 较差异有统计学意义(P<0.01)〔结论从关节软骨及滑膜的光镜观察可以判断,兔膝骨性关节炎模型建立成功;桑生除 痹合剂能明显改善血液流变学状态.改善局部血液循环延缓软骨退化、     

熊果酸对胶原诱导性关节炎大鼠关节炎症相关因子mRNA表达的影响

目的 研究熊果酸（ursolic acid,UA）对胶原诱导性关节炎（collageninduced arthritis,CIA）大鼠关节X线及关节炎症相关因子mRNA表达的影响。方法 SD大鼠采取皮下注射牛Ⅱ型胶原加弗氏不完全佐剂法建立CIA模型,取造模成功后大鼠随机分为CIA模型组、UA低剂量组、UA高剂量组、甲氨喋呤（methotrexate,MTX）组、UA+MTX组并予以对应干预。另取6只正常大鼠为对照的空白组。初次免疫30 d断颈处死大鼠,关节行X线摄片,再取下大鼠炎症关节组织匀浆,提取RNA,荧光定量PCR法检测IL-17A、IL-10、IL-6、TNF-α、IL-1β、TGF-β的mRNA表达。结果 与CIA模型组相比,UA高剂量组、MTX组、UA+MTX组X线评分减低（P<0.05或P<0.01）;各治疗组IL-17A、IL-6、TNF-α、IL-1β的mRNA表达降低（P<0.01或P<0.05）;各治疗组IL-10、TGF-β因子的mRNA表达增高（P<0.01或P<0.05）。结论 UA可明显缓解CIA大鼠关节炎症,改善关节X线评分,其机制可能与调节炎症因子的产生,维持组织促炎因子与抑炎因子的平衡有关。     

灵仙通络方对C518大鼠膝关节退变软骨细胞增殖、Ⅱ型胶原及基质金属蛋白酶-13表达的影响

目的 探讨灵仙通络方对C518大鼠膝关节退变软骨细胞增殖、Ⅱ型胶原（COL-Ⅱ）及基质金属蛋白酶-13（MMP-13）的影响。方法 选取C518 大鼠膝关节软骨细胞株,随机分为中药组（灵仙通络方）、西药组（氨糖美辛）和对照组（氯化钠溶液）,进行培养、诱导退变等处理,于给药后第 1、2、3 d,分别检测中药组、西药组和对照组不同浓度下对软骨细胞增殖、COL-Ⅱ及MMP-13表达的影响。结果 同一时间点的中药组、西药组不同浓度之间噻唑蓝（MTT）值差异有统计学意义（P<0.01）。对照组不同浓度氯化钠溶液的MTT值差异不具有统计学意义（P>0.05）。在COL-Ⅱ免疫组化染色中,中药组与西药组和对照组相比差异有统计学意义（P<0.01）,且中药组优于西药组（染色指数χ²=16.26,df=2,P<0.01）。在 MMP-13 免疫组化染色中,对照组较中药组、西药组差异有统计学意义（P<0.01）,且中药组优于西药组（染色指数χ²=54.31,df=2,P<0.01）。结论 C518 大鼠膝关节退变软骨细胞经灵仙通络方干预后能够促进其增殖,调节COL-Ⅱ、MMP-13的表达,延缓膝关节骨性关节炎疾病的发展进程。     

玉米幼芽提取物对小鼠皮肤成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达的影响

分离培养小鼠皮肤成纤维细胞,用2种富含腺嘌呤类衍生物的玉米幼芽提取物(20 mg/L)提前保护细胞后,体外构建H2O2急性氧化损伤细胞模型,应用RT-PCR对小鼠皮肤成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA的表达进行半定量检测。结果表明,损伤对照组(Ⅱ组)小鼠皮肤成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA的表达量分别为空白对照组(I组)的24%(P<0.01)和20%(P<0.01),而药物保护组(Ⅲ组、Ⅳ组)小鼠皮肤成纤维细胞Ⅰ型前胶原mRNA的表达量均高于损伤对照组,分别是损伤对照组的3.5倍(P<0.01)和1.8倍,Ⅲ型前胶原mRNA的表达量也均高于损伤对照组,分别是损伤对照组的4.6倍(P<0.01)和3倍(P<0.01)。说明在H2O2致小鼠皮肤成纤维细胞急性氧化损伤过程中,这2种玉米幼芽提取物能够保护Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA的表达,且0501提取物对小鼠皮肤成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原表达的保护作用优于0502提取物。     

Ⅱ型胶原微图案化对猪关节软骨细胞行为的影响

[目的]明确调控生物材料表面拓扑结构对猪关节软骨细胞基础生长行为和功能的影响,为关节软骨组织缺损修复提供理论依据.[方法]利用食人鱼溶液(Piranha,H2O2:H2SO4)对普通玻片进行氧化,以紫外光刻法制备具有不同尺度条带微图案的Si印模,经氧气等离子体处理和II型胶原(COLII)浸润后,通过微接触印刷(μCP技术)将COLII固定在氧化玻片材料表面,将猪关节腔软骨细胞接种于微图案化的支架材料上,经37 ℃、5% CO2培养箱培养后采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)比色法和二乙酸荧光素(FDA)荧光染色法分别观察软骨细胞的增殖生长情况.[结果]经食人鱼溶液处理后玻片表面羟基化程度提高,亲水性明显增强.通过μCP技术能成功将COLII印刷在羟基化玻片表面上,且条带均匀、整齐.将猪软骨细胞接种到构建的取向性COLII微图案材料上进行培养,发现COLII能为猪软骨细胞提供黏附位点,且取向性COLII微图案对软骨细胞的增殖生长有促进作用,但不同尺度(100、200和300 μm)线宽对软骨细胞的增殖生长存在明显差异,表现为线宽越宽,软骨细胞的增殖生长能力越弱.猪软骨细胞在COLII微图案材料上生长状况良好,随着培养时间的延长,软骨细胞多呈多边形;其软骨细胞培养效果优于无规则的涂覆COLII微图案材料.[结论]利用μCP技术成功构建的规整COLII微米级拓扑结构对猪关节软骨细胞的黏附铺展、增殖行为有促进作用,且线宽尺度与软骨细胞增殖生长能力呈反比趋势.即通过人为调控生物材料的表面活性拓扑结构,在一定程度上能有效调控或影响关节软骨细胞的生长行为.     

伤速康贴膏对兔膝骨性关节炎模型关节液中 IL-1, IL-6及TNF-。水平的影响

目的 探讨伤速康贴膏对兔膝骨性关节炎模型关节液中IL-1, IL-6及TNF-。水平的影响〔方法选用 口木大耳白兔30只随机分成模型组(A组)、伤速康贴膏组(B组)及骨通贴膏组(C组),B,C组采用改良Hulth造模 法5周后成功复制出兔膝骨性关节炎模型,A组不做任何治疗,B,C组分别予伤速康贴膏和骨通贴膏右膝关节外敷 4周,并于用药后第2周、4周2个时相点行右膝关节DR摄影并测定关节液中IL-1 ,IL-6及TNF-a含量〔结果2 个时相点右膝关节DR摄影示B,C组关节退行性改变较A组轻〔3组关节液中均可检测到IL-1 ,IL-6及TNF-a,B, C组在2个时相点含量均低于A组,差异有显著统计学意义(P<0.01),B,C组在2个时相点均无统计学差异(乃 0.05 )、结论伤速康贴膏可能通过降低关节液IL-1,IL-6及TNF-。的含量,对膝骨性关节炎具有防治作用、     

中药成分复方对兔外周血淋巴细胞增殖、IFN-γ和IL-10的mRNA表达以及兔出血症疫苗免疫效果的影响

【目的】研究两个中药成分复方（cCHMIs）的免疫增强作用和机理。【方法】选择黄芪多糖、淫羊藿多糖、蜂胶黄酮和人参皂苷4种中药成分组成两个复方,用MTT法和荧光定量RT-PCR法测定它们对兔外周血淋巴细胞增殖和IFN-γ、IL-10 mRNA的表达影响;并将两个复方作为佐剂,配合兔出血症疫苗免疫幼兔,以铝胶苗和无佐剂苗为对照,分别于免疫后7、14、21、35、49 d用MTT法和血凝抑制法测定外周血淋巴细胞增殖和血清抗体的动态变化,于免疫后63 d测定免疫器官指数和攻毒保护率。【结果】两个复方在体外均可以显著促进淋巴细胞增殖,提高淋巴细胞IFN-γ、IL-10 mRNA的表达;作为佐剂,两个复方可以显著提高免疫兔的血清抗体效价,促进体内淋巴细胞增殖,显著促进圆小囊、肠淋巴结等免疫器官的发育,有较高的攻毒保护效果。【结论】两个复方中药成分具有较强的免疫增强作用,可被开发成新型的免疫增强剂。     

中药成分复方对免外周血淋巴细胞增殖、IFN-Y和IL-10的mRNA表达以及兔出血症疫苗免疫效果的影响

[目的]研究两个中药成分复方(cCHMIs)的免疫增强作用和机理.[方法]选择黄芪多糖、淫羊藿多糖、蜂胶黄酮和人参皂苷4种中药成分组成两个复方,用MTT法和荧光定量RT-PCR法测定它们对兔外周血淋巴细胞增殖和IFN-y.IL-10 mRNA的表达影响;并将两个复方作为佐剂,配合兔出血症疫苗免疫幼兔,以铝胶苗和无佐剂苗为对照,分别于免疫后7、14、21、35、49 d用MTT法和血凝抑制法测定外周血淋巴细胞增殖和血清抗体的动态变化,于免疫后63 d测定免疫器官指数和攻毒保护率.[结果]两个复方在体外均可以显著促进淋巴细胞增殖,提高淋巴细胞IFN-Y、IL-10mRNA的表达;作为佐剂,两个复方可以显著提高免疫兔的血清抗体效价,促进体内淋巴细胞增殖,显著促进圆小囊、肠淋巴结等免疫器官的发育,有较高的攻毒保护效果.[结论]两个复方中药成分具有较强的免疫增强作用,可被开发成新型的免疫增强剂.     

中药复方多糖对不同MHC B-LβⅡ基因型鸡淋巴细胞IL-2、IL-4、IL-12 mRNA表达量的影响

【目的】中药复方多糖对不同MHC B-LβⅡ基因型鸡淋巴细胞IL-2、IL-4、IL-12 mRNA表达量的影响。【方法】采用PCR-SSCP方法将500羽京红1号蛋鸡按不同MHC B-LβⅡ基因型分组,采集不同MHC B-LβⅡ基因型鸡外周血淋巴细胞,分别加入终浓度为100、75、50、0μg/mL中药复方多糖共培养24 h,收集细胞,采用Real-time PCR方法检测不同MHC B-LβⅡ基因型鸡IL-2、IL-4、IL-12基因mRNA的表达量。【结果】(1)与对照组相比,不同剂量中药复方多糖均能显著增强不同MHC B-LβⅡ基因型鸡IL-2、IL-4、IL-12基因mRNA的表达量(P0.05)。(2)中药复方多糖剂量为50μg/mL时,AA、BC基因型鸡IL-2、IL-4、IL-12基因mRNA的表达量最高,中药复方多糖剂量为100μg/mL时,BB基因型鸡IL-2、IL-4、IL-12基因mRNA的表达量最高。【结论】中药复方多糖能不同程度的促进各MHC B-LβⅡ基因型鸡IL-2、IL-4、IL-12 mRNA的表达,且不同MHC B-LβⅡ基因型鸡淋巴细胞最适中药复方多糖免疫调节剂量不同。