SCF在绵羊黑色素细胞中的表达研究

表皮内干细胞因子(stem cell factor,简称SCF)是由角化细胞合成并分泌到细胞间隙,参与黑色素细胞存活、增殖和黑色素生成。为确定黑色素细胞能否合成SCF,分离培养绵羊的皮肤黑色素细胞,并运用免疫荧光技术对黑色素细胞内SCF进行检测,结果显示,分离培养的黑色素细胞特征明显,且在黑色素细胞中检测到存在SCF蛋白。据此可以推测黑色素细胞也能合成SCF,它在黑色素细胞存活、增殖和黑色素生成中发挥重要作用。     

KIT基因单核苷酸多态性与四川地区男性不育的相关性研究

\t\t\t\t\t目的\t\t\t\t\t研究KITLG基因在猪生殖细胞发育过程中的作用。\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t方法\t\t\t\t\t从GenBank下载猪KITLG序列作为参考序列,设计特异引物从版纳微型猪近交系(BMI)附睾组织中扩增KITLG基因完全编码序列及部分侧翼序列;应用半定量PCR技术检测BMI 10个重要组织的KITLG mRNA转录表达水平,并对KITLG翻译的蛋白质序列进行多种功能生物信息学分析,预测KITLG蛋白质的功能,最后构建KITLG的多物种氨基酸系统进化树。\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t结果\t\t\t\t\t扩增得到BMI KITLG编码区序列长825 bp,编码274个氨基酸,序列已提交GenBank,基因登录号KU705624,对应的氨基酸登录号AOC89042。多组织相对半定量表达分析表明：KITLG基因在附睾、心、脾、肺、肾、胃中高表达,在大脑、肝、小肠和睾丸中低表达。功能生物信息学分析表明：KITLG存在1个保守结构域SCF,有1个跨膜螺旋结构,存在N端信号肽序列,N末端和C末端均亲水,二级结构以α螺旋为主,有5类功能活性位点。系统进化分析表明：KITLG在进化中高度保守,且与牛、羊的亲缘关系最近。\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t结论\t\t\t\t\t研究结果为探索BMI KITLG基因在生殖细胞发育过程中的作用及功能奠定基础。\t\t\t\t\t\t\t\t\t     

长沙地区男性不育患者精索静脉宽度与中医体质类型相关性探讨

目的 通过对长沙地区男性不育患者进行中医体质的问卷调查,得出男性不育患者体质分布的特点及精索静脉宽度与中医体质的关系,分析常见病因对中医体质的影响,探讨中医药防治男性不育的新思路。方法 根据《中医体质分类与判定》（ZYYXH／T157-2009）对长沙地区344例不育男性进行中医体质判定,并分析精索静脉宽度与中医体质的相关性。结果 男性不育患者中平和体质占17.4%,单一偏颇体质占25.6%,混合偏颇体质占57.0%。总体体质类型前10位依次为平和质（17.4%）,湿热痰湿质（14.2%）,阳虚气虚质（9.59%）,湿热质（8.43%）,阳虚痰湿质（6.69%）,痰湿质（5.81%）、气虚湿热质（5.81%）,气虚质（4.94%）,阳虚质（4.36%）,气郁气虚质（3.49%）。男性不育患者双侧精索静脉宽度与中医体质分布差异有统计学意义（P<0.01）。湿热质、痰湿质在精索静脉曲张所致男性不育患者中分布比例较高。结论 男性不育患者中,平和质、湿热质和气虚质是主要单一体质类型;复合类型中各型相对分散,但仍然表现以湿热复合类为主要特征,而阳虚、气虚、痰湿复合类次之的分布特征。湿热质、痰湿质与精索静脉曲张所致男性不育存在一定联系。     

基于文献数据探析古代男性不育症用药特点

目的 通过整理、分析古代文献中古代医家治疗男性不育症所用方药,探讨古代治疗男性不育症用药特点。方法 收集古代文献治疗男性不育相关方剂93首,把方剂中所用中药录入Excel表格,进行频数频率统计,对高频次药物功效、归经的分布进行统计分析。结果 93首方剂共215味药物,药物的临床功效共20种;古代男性不育症的病机以虚证为主;其中使用频数在前22位的药物功效主要是补虚药、温里药、收涩药、利水渗湿药、安神药、活血化瘀药、攻毒杀虫止痒药、清热药,入肾药物占91.0%。结论 古代治疗男性不育症用药特点是以补虚药为主,同时攻补兼施、寒热并用、表里兼顾,注重调和阴阳气血平衡及补肾益精。     

人干细胞因子（SCF）5’旁侧调控序列与其全长cDNA融合克隆的构建及鉴定

目的：为研究人干细胞因子(SCF)5’旁侧1．42kb区域内不同序列对全长cDNA在真核细胞中表达的调控作用，构建了SCF5’旁侧1．42kb的调控序列与其1．2kb的全长cDNA融合克隆。方法：将PCR获得的SCF5'旁侧1．42kb的调控序列与RT-PCR获得的其1．2kb的全长cDNA克隆入pGEM—T载体，筛选正确插入方向，利用合适的限制性内切酶从中切出三个片段依次亚克隆入pUC19克隆载体中。结果：获得了SCF5'旁侧1．42kb的调控序列与其1．2kb的全长cDNA并成功地构建了它们的融合克隆。结论：T-载体在克隆添加了少量具有3’→5’外切核酸酶的PCR产物中仍然有效；在稍大片段的基因克隆操作中，利用分段亚克隆的方法，避开干扰另外的酶切位点，依次分段亚克隆更为可行。     

绵羊不同品种细管冷冻精液试验

采用三羟甲基氨基甲烷、柠檬酸、糖类、卵黄和甘油稀释液制作绵羊细管冻精,公羊选用杜泊羊、无角陶赛特羊、特克塞尔羊、黑萨福克羊和白萨福克羊。结果表明,细管冻精解冻后活率以黑萨福克羊活率最高,与杜泊羊和特克塞尔羊相比差异显著(P<0.05),其它品种之间相比差异不显著(P>0.05)。后来发现绵羊冻精品质与其在当地的适应性有一定的相关性。     

小鼠脊髓挫伤型损伤后caspase-3、bax、bcl-2和c-kit基因的表达

为揭示凋亡相关基因和c-kit基因在脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)后的相互关系,利用RT-PCR和免疫组化技术,分别检测了caspase-3、bax、bcl-2、c-kit的mRNA和蛋白在小鼠脊髓损伤后的表达。结果显示:在SCI后4 h开始出现大量的神经元和胶质细胞凋亡,其中促凋亡因子表达增加,而抑制凋亡因子表达量减少。caspase-3的mRNA和蛋白的表达在SCI后开始增加,并在72 h时达到峰值,bax表达规律与之基本一致,但是其峰值出现在24 h。随着时间的变化,bcl-2与c-kit的表达均表现为升高—降低—升高的变化趋势,与caspase-3和bax的变化趋势相反,且其调控作用均发生在caspase-3之前。此外,SCI后c-kit基因也呈现抑制凋亡的作用。表明:损伤是导致脊髓发生凋亡的因素之一;bcl-2是凋亡抑制因子,与bax共同控制细胞凋亡,并直接作用于下游caspase-3的表达。     

杨正望教授治疗PCOS性不孕验案举隅

多囊卵巢综合征（Polycystic ovary syndrome,PCOS）是目前青春期、育龄期女性最常见的内分泌及代谢性疾病之一。由于排卵功能障碍使PCOS患者受孕率降低,且流产率增高,PCOS成为生育期妇女不孕的重要原因。杨正望教授对PCOS性不孕的病因病机及其中西医治疗均有其独到的见解,认为本病基本病机为“肾、脾、肝三脏功能失调为本,痰湿、瘀血形成为标”,数种病因病机常相互错杂,同时并存,导致多种症状同时出现,治疗上三因制宜,擅长运用中药、西药、针灸、耳穴压豆等多种方法综合治疗,临床疗效显著。     

大白菜细胞质雄性不育系选育研究

以从引进的多份大白菜材料中分离出的细胞质雄性不育材料KM7930为母本,分别以太原二青和晋菜3号的4个亲本为回交父本,连续回交6代,并成功地转育到大白菜太原二青和晋菜3号上,获得的不育系不育性稳定,雌蕊功能正常,蜜腺发育良好,植物学性状优良,结子性好。试配组合2对,分别以太原二青和晋菜3号为对照进行田间检测,结果整齐度及产量均高于对照。     

液态甲醛对雄性小鼠生殖系统的毒性作用研究

为探讨液态甲醛对雄性小鼠生殖细胞的毒性和致突变作用,选用雄性昆明种小鼠为研究对象,进行液态甲醛腹腔染毒,7 d后测定睾丸脏器系数、精子数目、精子形态及精子畸形率及精子微核率。结果表明:中、高剂量组(2.0、20.0 mg/kg)甲醛具有明显的生殖毒性,小鼠睾丸指数、精子数量明显降低,小鼠精子存活率、活动率都受到显著影响;中、高剂量组的精子畸形率、微核率与阴性对照组比较,有显著性差异。由此说明,液态甲醛对雄性小鼠的生殖细胞具有明显的毒性和致突变作用。