半滑舌鳎（Cynoglossus semilaevis Günther）工厂化养殖技术的初步研究

本文就2005-2006年从山东引进的半滑舌鳎苗种的养殖概况进行了总结。半滑舌鳎苗种在工厂化条件下,养殖水温16.7℃-27℃,盐度20-25,经9个月养殖雌鱼体重可达500g,养殖15个月时,雌鱼体重可达1500g,雄鱼体重约300-500g。2005年引入的苗种总体成活率达99.6%,2006年引进的苗种养殖成活率为89.8%。购入的全长8-16cm,体重3-20g的半滑舌鳎苗种,经15个月的养殖可达到第一次性成熟。另外,探讨了水温对半滑舌鳎生长的影响和以防为主的疾病防治技术,并对半滑舌鳎全雌鱼养殖及国产化优质配合饲料的生产等方面作了初步的讨论。     

促进半滑舌鳎生长的秘诀

笔者结合参与渔业科技入户指导,对半滑舌鳎工厂化养殖示范户情况进行了调查,总结出促进半滑舌鳎生长的2个秘诀：     

半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis Günther)工厂化养殖技术的初步研究

本文就2005~2006年从山东引进的半滑舌鳎苗种的养殖概况进行了总结。半滑舌鳎苗种在工厂化条件下,养殖水温16.7℃~27℃,盐度20~25,经9个月养殖雌鱼体重可达500g,养殖15个月时,雌鱼体重可达1500g,雄鱼体重约300~500g。2005年引入的苗种总体成活率达99.6%,2006年引进的苗种养殖成活率为89.8%。购入的全长8~16cm,体重3~20g的半滑舌鳎苗种,经15个月的养殖可达到第一次性成熟。另外,探讨了水温对半滑舌鳎生长的影响和以防为主的疾病防治技术,并对半滑舌鳎全雌鱼养殖及国产化优质配合饲料的生产等方面作了初步的讨论。     

工厂化养殖半滑舌鳎生长、摄食和水质的变化特征及规律

在封闭循环水养殖条件下,进行6×2双因素随机设计动物试验,即6个体重阶段(45～550 g)和2个密度水平(高密度比正常密度提高20%～30%),共形成12个处理,每处理3个重复,试验期44 d.探寻我国北方工厂化养殖半滑舌鳎生长、摄食和水质的变化特征及规律.结果表明:(1)日增重、日均摄食量、饲料系数等绝对指标与体重阶段呈正相关;氨氮、COD等水质指标相对浓度与体重阶段呈负相关;(2)常规水质条件下,高密度养殖不利于生长、摄食和降低水体有害物,其副作用起初并不明显,随着试验时间的推移不断加大;(3)新发现半滑舌鳎的日摄食率为0.43%～0.92%,对常规鱼类投饲率推荐范围(2%～5%)提出了质疑,为现代海水养殖精准饲喂和清洁生产提供了科学依据;(4)本试验条件下,体重45～550 g阶段半滑舌鳎的特定生长率为(1.42%～0.50%)/d,饲料系数为0.68～0.86,水中氨氮为8.45～1.51 mg/(kg.h).     

半滑舌鳎土池养殖试验

2006年6月,从山东引进半滑舌鳎鱼苗950尾于面积0.2 hm2的单养池塘进行试养.经过8个月的养殖,至2007年2月,共捕获半滑舌鳎810尾,起捕率85%,最大舌鳎鱼体长达到36 cm,体质量405 g,平均体长30.5 cm,体质量340 g.试验过程中发现在33 ℃高温和10 ℃的低温季节,半滑舌鳎均可生长,月平均增长率甚至高达28%,在此温度范围内,半滑舌鳎的生长与温度的相关关系不显著;但对温度快速下降的耐受性较差,易钻泥导致窒息死亡.     

半滑舌鳎工厂化养殖试验

半滑舌鳎CynoglossussemilaevisGünther(见彩中插2),又称半滑三线舌鳎,目前活鱼市场价格约为300元/千克,具有很高的经济价值。2005年6～12月,我们在苍南县渔寮大宏养殖场进行养殖试验,取得了较好的效果。现将试验结果总结如下:一、材料与方法1.养殖池条件于室内进行养殖。试验     

半滑舌鳎海水池塘网箱养殖技术

对半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis Gunther)海水池塘网箱养殖模式的可行性、养殖技术操作进行研究。在天津市汉沽立信水产有限公司进行养殖试验,在池塘中构建模块化浮动式网箱养殖,养殖时间从2013年8月5日至2013年10月28日,养殖周期为84d。在养殖期内,体长增长约17.28cm,体重增加284.30g,半滑舌鳎体长和体重的增长显著;在养殖周期内,存活率为84.0%,饵料系数为1.07。结果表明,该养殖模式下,半滑舌鳎积极摄食,无异常病害,生长速度快,而且操作简单,节约成本,是工厂化循环水养殖的有利补充。     

半滑舌鳎工厂化养殖技术

半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis Cunther)属鲽形目、舌鳎科、舌鳎属,俗称鳎目、鳎米,是我国传统的名贵鱼类,黄、渤海常见的大型舌鳎,海捕的最大个体可达3kg。其内脏团小,出肉率高,肉质营养丰富,具有高蛋白、低脂肪、富含维生素、口感细滑等特点,且     

卤淡水工厂化养殖半滑舌鳎探析

半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis Günther)属鲽形目、舌鳎科,俗称鳎米、牛舌头等。半滑舌鳎为底栖大型鱼类,以肉质细嫩、味道鲜美、经济价值高著称,是我国南北方市场广泛认可的优质名贵鱼类。由于种群繁殖能力弱,近海捕捞强度大,自然界中半滑舌鳎数量日渐稀     

利用半循环海水养殖半滑舌鳎试验

随着水资源的日益匮乏和自然海区污染的逐渐加重,寻找一种封闭式或半封闭式的养殖模式已经成为当前工厂化养殖势在必行的途径。本文以半滑舌鳎为养殖对象,于2005年3月至5月运用自制循环水处理系统产生的海水进行了为期两个月的饲养试验。现将情况介绍如下:一、试验对象及设施1.     

不同脂肪含量的配合饲料对半滑舌鳎苗种生长的影响

通过不同脂肪含量饲料的对比喂养试验,初步了解半滑舌鳎（Cynoglossus semilaevis）对饲料中脂肪含量的需求,使用脂肪含量分别为10.9％、14.2％和16.6％的配合饲料对半滑舌鳎进行了60d的喂养试验.结果表明,用脂肪含量为10.9％的配合饲料喂养的半滑舌鳎生长情况优于其他两种更高脂肪含量的配合饲料....     

半滑舌鳎生长相关的微卫星标记及优势基因型

本研究利用SPSS 19.0的GLM模型分析28个微卫星标记与半滑舌鳎Cynoglossus semilaevis生长性状的相关性,结果获得14个与半滑舌鳎体质量(BWe)、体长(BL)或体宽(BWi)显著相关的微卫星标记。与雄性个体生长性状显著相关的7个标记中,cse56与体质量、体长和体宽3个性状均显著相关(P0.05);csou24、hncyse68、hncyse147和hncyse148与体质量和体宽显著相关(P0.05)。与雌性个体生长性状显著相关的10个标记中,cse151和csou56与3个性状均显著相关(P0.05);csou33、csou39和hncyse108等5个标记与其中2个性状显著相关(P0.05)。csou24、hncyse147和hncyse148在雄、雌群体中均表现出与生长性状的相关性。本研究共筛选出17个对雄性个体生长具有显著正面影响的优势基因型,29个雌性个体的优势基因型。     

半滑舌鳎多聚免疫球蛋白受体(pIgR)基因的克隆和表达分析

本研究根据半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)基因组数据库中预测的多聚免疫球蛋白受体(Polymeric immunoglobulin receptor, pIgR)序列,通过PCR和RACE技术获得了半滑舌鳎pIgR基因cDNA,全长为1419 bp,开放阅读框(ORF)为1020 bp,编码339个氨基酸,5′UTR区域为109 bp,3′UTR区域为290bp。保守结构域分析显示,半滑舌鳎pIgR蛋白包含1个信号肽,2个免疫球蛋白功能域(Ig-like domain, ILD)和1个跨膜结构域。经蛋白序列同源比对和系统进化树分析,发现半滑舌鳎pIgR与大菱鲆(Scophthalmus maximus)和牙鲆(Paralichthy solivaceus)的pIgR亲缘关系最近。实时荧光定量PCR分析显示,pIgR基因在健康半滑舌鳎的不同组织中均有表达,在鳃中表达较高,在肌肉中表达最低。经哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)病原感染刺激后,pIgR基因在半滑舌鳎的5个组织(肝脏、脾脏、肾脏、肠和鳃)中均呈先上升后下降的趋势,其中,在脾脏和鳃中48 h达到最高值,在肝脏、肾脏和肠中72 h达到峰值。与内脏组织不同的是,pIgR基因在皮肤中呈一直上升的趋势。上述结果表明,pIgR基因在半滑舌鳎抵御哈维氏弧菌的免疫应答中发挥重要作用。     

半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)黑色素富集激素基因的克隆和表达

为研究黑色素富集激素基因(MCH)表达调控与半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)无眼侧黑化性状的关系,通过分子克隆获得了半滑舌鳎pMCH2,通过NCBI获得了pMCH1 cDNA序列,分析了pMCH mRNA的组织表达特性,探索了脑垂体和皮肤中的pMCH mRNA表达与无眼侧黑化程度的关系.结果显示,pMCHl cDNA序列长476 bp,编码134个氨基酸,与鲽形目、鲤形目和鲈形目鱼类的pMCH1氨基酸聚为1个进化分支.pMCH2 cDNA序列全长为626 bp,编码147个氨基酸,与鲽形目和鲍形目鱼类的pMCH2氨基酸聚为1个进化分支.2种MCH mRNA在垂体中表达量最高,同时,MCH1 mRNA在除肌肉外的其他组织中均可检测到表达;MCH2 mRNA在脑、有眼侧皮肤、无眼侧正常皮肤、性腺和鳃组织中也可检测到较高表达.MCH mRNA表达与无眼侧黑化程度的关系分析显示,脑垂体和皮肤中MCH1 mRNA表现出相似的表达变化趋势,都是10％黑化组的表达量最高,而后随黑化程度加大显著降低.对于MCH2而言,无眼侧正常鱼和无眼侧50％黑化鱼的脑垂体中都具有较高的MCH2 mRNA表达水平,但在无眼侧10％黑化组和无眼侧80％黑化组,其表达水平显著降低.皮肤中MCH2表现出随黑化程度加大而显著升高的趋势.本研究结果可为认识MCH基因与半滑舌鳎无眼侧黑化性状的表达调控关系提供基础资料.     

饲料中添加不同水平的维生素E对半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)亲鱼繁殖性能及后代质量的影响

在饲料中分别添加0、200、1200 mg/kg的维生素E(DL-α-生育酚乙酸脂形式)配制成Ec、El和Eh三种试验饲料,饲喂3龄半滑舌鳎亲鱼(雌性1.58±0.19 kg/尾、雄性0.20±0.05 kg/尾)70 d,探讨饲料中添加不同水平的维生素E对半滑舌鳎亲鱼繁殖性能的影响。结果显示,饲料中添加1200 mg/kg的维生素E(Eh组)不仅可以促进亲鱼性腺的发育,提高亲鱼产卵量、浮卵率、受精率、孵化率以及初孵仔鱼长度,而且影响仔鱼质量,仔鱼的成活率、12 d仔鱼长度、生存活力等方面均要高于对照组。而饲料中添加200 mg/kg的维生素E(El组)只对亲鱼性腺的发育和初孵仔鱼长度有一定的促进作用,对亲鱼产卵量、浮卵率、受精率、孵化率没有显著影响(P>0.05)。随饲料中维生素E的增加,血清中SOD的活性显著升高(P<0.05),MDA含量则显著下降(P<0.05)。此外,El和Eh试验组卵中干物质、维生素C的含量,以及卵子脂肪酸中PUFA、n-3PUFA、n-3HUFA和n-6PUFA的含量均要高于Ec组,El和Eh试验组之间的没有显著性差异(P>0.05)。结果表明,在半滑舌鳎亲鱼饲料中添加适量维生素E会亲鱼促进性腺的发育,增加产卵量,提高卵子和仔鱼的质量。在本试验中Eh组(1200 mg/kg)亲鱼的繁殖性能要优于Ec组(0 mg/kg)和El组(200 mg/kg)。     

循环水养殖半滑舌鳎成鱼摄食活动对主要水质因子的影响

在封闭循环水养殖条件下,半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis Günther)的平均养殖密度(15.07±0.22)kg/m3,观测半滑舌鳎的呼吸频率,检测养殖水体中溶氧、氨氮、亚硝酸氮等24 h内摄食和代谢的变化规律。结果表明:(1)半滑舌鳎摄食前、后的呼吸频率平均值分别为27.3次/min和34.7次/min,摄食后的呼吸频率显著高于摄食前;(2)投喂前、后2.5 h内,水中溶氧一直处于下降趋势,在摄食2.5 h后,水中溶氧处于稳定的上升趋势;(3)投喂后,氨氮、亚硝酸氮浓度显著增高,2.5 h后达到峰值,随后缓慢降低,在下次投喂前0.5 h达到最低值。说明半滑舌鳎摄食活动对循环水养殖水质的影响呈现规律性,也说明循环水养殖模式可以满足半滑舌鳎对水质的基本要求。     

半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis) Nramp基因克隆与表达分析及SNP筛选

天然抗性相关巨噬细胞蛋白(Natural resistance-associated macrophage protein, Nramp)属于膜整合转运蛋白,具有抑制胞内寄生菌侵染、调节巨噬细胞的抗菌活性等作用。本研究对半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)Nramp基因进行了克隆和表达分析,并对其与抗鳗弧菌感染相关的单核苷酸多态性(Single Nucleotide Polymorphism, SNP)位点进行了筛选。该基因cDNA序列全长3717 bp,其中开放阅读框(Open reading frame, ORF)1677 bp,所编码蛋白含有558个氨基酸,该蛋白具有Nramp家族的典型特征,包括10个跨膜区(Transmembrane, TM)、1个由20个氨基酸残基组成的胞质内转运蛋白特征结构域(Consensus Transport Motif, CTM)。半滑舌鳎Nramp的ORF末端有1个类似于脊椎动物Nramp2中的铁反应控制蛋白结合位点(Iron-responsive regulatory protein-binding site, IRE)。半滑舌鳎Nramp与其他14个物种的Nramp氨基酸序列同源性在63%?91%之间,系统进化分析表明,半滑舌鳎Nramp和所有鱼类Nramp聚集为一簇,与其他物种Nramp2的亲缘关系较近。实时荧光定量PCR分析显示,Nramp基因在半滑舌鳎脾脏和肾脏中的表达量最高,而在肌肉和性腺中的表达量最低;在哈维氏弧菌感染的半滑舌鳎肾脏、脾脏和肝脏中表达量呈升高趋势,而在鳃中则表现为下调趋势。利用直接测序法检测感染鳗弧菌后同一家系的233个个体(抗病个体165个,感病个体68个),共检测到15个SNP位点,对其中3个SNP 位点即 SNP-g.3113(T→C)、SNP-g.3125(A→G)和 SNP-g.3164(A→T)进行测序分型后发现,SNP- g.3125(A→G)的等位基因(G)频率和基因型(GG)频率与半滑舌鳎抗鳗弧菌疾病呈极显著相关(P<0.01)。研究结果表明,Nramp 基因不同基因型对半滑舌鳎的抗病能力有着极其重要的影响,SNP-g.3125(A→G)可作为潜在的抗性遗传标记位点。本研究将为半滑舌鳎抗性品系培育提供技术支持。     

半滑舌鳎甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶1基因的克隆及表达分析

甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶1(Mannan-binding lectin associated serine protease 1,MASP1)是补体凝集素途径中起重要作用的激活蛋白。本研究以半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)为研究对象,应用RACE技术和实时荧光定量qRT-PCR技术对半滑舌鳎MASP1基因(Cynoglossus semilaevis MASP1,CsMASP1)进行了克隆和表达模式分析。结果显示,CsMASP1基因c DNA序列全长为2507 bp,5′非编码区长82 bp,3′非编码区长142 bp,开放阅读框长2283 bp,共编码760个氨基酸;CsMASP1基因包含13个外显子和12个内含子,与多数已知鱼类的MASP1基因结构一致;SMART分析显示,CsMASP1包含6个结构域,与哺乳动物、鸟类、其他鱼类的结构域一致;同源比对发现,CsMASP1和鱼类的相似度较高,与金目鲈(Latescalcarifer)的相似性最高,为76%。CsMASP1基因在11种健康组织(血液、脑、鳃、性腺、心脏、头肾、肠、肝、皮肤、脾和后肾)中均有表达,其中,在肝、脾和头肾中表达量较高;鳗弧菌(Vibro anguillarum)感染后,CsMASP1基因在6种免疫组织(血液、鳃、头肾、肠、肝和脾)中呈现不同的表达模式,在6种免疫组织中呈现明显的上调表达,肝的表达峰值出现在感染后24 h;脾和鳃的表达峰值出现在感染后6 h;肠、头肾和血液的表达峰值均出现在感染后12h;随着病原菌感染时间增加,基因表达量逐渐降低并恢复至正常水平。研究表明,CsMASP1基因参与了半滑舌鳎的免疫应答过程,本结果为半滑舌鳎的免疫机理研究奠定了基础。     

促性腺激素调控半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)卵母细胞孕酮受体膜组分1的表达特征

采用qRT-PCR方法分析性成熟半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)不同发育时期卵巢卵母细胞的孕酮受体膜组分1 (PGRMC1)mRNA的表达,研究发现,在发育Ⅳ期的卵巢,处于第Ⅳ时相的卵母细胞PGRMC1 mRNA表达量最高(P＜0.05);在发育Ⅴ期的卵巢,成熟期卵母细胞的PGRMC1mRNA表达量最高(P＜0.05).采用不同浓度促性腺激素(HCG)处理卵巢发育Ⅴ期半滑舌鳎不同时相的卵母细胞,并通过qRT-PCR和Western blotting技术对其表达量变化进行检测.结果显示,20IU/mlHCG对PGRMC1 mRNA和蛋白表达的调控作用比10 IU/ml HCG作用更明显,表明PGRMC1 mRNA和蛋白表达对HCG调控作用存在剂量依存关系.HCG对半滑舌鳎不同时相的卵母细胞的调控作用效果不同,对第Ⅴ时相卵母细胞作用最明显(P＜0.05),表明PGRMC1主要在卵母细胞成熟阶段发挥作用.PGRMC1对HCG调控作用的正向应答效应预示其参与了卵母细胞成熟调控,为进一步探讨PGRMC1在半滑舌鳎繁殖过程的功能提供重要基础资料.     

半滑舌鳎的生物学特性及养殖技术

半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis Gtinther)属碟形目,舌鳎科,舌鳎属,三线舌鳎亚属,俗称牛舌头、鳎目、鳎米等。半滑舌鳎分布于朝鲜、中国、日本的近海。我国沿海均产,栖息于泥沙质海底,食性广,抗逆性强,生长速度快,主要摄食底栖无脊椎动物,体长一般为200～500mm,最大体长可达800mm,适合于我国沿海养殖。该鱼肉质细腻,味道鲜美,营养丰富。