HPLC法检测发酵玉米粉中的黄曲霉毒素B_1、B_2、G_1、G_2

发酵玉米粉用甲醇∶水(8+2,v+v)提取,经免疫亲合柱(IAC)分离纯化、在线光化学衍生器柱后衍生化后,反相HPLC荧光检测器测定AFT含量。4种毒素在0.5ng/g和2ng/g两个水平下的样品加标回收率平均值分别为B188.0%和93.6%、B285.2%和85.3%、G192.4%和91.5%、G289.6%和85.6%;5次测定的精密度SD值分别为:B12.5和6.3、B23.5和6.0、G12.8和9.0、G22.3和6.9;4种毒素的方法检出限均达到0.05ng/g;样品中4种毒素测定值分别为B1(102±5.4);B2(47±9.2);G1(63±7.4);G2(30±4.9)。     

HPLC法检测发酵玉米粉中的黄曲霉霉素B1、B2、G1、G2

发酵玉米粉用甲醇水(8+2,v+v)提取,经免疫亲合柱(IAC)分离纯化、在线光化学衍生器柱后衍生化后,反相HPLC荧光检测器测定AFT含量.4种毒素在0.5ng/g和2ng/g两个水平下的样品加标回收率平均值分别为B188.0%和93.6%、B285.2%和85.3%、G192.4%和91.5%、G289.6%和85.6%;5次测定的精密度SD值分别为B12.5和6.3、B23.5和6.0、G12.8和9.0、G22.3和6.9;4种毒素的方法检出限均达到0.05ng/g;样品中4种毒素测定值分别为B1(102±5.4);B2(47±9.2);G1(63±7.4);G2(30±4.9).     

光化学衍生法测定玉米及玉米制品中的黄曲霉毒素B1

为研究玉米及玉米制品被黄曲霉毒素B1污染的情况,确保市场上玉米及玉米制品的食用安全,本文旨在建立免疫亲和柱净化-高效液相色谱-柱后光化学衍生-荧光法测定玉米和玉米制品中黄曲霉毒素B1含量的方法。将玉米和玉米制品试样粉碎后,试样粉末在甲醇-水溶液（体积比为55:45）条件下提取,经免疫亲和柱富集和净化后,以甲醇-水溶液（体积比45:55）为流动相,采用XDB-C18色谱柱（5 μm×4.6 mm×250 mm）,由光化学柱后衍生,荧光检测器检测（Ex：360 nm,Em：440 nm）。结果表明：黄曲霉毒素B1的最低检出限和定量检出限分别为0.009 μg/kg和0.03 μg/kg,标准曲线的线性范围为0.1 ~ 0.5 mg/L（R=0.9990）,2个不同水平的加标平均回收率为88.4% ～ 90.1%,RSD值为0.47% ～ 1.07%。该方法具有操作简便、灵敏度高、重现性佳等特点,适用于玉米和玉米制品中黄曲霉毒素B1的检测。 [关键词] 免疫亲和柱|高效液相色谱|柱后光化学衍生|黄曲霉毒素B1     

黄曲霉毒素B2a的研究进展

黄曲霉毒素(aflatox in,AFT)是一类有毒致癌化合物,污染粮食及其制品,给人类及动物健康造成严重威胁。AFB2a是AFT的一种,作者对AFB2a的毒性、生物学活性及其抗体的反应性进行了综述。由于AFB2a的毒性远远低于AFB1,而且AFB2a抗体能与AFB1及其在体内的代谢产物发生免疫学交叉反应,因此AFB2a的抗体,尤其是单克隆抗体对人、畜AFT中毒病的早期诊断、治疗、AFB1在体内的代谢转归、肿瘤预防以及食品卫生监测有着非常重要的意义,而有关AFB2a的单克隆抗体方面的研究,国内还未见报道。     

迅速检测饲料中的黄曲霉毒素

大部分养禽人现在都认识到给家禽饲喂发霉的花生饼粉或玉米粉所冒的风险.自六十年代英国诺福克郡一家禽场发生大批火鸡中毒事件以来,黄曲霉毒素-一种曲霉菌的生长过程中的副产物-的危害性得到了确认和证明.从那时起开展的广泛研究表明,家禽饲料中存在黄曲霉毒素会导致下列后果:抑制生长、减少产蛋量、降低蛋的孵化率、肝脏损害、免疫抑制、疫苗失     

免疫亲和柱高效液相色谱法测定饲料中的黄曲霉毒素

本文用甲醇+水溶液提取饲料样品中的黄曲霉毒素,提取液用免疫亲和柱纯化,甲醇洗脱,经在线光化学柱后衍生,高效液相色谱法测定。方法的回收率为69.98%～80.60%,相对标准偏差为3.97%～7.32%。本方法在15～1500pg范围内成线性,相关系数大于0.9998,最低检出限为3.25pg。     

用MycoSepTM净化柱和高效液相色谱法对谷物中黄曲霉毒素B1、G1、B2、G2的测定

用一种快速方便的MycoSep^TM净化柱和高效液相色谱法对谷物中黄曲霉毒素B1、G1、B2、G2进行测定。样品经乙腈-水（体积比84：16）提取,提取液通过MycoSep^TM净化柱净化、浓缩,三氟乙酸（TFA）柱前衍生,C18色谱柱分离,荧光检测器检测,外标法定量。对添加两个浓度黄曲霉毒素的玉米样品进行加标回收实验,4种毒素的回收率均在90．44％-101．23％之间,B1、G1、B2、G2的最低检测限分别为2．0、1．0、0．5、0．5ng／kg。实验结果表明,此法不仅定量准确,精密度高而且操作极为方便。     

酶联免疫法检测饲料中黄曲霉毒素B1

本文采用ELISA法测定黄曲霉毒素B1。本法检测线性范围0.1～10ng/ml,最底检出浓度0.1ng/ml,回收率87%～95%。本法具有快速、简便和一次可批量定性定量的优点,适用于饲料等样品的黄曲霉毒素B1的分析测定。     

17种植物性饲料原料中伏马毒素(B1+B2)、赭曲霉毒素A、T-2毒素、黄曲霉毒素B1污染状况调查检测分析

为了解掌握伏马毒素（B₁+B₂）、赭曲霉毒素A、T-2毒素、黄曲霉毒素B₁在植物性饲料原料中的污染状况,指导饲料生产企业和养殖企业开展霉菌毒素防控,降低霉菌毒素对饲料产品质量及畜禽养殖危害,减少经济损失,2019年对17种62份植物性饲料原料进行采集,采用液相色谱—串联质谱法、免疫亲和柱净化—高效液相色谱法检测,依据《饲料卫生标准》（GB 13078—2017）判定分析。结果表明：伏马毒素（B₁+B₂）、赭曲霉毒素A、黄曲霉毒素B₁在17种植物性饲料原料中的污染状况差别明显,伏马毒素（B₁+B₂）、赭曲霉毒素A、黄曲霉毒素B₁平均检出率分别为37.09%、8.06%、29.03%,最大检测值分别为15.96 mg/kg、26.60 μg/kg、351.00 μg/kg。从检测结果得出,4种霉菌毒素在17种植物性饲料原料中的污染较重,整体污染率达48.40%,玉米皮、喷浆玉米皮、花生粕3种植物性饲料原料中黄曲霉毒素B₁超标,污染率与超标率不一定呈正比,表明霉菌毒素在植物性饲料原料中污染普遍,对饲料产品及养殖安全造成严重影响。针对该问题,提出控制植物性饲料原料质量建议,为今后控制饲料原料中霉菌毒素含量提供参考。     

黄曲霉毒素B1免疫检测方法的新进展

黄曲霉毒素是迄今发现毒性最强的一类生物毒素，包括AFB1、AFB2、AFB2a、AFG1、AFG2、AFM1、AFM2、AFQ1、AFQ2a等10余种毒素。作者介绍了黄曲霉毒素B1和M1抗体制备和检测方法的研究进展，通过对各种检测方法优缺点的比较分析，得出结论：寻求安全、快速、准确和经济的检测方法已成为黄曲霉毒素研究中亟待解决的任务之一。     

HPLC法和LC-MS/MS法测定饲料中黄曲霉毒素B1含量的比较

比较了HPLC光化学衍生化法、HPLC三氟乙酸衍生化法、LC-MS/MS法对饲料中黄曲霉毒素B₁（AFB₁）的检测结果进行验证和比较,为AFB₁实验室检测工作中适宜方法的选择提供参考依据。结果表明：HPLC光化学衍生化法和HPLC三氟乙酸衍生化法均有良好的线性范围和相关系数（R≥0.999 97）,AFB₁的回收率为88.4%~104.6%,精密度均小于5%;LC-MS/MS法相关系数R≥0.999 00,AFB₁的回收率为85.3%~96.8%,精密度小于3%。提示对于饲料中AFB₁的检测,HPLC光化学衍生化法操作简单、灵敏度高、稳定性好,但检测成本较高;HPLC三氟乙酸衍生化法检测成本低,但样品基质干扰大,操作较繁琐;LC-MS/MS法定性准确,但定量准确度稍差,检验成本最高。     

免疫亲和色谱高效液相色谱法检测鲟鱼肌肉中常山酮的残留

试验建立了由免疫亲和色谱-高效液相色谱方法检测鲟鱼肌肉中常山酮的残留。样品经胰蛋白酶酶解,乙酸乙酯提取,再用0.125mol/l的醋酸铵缓冲液分离,经免疫亲和色谱柱净化,以乙腈-乙酸铵缓冲液-水为流动相(含0.1%三乙胺),反相液相色谱-紫外检测法检测,检测波长243nm。在20～200μg/kg添加浓度的范围内,样品回收率分别为75.4%～82.0%,变异系数分别为0.7%～8.6%。方法检测限为10μg/kg。结果显示:本方法灵敏度高,干扰少,重复性好。     

柱前衍生化-高效液相色谱法检测疫苗中游离甲醛含量

建立了测定疫苗中游离甲醛含量的柱前衍生化-高效液相色谱法。采用2,4-二硝基苯肼衍生疫苗中游离甲醛,乙腈︰水(65︰35)为流动相,流速为1.0 m L/min,色谱柱为Waters Atlantis T3柱(4.6 mm×250 mm,5μm),检测波长为365 nm。在此方法下,3个不同甲醛浓度样品回收率为98.28%~105.24%,相对标准偏差(RSD)为2.3%。本方法检测限为0.4 mg/L,定量限为1.6 mg/L。游离甲醛浓度在0.0040~1.1930 mg/m L范围内,与甲醛衍生物峰面积呈良好的线性关系(r2=0.9991)。结果表明,该方法分离度高,专属性强,操作简单且不易受疫苗基质和颜色影响,可用于测定疫苗中游离甲醛含量。     

HPLC法测玉米蛋白粉和乳猪教槽料中色氨酸的含量

试验采用高效液相色谱法测定饲料样品中色氨酸的含量。样品经过处理后,用Agilent C18(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱分离样品,以0.008 5 mol/l的乙酸钠+甲醇=95+5为流动相;检测波长280 nm,流动相流速1.0 ml/min。结果表明,色氨酸在4.656~298μg/ml范围内,峰面积与其浓度线性关系良好(r=0.999 9),最低检测限为0.033 5μg/ml,两种饲料中色氨酸含量均在国标允许的误差范围内。方法准确、简便、快速,适用于色氨酸的含量测定。     

高效液相色谱法测定金荞麦超微粉原花青素B2含量

试验为测定金荞麦超微粉中有效成分原花青素B₂的含量,将四川金荞麦饮片粉碎至0.75 nm以下的超微粉,50%乙醇提取,并利用高效液相色谱测定原花青素B₂的含量。结果显示,在0.0352~1.4080 μg/mL范围内原花青素B₂与峰面积线性关系良好,回归方程为Y=59797X+592.3,r=0.996,金荞麦超微粉中原花青素B₂含量在1.305~1.541 mg/g之间。本试验结果表明该方法能快速、稳定、精确的检测原花青素B₂含量,为金荞麦制剂质量控制提供了科学依据。     

HPLC法测定盐酸氨丙啉的含量及对杂质2-甲基吡啶进行检查

采用高效液相色谱法测定盐酸氨丙啉的含量及对杂质2-甲基吡啶进行检查.用Waters XTerraTM RP C18色谱柱,以乙腈-甲醇-庚烷磺酸钠溶液(将12 g的1-庚烷磺酸钠溶于1000 mL水中,加24mL冰醋酸,6 mL的三乙胺制得)(5:35:60)为流动相,用紫外检测器于254nm处检测,柱温30℃,流速1.0 mL/min.在该条件下盐酸氨丙啉和2-甲基吡啶的分离度很好,盐酸氨丙啉浓度在0.05～0.50 mg/mL范围内,其色谱峰面积与浓度呈良好的线性关系,回归方程为y=3.07×107x-3.90×104,r=0.999 9,RSD=0.76%.该法适用于盐酸氨丙啉原料药的质量控制.     

牛奶中替米考星残留量的检测方法研究

建立了牛奶中替米考星残留量的检测方法。样品用乙腈提取，C18柱净化，在290nm波长下进行HPLC测定。在空白牛奶中添加0．025、0．05、0．10μg/mL浓度的替米考星时，该方法的平均回收率在72．1％～85．8％之间，日内变异系数在7．0％～10．7％之间，日间变异系数在3.5％～5．4％之间，检测限为0．005μg／mL。该方法适用于牛奶中替米考星残留量的测定。     

青饲料中氨基甲酸酯类农药残留的高效液相色谱法测定

本试验建立了一种简便而准确的前处理方法——高效液相色谱法,用于检测青饲料中7种氨基甲酸酯类农药的残留.用高效液相色谱法紫外检测器测定多菌灵,用高效液相色谱柱后衍生系统荧光检测器测定克百威或3-羟基克百威、涕灭威或涕灭威砜、涕灭威亚砜及甲萘威.结果显示：青饲料中7种农药的加标回收率（n=6）在73.2％～98.3％,RSD在2.1％～6.9％,方法的检出限（以3倍信噪比计）为0.19～0.90 μg/kg.