辽宁凤城市红松中松材线虫的分离与鉴定

近年来松材线虫Bursaphelenchus xylophilus在我国由南向北逐渐扩张并危害新的寄主。对辽宁省凤城市样地中红松Pinus koraiensis受害情况调查,利用显微镜形态观察和分子测序的方法对病原线虫进行综合鉴定。结果发现:凤城市样地中半枯和枯死红松体内均存在松材线虫,且87.7%以上为扩散型3龄幼虫,其分子鉴定结果与NCBI数据库中松材线虫的ITS和28S多个序列均完全相同,综合判断枯死红松中的病原线虫为松材线虫,由此确定松材线虫在我国自然条件下侵染红松。     

快速检疫中培养松材线虫的冷藏真菌菌种筛选

松材线虫病是一种通过媒介昆虫携带松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)侵染松树而导致松树迅速死亡的一种毁灭性传染病害。人为调运未经处理或处理不彻底的感病原木、木材、薪材及包装箱等制品是病害扩散的主要原因。随着国际贸易往来和国内各地之间各种形式的交流日益频繁,     

疫木保湿直接培养松材线虫的研究

选用来自松材线虫Bursaphelenchus xylophilus（Steiner ＆ Buhrer）Nicle病疫区的6株病树和1块沙发板条作为试验材料,进行了培养温度和时间对疫木直接保湿培养松材线虫分散型3龄幼虫发育成熟影响的研究。结果表明,30℃恒温条件下培养72h,幼虫的成虫率25％,高于25℃的成虫率。30℃培养72h,25℃培养96h以上时进行松材线虫快速检验,结果受疫木中线虫的分布和含量影响较小。     

不同真菌对松材线虫繁殖的影响

本文从四川某地木材样品上分离得到松材线虫,并利用板栗疫病菌、枯斑盘多毛孢、绿色交链孢、腐皮镰刀菌这四种来源不同的真菌进行繁殖.结果表明:松材线虫在板栗疫病菌中繁殖倍数最高可达406倍(一皿d=9cm);在枯斑盘多毛孢中,松材线虫最高可增殖322倍;而松材线虫在绿色交链孢中最高可增殖50.4倍;腐皮镰刀菌中松材线虫增殖倍数仅为11.2.实验同时表明,松材线虫对菌丝年龄有选择性.     

处理松材线虫病疫木的木腐真菌筛选

【目的】通过室内和田间试验筛选能在有效降解松材线虫病疫木的同时,还能够抑制松材线虫在疫木内生活移动的木腐真菌,为研发松材线虫病疫木高效环保除治新途径提供依据。【方法】利用选择培养基从腐朽松木样本中初筛出19个木腐真菌。在不同种类木腐真菌平板上接入2 000条松材线虫共培养,从中筛选出能抑制松材线虫生长繁殖的菌株。通过测定受木腐菌侵染的黑松试样的失重率,判定木腐真菌对松木的腐解能力。选择能有效抑制松材线虫繁殖且降解松木能力强的菌株进行田间试验。采用液体摇瓶培养菌丝接种田间疫木,处理4个月后均匀钻孔取样,分析整段疫木内松材线虫数量变化。5—6月,收集天牛蛹室周围木样(0.5～1 cm),分析蛹室周围木样内松材线虫数量,同期在钢丝网罩中定期捕捉羽化的天牛,分析羽化天牛携带线虫的数量。【结果】室内筛选出7株能抑制松材线虫繁殖且降解木材能力强的木腐真菌,其中在菌株J5-2的平板上培养8天后,每皿仅分离出(18±10)条线虫,在硫磺菌和糙皮侧耳的平板上则完全分离不到松材线虫。在供试菌株中,硫磺菌对松木的降解能力最强,侵染黑松木材4个月后,试样失重率达到22.82%,其次是菌株S4,造成木块重质损失了21.68%。田间试验表明,7种木腐真菌接种4个月后,均能使疫木内松材线虫种群数量减少,其中菌株J5-2、硫磺菌、S4可使蛹室线虫数量减少65%以上,天牛携带线虫数量低于每头200条。菌株J5-2除害效果最佳,使疫木蛹室线虫数量减少72%,每只天牛携带松材线虫仅(15±4)条,最高携带量仅为60条。经鉴定菌株J5-2为Ceriporia sp.。【结论】菌株J5-2、硫磺菌和糙皮侧耳等木腐菌对松材线虫的抑制作用明显,硫磺菌和菌株S4降解木材的能力强,菌株J5-2、硫磺菌、S4在田间处理疫木的效果最好,可使疫木中线虫数量减低65%以上。利用木腐真菌就地处理松材线虫病疫木是一种高效环保新方法。     

(拟)松材线虫耐久型四龄幼虫(LⅣ)的形态及其分化变异

本文对浙江省宁波市松材线虫病疫区内的松材线虫和拟松材线虫的耐久型四龄幼虫(LⅣ)的形态及其分化变异作了观察研究.结果表明,松墨天牛成虫体内携带的松材线虫和拟松材线虫的LⅣ在形态上完全相同;同一来源的(拟)松材线虫的LⅣ既可发育形成松材线虫,也可形成拟松材线虫.它的分化变异结果受寄主等环境因子影响,规律是:带尾尖突的LⅣ离开松墨天牛成虫进入黑松多变为无尾尖突的松材线虫;进入马尾松多变为带尾尖突的拟松材线虫.     

疫木中松材线虫的免疫学检测方法的研究

以松材线虫的粉碎虫体免疫家兔制备抗血清 ,通过免疫印迹考察抗血清的特异性。利用固相松材线虫抗原和游离线虫抗原同线虫抗体相竞争 ,建立竞争型ELISA法用于疫木中松材线虫的分析。该方法可以直接检测出 10mg的木屑中 0 1μg微量的线虫蛋白 ,约 7条线虫的存在。利用该方法对 2 0个不同地区、树种及类型的松材样品进行检测 ,疫木中松材线虫的检出率为 10 0 % ,但拟松材线虫也呈现了一定的交叉反应。研究结果表明 ,以松材线虫抗原蛋白为指标的免疫学检测方法简便快速、灵敏度高 ,为松材线虫的快速检疫提供一种可能的途径     

松材线虫病的常用鉴定方法及防治技术

该文介绍了几种常用的松材线虫病鉴定方法,并从松材线虫、寄主植物、媒介昆虫3个方面提出了其防治技术,以供参考。     

松材线虫实时PCR检测方法的建立

对南京林业大学开发的松材线虫实时PCR检测方法的操作过程进行了规范化.介绍了检测松材线虫所需要的试剂及使用方法,对仪器的稳定性进行了验证,对检测结果的判读方法进行了规定.规范化的检测方法灵敏度高,特异性强,应用方便.     

寄生加勒比松松材线虫的鉴定及其致病性测定

运用线虫比较形态学和rDNA—ITS—PCR-RFLP方法对采自广东省广州市白云山加勒比松上的伞滑刃线虫进行鉴定,结果确定该线虫为松材线虫。致病性测定表明该松材线虫种群对加勒比松苗有较强的致病力,接种的松苗均出现不同程度的枯萎,而且从枯死木中可重新分离到该线虫。     

温度对松材线虫的生物效应

对松材线虫在不同温度下的存活及生长繁殖状况进行了观察。松材线虫在-70℃不能存活,在-20℃可存活约8d,在10℃~35℃的温度范围内,松材线虫的生长繁殖速度随温度上升而加快,生长繁殖数量随温度提高而增加,松材线虫在40℃可存活约7d,在45℃可存活约5d,在50℃以上不能存活。松材线虫与松树在不同温度下生长速度的差异提示松树在不同气候条件下发病轻重与此差异有关。     

生防细菌对松材线虫灭杀效果初步研究

为了寻找高效低毒且对环境友好的松材线虫病生防菌株,本研究测定了10株对根结线虫有较好防治效果的生防菌对松材线虫的室内灭杀作用,并且选取杀虫活性最好的菌株A4做了其发酵乙醇抽提物对松材线虫LC50值的测定和林间防治效果的测定。结果表明:10株生防菌株的发酵原液对松材线虫都有较好的杀虫效果,其中A4更是在将发酵液稀释10倍之后仍然具有大于50%的杀虫活性,表明该菌株具有较大的生防潜力;室内毒力测定显示菌株A4的发酵抽提物对松材线虫处理24 h的LC50值为0.291 mg/mL;林间防效实验表明菌株A4的发酵抽提物能够显著降低松树枯死率。     

培养基调节对黑木相思增殖的影响

以增殖率较低的21号黑木相思无性系继代苗为材料,希望通过培养基调节,提高生产效率,为推动规模化发展打下基础。通过单因子试验,以苗高、新芽数、愈伤质量和苗木生物量为衡量指标,筛选出最佳的大量元素、6-BA、IBA及糖用量。结果表明：培养基中大量元素含量对愈伤质量和生物量影响显著,以MS大量最好;6-BA含量对苗高、新芽数、愈伤质量都产生显著影响,以不加6-BA苗高最高,6-BA 0.5 mg/L 获得最多5.4个新芽/苗,6-BA 1.0 mg/L愈伤质量最大,IBA浓度只对新芽数产生显著影响,以IBA 0.5 mg/L新芽数最多,糖对所有指标产生显著影响,当糖20 g/L时,苗木生长最高,糖20～30 mg/L时,新芽数、愈伤质量和生物量最大。     

A multiplex one‐step PCR method for the simultaneous identification of Bursaphelenchus xylophilus,B. mucronatus and B. doui– three species within the xylophilus group

The pine wood nematode, Bursaphelenchus xylophilus, causes severe damage to pines in Eastern Asia. Bursaphelenchus mucronatus and B. doui resemble closely B. xylophilus morphologically, moreover they were found frequently in this area recently. It is necessary to identify the three species precisely and rapidly. In this study, we report the results of a multiplex one‐step polymerase chain reaction (PCR) utilizing five primers to identify and discriminate the three Bursaphelenchus species simultaneously. The multiplex one‐step PCR yielded one fragment of about 1000 bp for all Bursaphelenchus populations tested. Futhermore, B. xylophilus, B. mucronatus and B. doui produced another fragment of about 100, 350 and 600 bp respectively. This approach is simple and reliable to simultaneously identify the above three species within the xylophilus group usually encountered together in a nematode assay.     

基于残差网络的遥感影像松材线虫病自动识别

松材线虫病是针对松树的特殊疾病,具有前期发病特征隐蔽、传播范围广、致病速度快的特点,因此面对林业病虫害问题,对受灾区域染病树木进行高效识别和分类,监测其他区域的树木生长情况,并且根据受灾情况确定损失,进行保险理赔是十分重要的.针对染病树木识别准确率低、识别速度慢的问题,本研究利用遥感影像和残差网络相结合的方法,并对残差...     

注干施药防治松材线虫的药剂筛选与林间防治效果研究

采用浸渍法测定了8种药剂对松材线虫的毒力。结果表明,阿维菌素、甲维盐和硫酸铜在较低浓度下对松材线虫即有较强的杀灭活性,其半致死浓度(LC50)分别为0.1346mg/mL、0.2965mg/mL和0.3179mg/mL。敌敌畏、二甲基硫蒽和氧化乐果的毒性次之,吡虫啉和苦参碱的毒性较弱。联合染毒测定的结果表明,联合使用对松材线虫表现出增效作用。林间试验结果表明,0.1%甲维盐和4.0%吡虫啉,1%阿维菌素和1%苦参碱2个药剂组合,可用于林间注干施药防治松材线虫,持效期可达2年。     

不同培养条件对黧蒴栲组培苗褐变的抑制作用

黧蒴栲外植体在组织培养过程中,褐变现象十分严重。不同培养条件比较试验的结果表明,WPM为黧蒴栲初代培养的最适培养基,抗坏血酸(Vc)、活性炭(AC)、聚乙烯吡哆烷酮(PVP)对抑制外植体褐变均有作用,其中,PVP效果最佳,最适浓度为3 g/L。光照条件和温度对黧蒴栲褐变的影响都很大,初期暗培养和降低温度到19℃,能显著抑制外植体的褐变。     

松材线虫入侵对生态系统功能影响的研究现状与展望

综述了生物入侵种松材线虫的国内外研究现状，指出了松材线虫病研究的主要几个方面，进一步指出了松材线虫入侵在生态系统水平上研究的必要性，提出了在生态系统水平上松材线虫防治的研究方向。     

松材线虫对黑松几个生理生化指标的影响

8～9年生黑松经4种处理(接种松材线虫、100μg苯甲酸水溶液处理、无菌水处理并环剥主干中部树皮以及单独无菌水处理)后,研究了其流脂量、蒸腾作用及叶部过氧化物酶同工酶的变化.结果显示,接种后12天,所有接虫株松脂分泌停止;接种后27天,接虫株蒸腾作用下降最明显,其平均蒸腾强度为0.0145ml·g     

不同激素配比对赤桉组培苗生根的影响

赤桉组培苗在MS中不生根，添加ABT生根粉明显促进生根，ABT与吲哚下酸（IBA）配比适量可提高根的诱导率，其生根率可达96%，但当ABT浓度超0.5mg/L、IBA浓度超过0.05mg/L时，可诱导愈伤组织的产生，抑制苗的生长，其作用且随其浓度的增加而加强。在1/2MS ABT1.0-1.5 IBA0.05生根培养基中添加赤霉素（GA）0.05mg/L，可明显抑制愈伤组织的产生，并促进苗的生长。