犬、猪转移因子对犬淋巴细胞体外转化增殖影响的比较研究

无菌采取犬抗凝血，分离淋巴细胞并制备成不同浓度。应用正交试验，探讨不同浓度淋巴细胞、植物血凝素P（PHA-P）、犊牛血清（FCS）对淋巴细胞增殖的影响。在此基础上，研究不同浓度犬、猪转移因子（transfer factor, TF）对犬淋巴细胞增殖的影响，增殖的结果用MTT法测定。结果表明，当犬淋巴细胞浓度为5×106个/ml，PHA-P为12.5μg/ml，FCS为 10%时，淋巴细胞增殖效果最佳。在最佳培养条件下，犬、猪TF浓度在0.195~25mg/ml时，对淋巴细胞转化增殖均有促进作用，但犬、猪TF单独或与PHA-P共同作用时对淋巴细胞增殖的最佳刺激浓度均为1.56mg/ml，且犬、猪TF单独作用于淋巴细胞的效应明显优于与PHA-P的协同作用。结果证实，同源或异源TF对犬淋巴细胞增殖有良好的刺激效果，同时研究结果为异源TF在临床上应用于犬病毒性疾病的防治提供了实验依据。     

内蒙古科尔沁沙地腹地G304国道植被物种调查

处于内蒙古科尔沁沙地腹地的G304国道两侧沙化现象严重,随时都面临着沙尘的侵袭,严重时造成交通堵塞,宜建立植物防沙体系。先调查研究G304国道两侧的植被物种,根据当地的气候条件和植物的生物学特性,营造防沙体系。结果表明,小叶锦鸡儿、差不嘎蒿是该路段乃至科尔沁沙地的建群种和优势种。小叶锦鸡儿——差不嘎蒿群落是这里的顶级植被,属土壤演替性质,可视为土壤——气候演替顶级,并表现出特别耐寒风沙抗干旱的生态生物学特性。它们是植物防沙体系首选灌木、半灌木种群。小叶杨、旱柳则是这个体系首选的乔木树种。乔、灌、草2~3行相间排列组合是这个体系防沙功能最佳、结构最优化的配置。夏秋移栽乔、灌木和雨季种植灌木、半灌木及其沙生植物是G304线植物防沙体系主要技术措施。     

远缘杂交小麦新品种小偃597的特性分析

小麦品种的高产稳产及适应性是优良小麦品种的必备条件。某一个小麦品种只要具有了高产、稳产、适应性强的特性,就能在生产上长期推广应用,才能取得较大的社会效益和经济效益。本研究利用1997~1999三年陕西省关中灌区高肥组区域试验产量结果,用高稳系数法和回归系数分析法对小偃597的高产稳产及适应性进行了分析。结果表明：小偃597三年的高稳系数分别为：12.2%、11.3%、19.0%分别低于对照品种;回归系数（b）三年分别为：0.84、1.00、0.95。说明小偃597高产稳产性要优于对照品种,同时小偃597还具有广泛的适应性。     

牦牛转移因子对藏绵羊外周血淋巴细胞转化功能的影响

为研究牦牛转移因子(transfer factor,TF)对藏绵羊外周血淋巴细胞增殖的作用,试验采用MTT法探索不同浓度淋巴细胞、犊牛血清(FCS)、刀豆蛋白A(Concanavalin A,ConA)对淋巴细胞增殖的影响。在最佳条件下,探讨牦牛TF对藏绵羊外周血淋巴细胞增殖的影响。结果表明,当藏绵羊淋巴细胞浓度为5.4×10⁶个/mL,犊牛血清含量为8%,ConA为1 μg/mL时,刺激效果最佳,且TF单独或协同丝裂原时,对淋巴细胞都有促进增殖的效果,且最佳浓度为1.5 mg/mL。体内注射TF后,各剂量组在注射第3天时,淋巴细胞再次受到TF单独或协同ConA刺激时,其增殖效果与细胞组单独增殖效果比较,差异不显著(P>0.05),至第5~7天时,其增殖效果明显高于细胞组,差异显著(P<0.05)。注射2 mL剂量组转化增殖效果优于1 mL和3 mL剂量组,差异显著(P<0.05)。说明牦牛TF能够有效增强机体免疫力,是一种很好的免疫增强剂。     

牦牛脾脏转移因子对小鼠淋巴细胞转化增殖的影响

为了研制一种能够增强动物抗病力的生物活性免疫制剂。采用冻融-透析法提取牦牛脾脏中非特异性转移因子(nTF),并用MTT法检测牦牛TF对小鼠淋巴细胞转化增殖的影响。结果表明：（淋巴细胞+ 刀豆蛋白 +TF）对小鼠脾淋巴细胞的转化增殖效果优于（淋巴细胞+ TF）组和（淋巴细胞+脂多糖+TF）组,差异显著(P<0.05);注射TF组对小鼠脾淋巴细胞的转化增殖的效果优于注射生理盐水对照组 (P<0.05)。牦牛脾脏转移因子对小鼠脾淋巴细胞增殖有促进作用,协同刀豆蛋白(ConA)或脂多糖(LPS)对淋巴细胞增殖的效果有增强趋势。     

类圆环病毒因子P1感染对猪外周血T淋巴细胞含量和增殖活性的影响

探讨类猪圆环病毒因子P1感染对猪细胞免疫功能的影响.将12头30日龄广西巴马小型猪随机分成试验组和对照组,每组6头.在猪感染P1后第3,8,17,24,31和40天,采用血常规和单色流式细胞术分析猪外周血T淋巴细胞的含量,通过WST法对其增殖活性进行检测.P1感染组的T淋巴细胞数量(绝对数和相对数)整体趋势低于对照组,而两组的T淋巴细胞增殖活性没有显著差别.P1感染对机体的细胞免疫功能有一定程度的影响.     

犬淋巴细胞转化增殖试验最佳条件的确定

本试验选择杂种牧羊犬作为实验犬,用MTT法检探讨了不同浓度犊牛血清（FCS）、淋巴细胞、植物血凝素P（PHA-P）和刀豆蛋白A（ConA）对犬淋巴细胞增殖的影响。确定了犊牛血清含量为10%,淋巴细胞浓度为5×106个/mL,用丝裂原PHA-P 刺激的最佳浓度为12.5ug/mL时,MTT法测定能够刺激犬淋巴细胞转化增殖,但t检验分析表明其促进淋巴细胞增殖的效果并不显著;当其它条件不变,所用的丝裂原为Con A时,它在浓度为0.5～2.5μg/mL范围内均可以显著刺激T细胞的增殖（P<0.05）,且在浓度为2.5μg/mL时刺激效果最佳     

lncRNA2099对猪前脂肪细胞增殖、分化标志基因的影响

为了探究lncRNA2099对猪前脂肪细胞增殖分化的影响,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测lncRNA2099在猪心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、背肌和背脂及离体培养的前体脂肪细胞增殖和分化阶段的表达水平;利用核质分离技术确定lncRNA2099在脂肪细胞中的表达位置;构建真核表达载体pcDNA3.1-lncRNA2099,采用qRT-PCR技术检测在脂肪细胞内过表达该lncRNA后对脂肪细胞增殖、分化相关标志基因表达的影响。结果显示：lncRNA2099存在明显组织表达特异性,且在肾脏和背脂中高表达,在背肌中不表达;lncRNA2099在猪前脂肪细胞增殖阶段12 h表达量最高,随后逐渐降低。在分化阶段第2天表达量最高,随后逐渐降低。核质定位结果表明,lncRNA2099在细胞核与细胞质中均有表达;在脂肪细胞内过表达lncRNA2099后,增殖标志基因P21与成脂分化标志基因LPL表达量极显著升高。lncRNA2099可能作为转录调节因子抑制猪前脂肪细胞增殖、促进成脂分化。     

全血培养与酶标仪联用检测淋巴细胞转化的研究

随机将60只健康两周龄雏鸡分成两组：静脉注射顺铂的抑制组（Y）与空白对照（D）。动物处理三天后无菌采血,进行全血培养和淋巴细胞转化试验。培养24 h、48 h、72 h、96 h、120 h 时分别吸取上清离心,在酶标仪570 nm 处读数绘图分析;同时进行MTT比色试验,测定570 nm 处OD值绘制曲线图比较分析。将全血法72 h时的离心上清、MTT法48 h时的蓝色细胞悬液在酶标仪570 nm直接读数;吹打数次和数分钟后同样条件下各读数一次;室温过夜后再读一次;对OD值相对于均值位置进行分析。结果表明：全血培养上清吸光度的测定同MTT比色法一样能够反映出淋巴细胞转化情况,该法在试验可重复性方面明显优于MTT法。     

水田土壤淋失及氨挥发对氮的转化及损失的影响

在耙好的水田土壤中,以100kg/ha施量,按尿素撒施、油包衣尿素撒施、尿素穴施、大粒尿素穴施4种方法施肥。大部分氮肥的初始有效成份均是尿素态氮,同时在施肥的21天之内NH_4~+氮一直是水稻根际营养区内的有效营养成份,NH_4~+和NO_3~-的淋失量只是所施氮肥的0.2～0.4％。没有发生尿素的淋失。由于地下水位高而水的渗漏率低,因此淋失量很小。在几种水管理方法中,只保持土壤水而不形成水层处理时,尿素撒施后氨挥发造成的N损失最大(5.8％),而连续灌水保持水层处理中,大粒尿素穴施N损失量最小(0.4％)。     

大豆异黄酮对奶牛脾脏与肠系淋巴结中淋巴细胞增殖的影响

为了研究大豆异黄酮对奶牛脾脏与肠系淋巴结中淋巴细胞增殖与活化的影响,并揭示大豆异黄酮提高奶牛免疫性能的作用机理。试验采用6×2（浓度×时间）实验设计,各浓度梯度的大豆异黄酮 (100.00、25.00、5.00、1.00、0.25、0.05 μg/mL)与淋巴细胞共育培养48 h和60 h后,用酶标仪在570 nm处测得各孔的OD值。结果表明：（1）添加0.05~25 μg/mL大豆异黄酮能够促进奶牛肠系淋巴结中淋巴细胞的增殖,在添加量为5 μg/mL时达到极显著的促进作用,但大豆异黄酮添加剂量达100 μg/mL时显著抑制肠系淋巴结淋巴细胞的增殖;（2）100 μg/mL和25 μg/mL大豆异黄酮添加组极显著抑制奶牛脾脏淋巴细胞的增殖(P<0.01),而1 μg/mL浓度组则显著促进奶牛脾脏淋巴细胞的增殖(P<0.05),其余各浓度组对奶牛脾脏淋巴细胞有抑制作用,但差异不显著。     

银杏叶提取物对肉仔鸡淋巴细胞增殖及细胞因子水平的影响

为了研究银杏叶提取物(EGB)对肉仔鸡淋巴细胞增殖及细胞因子水平的影响。将360只1日龄健康AA肉用母雏鸡随机分成5组,每组6个重复,其中一组为对照组,饲喂基础日粮;其余4组分别饲喂添加0.009%金霉素及0.15%、0.20%和0.25% EGB的日粮,试验期为42天。测定肉仔鸡外周血和脾脏淋巴细胞转化率以及血清中细胞因子IL-1、IL-2、IFN-γ、TNF-α的含量。结果显示,日粮中添加不同水平EGB可促进肉仔鸡外周血和脾脏淋巴细胞增殖转化,提高血清中细胞因子IL-1、IL-2、IFN-γ、TNF-α的水平,并且在日粮中添加EGB的作用效果比添加金霉素的作用效果好。表明日粮中添加EGB可增强肉仔鸡的免疫功能。     

MTT法检测大鼠外周血淋巴细胞增殖反应探讨与应用

为了更精准简捷地评价机体的细胞免疫状态,采用MTT比色分析法检测大鼠外周血淋巴细胞的增殖能力,并对试验的最适条件进行了探讨,然后将该法应用到Transwell共培养体系中以评价H9N2 AIV感染内皮细胞后对跨内皮淋巴细胞增殖能力的影响。结果表明：在96孔细胞培养板中接种密度为1.25×10⁶个/mL的淋巴细胞于含10% FBS的RPMI 1640培养基中培养的最适时间为48 h。感染病毒后,跨内皮淋巴细胞的增殖明显受抑制;内皮完整状态下,淋巴细胞和病毒共孵育后,活病毒的量降低,而当内皮不存在或被病毒感染后,这一现象消失。结果证明作为机体细胞免疫功能评价指标之一的淋巴细胞增殖能力可采用改良后的MTT法检测。     

葡萄籽原花青素对大鼠脾脏淋巴细胞与肝细胞增值的影响

为了研究葡萄籽原花青素(Procyanidin from Grape Seed,GSP)对大鼠脾脏淋巴细胞与肝细胞增值与活化的影响,揭示GSP提高机体免疫性能的作用机理,为后续的试验分组提供理论依据。试验采用不同终浓度的GSP培养液[0.00 （对照）、0.05、0.10、0.50、1.00、5.00、10.00、15.00]与大鼠脾脏淋巴细胞, [0.00 （对照）、0.05、0.10、0.50、1.00、5.00、10.00、15.00、20.00、25.00 μg/mL ]与大鼠肝细胞系IAR-20共育。在12、24、48 h后,用酶标仪在490 nm处测得各孔的OD值。结果显示：（1）添加0.05~5.00 μg/mL的GSP促进淋巴细胞增值,当浓度超过10.00 μg/mL将抑制淋巴细胞增值。（2）添加0.05~10.00 μg/mL 的GSP促进肝细胞增值,当浓度超过20.00 μg/mL 将抑制肝细胞增值。（3）一定范围内,GSP对淋巴细胞和肝细胞的促增值作用有浓度和时间依赖性。葡萄籽原花青素能够促进体外培养大鼠的脾脏淋巴细胞和肝细胞增值活性,具有提高细胞抗氧化和细胞免疫的作用。     

影响山羊胚胎移植效果的因素初探

为探讨最佳的胚胎移植方案,提高胚胎移植效率,试验以不同受体山羊为研究对象,比较了不同受体品种、移植胚胎数目、不同季节等因素对胚胎移植效果的影响。结果表明：不同品种受体和移植季节对胚胎移植效果影响不显著（P＞0.05）;胚胎移植数目对妊娠率没有显著影响（P＞0.05）,但移植一枚胚胎的胚胎受孕率显著高于移植二枚和三枚胚胎（P＜0.01）。