禽流感二价抗原油乳剂灭活疫苗的研制

以禽流感病毒（ＡＩＶ）Ｈ５Ｎ４株、Ｈ７Ｎ３株为抗原研制了Ｈ５Ｎ４－Ｈ７Ｎ３二价油乳剂灭活疫苗,并对其物理性状、安全性、免疫效力、保存期及抗体消长规律进行了检测。结果表明,试验鸡疫苗在免疫后３周到９个月内对ＡＩＶ－Ｈ５Ｎ４的攻击均获全部保护。疫菌４℃保存１５个月,其免疫效力没有下降。     

禽流感病毒BEI灭活疫苗制备与免疫效果

使用浓度为0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.5%和0.6%的二乙烯亚胺(BEI)37℃灭活禽流感病毒(Re-5株)24h,经灭活效果检测BEI浓度≥0.5%可以完全灭活病毒。0.5%的BEI和0.2%的甲醛灭活禽流感病毒,以相同配方制备疫苗,免疫效力比较研究结果显示,按照规程要求免疫21d后采血HI效价分别为8.35log2和7.66log2,BEI灭活疫苗的抗体水平要高于甲醛灭活疫苗。本研究为禽流感灭活疫苗灭活工艺研究提供了依据。     

鸡同时接种禽流感灭活疫苗和新城疫疫苗的双针试验

自从全面开展禽流感防疫工作以来,面对我市家禽养殖模式现状,如何兼顾禽流感和鸡新城疫免疫、两种疫苗可否同时免疫,成了实际工作中急需解决的问题。为此,我们进行了鸡禽流感和新城疫同时     

禽流感油乳剂灭活疫苗的研究

将6种不同亚型的禽流感病毒（AIVH2N9、H3N8、H5N1、H5N2、H7N1、H9N2）分别接种鸡胚,收获尿囊液,经甲醛灭活,以矿物油为佐剂制成油乳剂灭活疫苗。疫苗接种4和8周龄SPF鸡,注苗后均无不良反应。每种亚型疫苗免疫后14天和21天攻毒保护率均达90％-100％。分别用H5N1和H9N2亚型灭活疫苗免疫8周龄SPF鸡、25和28周龄健康商品蛋鸡,免疫后7天产生免疫力,14天保护率达100％,21天后抗体达高峰,仔鸡接苗后最高血凝抑制（HI）几何平均滴度（GMT）为7.3-8.0log2,蛋鸡为8.0-10.5log2。免疫后180天,抗体效价不低于6.5log2。免疫后180天分别以AIV攻击,H5亚型疫苗组,用强毒攻击无一发病和死亡,对照鸡全部发病死亡;H9亚型疫苗组,对照鸡在攻毒后72小时停产,免疫鸡无一发病且产蛋正常,对同源攻毒的保护率达100％。     

禽流感灭活疫苗抗体监测及免疫程序的研究与推广

禽流感是由正粘病毒科、流感病毒属的A型流感病毒引起的一种急性高度接触性传染病，被国际兽医局(OIE)和国家农业部规定为Ⅰ类烈性传染病。高致病性禽流感可表现出高致死率、呼吸道疾病、消化道症状、产蛋下降等临床症状，它的暴发不仅给养禽业带来毁灭性的危害，而且还严重干扰我国出口贸易，在经济和政治上都会产生不可估量的巨大损失。做好高致病性禽流感的防治工作，是动物疫病预防工作的重中之重。     

H7亚型禽流感病毒灭活疫苗的研制及其免疫效果研究

以H7N3亚型禽流感病毒接种鸡胚,收取鸡胚液为抗原研制禽流感病毒灭活疫苗,并对制苗抗原以及疫苗的物理性状、安全性、免疫效力、免疫剂量和保护期等进行了试验,结果表明,该灭活疫苗安全性好,对28日龄鸡的最佳免疫剂量为0.5 mL/只,抗体临界保护值为5log2,免疫后6周HI效价达到高峰值9.4log2,以后逐渐下降,第20周抗体仍能维持较高水平。此外,交叉免疫保护试验表明,同一亚型之间具有良好的免疫保护作用,而亚型间缺乏坚强的交叉保护作用。     

禽流感疫苗免疫应注意的问题

禽流感免疫是防控禽流感的主要措施。目前,国内禽流感疫苗有三类:全病毒灭活疫苗、重组禽流感病毒灭活疫苗、基因工程疫苗。莆田市荔城区使用国家规定可用于禽流感强制免疫的疫苗即禽流感灭活疫苗(H5N2亚型N28株)和重组禽流感病毒灭活疫苗(H5N1亚型.Re-1株),这两种均为油乳剂灭     

禽流感H_5和H_9混合疫苗免疫肉鸽的效果试验

将禽流感H5亚型二价灭活疫苗（H5N1,Re-4＋Re-5）和H9亚型（SS株）灭活疫苗等量均匀混合,采用不同剂量不同次数分别注射。用血凝和血凝抑制试验方法检测H5亚型（Re-4、Re-5）和H9亚型（SS株）抗体效价。试验表明：以较小剂量0.5ml/只,间隔21d二免能产生整齐、持久、高滴度保护抗体,据此提出鸽H5和H9亚型禽流感多价混合疫苗的参考免疫程序。     

蛋鸡重组禽流感H_5亚型灭活疫苗强化免疫试验

为了使商品蛋鸡H5亚型禽流感免疫抗体在产蛋期全程保持较高水平,对免疫程序进行优化,采用标准和强化两种程序进行免疫,比较二者间抗体水平差异。结果表明,强化免疫组Re-4株血球凝集(HI)抗体较标准免疫组平均高出2.44 Log2,且抗体水平离散度平均降低0.42 Log2;强化免疫组Re-6株HI抗体较标准免疫组平均高出2.45 Log2,且抗体水平离散度平均低1.02 Log2。这一强化免疫程序可保证蛋鸡在产蛋全期维持高且均一的HI水平。     

禽流感灭活疫苗（H9）不同注射部位免疫效果的比较

通过45、95日龄2次禽流感灭活疫苗（H9N2亚型）的免疫,探讨不同免疫途径对禽流感（H9）HI抗体的影响。结果表明,腿部肌肉注射免疫效果相对较好,抗体滴度平均值较其他组约高0.5～2.0个滴度,抗体维持时间也较长。而颈部皮下、胸部肌肉、翅根部肌肉3种注射部位免疫效果基本一致。     

禽流感疫苗免疫种鸽的试验

目前使用的几种禽流感疫苗都没有说明是否可以免疫鸽.为了掌握禽流感疫苗免疫哺育期种鸽的免疫抗体水平和接种疫苗对种鸽哺育幼鸽的影响,给种鸽场开展免疫提供经验,我们在来宾市某种鸽场进行了试验,现报告如下:     

水禽用H5亚型禽流感灭活疫苗对高致病性禽流感病毒流行毒株的免疫保护效果研究

为评价水禽用禽流感灭活疫苗(H5N2亚型,D7株)对2010年以后分离的高致病性禽流感病毒流行毒株的免疫保护效果,将该疫苗免疫3周龄SPF鸭后,21 d采血、分离血清测定HI抗体效价,同时用5株2010年以后分离的高致病性禽流感流行毒进行攻毒保护试验,攻毒后5d采集所有试验鸭喉头和泄殖腔拭子进行病毒分离.结果显示,该疫苗免疫SPF鸭21 d后的HI抗体效价的几何平均滴度达7.4log2,对5株高致病性禽流感病毒的攻击均可产生良好的免疫保护,并有效阻止病毒排泄.该疫苗的推广使用将对我国水禽高致病性禽流感的防控发挥重要作用.     

不同规模养鸡场禽流感灭活疫苗免疫效果的调查

对不同规模养鸡场接种禽流感疫苗的免疫效果进行了调查,结果表明:大中型种鸡场的禽流感抗体水平较高,群体几何平均效价为27.4,免疫保护率平均达93.3%。农村小型肉鸡场的禽流感抗体水平较低,群体几何平均效价为23.5,免疫保护率平均达37.2%。农村散养鸡群的禽流感抗体水平最低,群体几何平均效价为21.8,免疫保护率平均达26.1%。同时,对不同免疫状况下,鸡群接种禽流感疫苗后免疫抗体的消长动态进行了测定。     

重组禽流感灭活疫苗抗体消长规律分析

重组禽流感灭活疫苗(H5N1,Re-1株)3批,按重组禽流感灭活疫苗(H5N1,Re-1株)规程规定的检验方法免疫28日龄SPF鸡,免疫后定期采集血样,测定血清HI抗体效价,绘制各批疫苗免疫鸡HI效价消长曲线,结果表明,重组禽流感灭活疫苗(H5N1亚型,Re-1株)能诱导SPF鸡产生高的抗体而且维持时间长 .     

鼻腔免疫禽流感灭活疫苗对鸡呼吸道肥大细胞分布的影响

用添加CpG的禽流感病毒（H5亚型）灭活疫苗对7日龄罗曼公鸡进行鼻腔免疫，14日龄加强免疫一次；分别于首免后第3、5、7周剖杀，取鼻腔、喉部、气管、气管叉及肺组织，通过甲苯胺蓝染色法显示肥大细胞，观察呼吸道各部位肥大细胞的分布及数量变化。结果显示，首免后第3周气管和气管叉黏膜中的肥大细胞数量显著增加（P〈0．05），第5周时喉部和气管叉黏膜中的肥大细胞数量显著增加（P〈0．05），气管黏膜中肥大细胞数量也极显著增加（P〈0．01），第7周肺中的肥大细胞数量显著增加（P〈0．05）；肥大细胞的数量在喉部最多，气管叉次之，气管和肺较少。试验结果表明，局部黏膜免疫可增加呼吸道肥大细胞的数量，肥大细胞可能参与黏膜免疫反应。     

鸡新城疫、禽流感(H9亚型)二联油乳剂灭活疫苗免疫效力试验

为评价鸡新城疫和禽流感(H9亚型,SY株)二联灭活疫苗(以下简称"二联苗")对SPF鸡的免疫保护效力,进行了血清学效力检验与靶动物免疫攻毒保护相关性的研究及免疫持续期试验。不同抗体水平的SPF鸡攻毒试验结果表明,当NDV HI≥5.0log2,AIV HI≥6.0log2时,分别攻击NDV、AIV,试验鸡的保护率均达到100%;免疫期试验结果表明,二联苗以0.3mL和0.5mL的剂量分别免疫SPF鸡,免疫接种后各试验组鸡均产生较高的HI抗体,其免疫期分别能持续18周和36周。表明二联苗对试验鸡有较好的保护效果。     

不同高致病性禽流感疫苗的免疫效果试验

应用重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1亚型,Re-1株）,禽流感-新城疫重组二联活疫苗（rL-H5株）对三组肉鸡进行禽流感免疫效果观察,首免用重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1亚型,Re-1株）,二免用禽流感-新城疫重组二联活疫苗（rL-H5株）。结果表明：接种重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1亚型,Re-1株）的免疫效果比接种禽流感-新城疫重组二联活疫苗（rL-H5株）的效果好;首免用重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1亚型,Re-1株）,二免用禽流感-新城疫重组二联活疫苗（rL-H5株）的效果比仅接种重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1亚型,Re-1株）的效果好。     

禽流感灭活疫苗母源抗体和免疫抗体检测

应用国家颁部的血凝抑制试验(HI)．对黑龙江省部分大型种鸡场和专业户饲养的鸡群，禽流感灭活疫苗母源机体和免疫抗体进行跟踪检测；初步掌握了禽流感母源抗体和免疫抗体消长规律，为制定禽流感免疫程序和防治提供重要科学依据。国家认定的中国农业科学院哈尔滨兽医研究所和中牧实业集团产品H5、H9双价灭活疫苗．免疫后抗体产生快，抗     

三种禽流感灭活疫苗对农村散养鸭的免疫效果比较

采用重组禽流感灭活疫苗(H5N1亚型,Re-1株)、禽流感灭活疫苗(H5亚型,N28株)、禽流感H5-H9二价灭活疫苗三种疫苗免疫农村散养鸭,结果表明,在一次免疫和加强免疫中,重组禽流感灭活疫苗、禽流感灭活疫苗的抗体效价都分别明显高于H5-H9二价灭活疫苗同期的H5抗体效价,因此对水禽免疫宜使用重组禽流感灭活疫苗或禽流感灭活疫苗;加强免疫明显比一次免疫效果好,应用禽流感灭活苗对散养鸭免疫,必须加强方可达到理想的免疫效果。     

鸡新城疫、禽流感二联灭活疫苗与同类产品的免疫效力比较

将鸡新城疫、禽流感（H9亚型,SY株）二联灭活疫苗与市售同类对照苗分不同剂量皮下注射接种30日龄SPF鸡,免疫后定期采血,分离血清,通过检测血清中ND和AI的HI抗体水平比较各组鸡抗体产生期、抗体高峰及免疫持续期,并进行不同血凝抗原检测HI抗体结果的对比。试验鸡血清样品检测结果显示,免疫鸡抗体产生期为免后2周内,免后8周和5周ND和AI的HI抗体滴度分别达到峰值,抗体至少可持续28周以上,两种灭活苗之间免疫效果基本相当。