香菇的失活原生质体融合

食用菌的原生质体融合必须对亲株进行遗传标记。筛选营养缺陷型或代谢突变型的传统方法,不仅需要花费大量的人力和物力,而且这些筛选是以诱变为基础,往往会引起亲本一些不利于产量和质量性状的突变。70年代发展起来的失活原生质体技术表明,失活一个亲株的原生质体与另一亲株活的原生质体融     

糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)和鲑色侧耳(P.salmoneo-stramineus)的种间原生质体融合

近年来在工业有用微生物如酵母、丝状真菌及细菌的原生质体融合方面有许多报道,但在食用蘑菇方面,主要由于缺乏对杂种选择的遗传或表型标记,还没有报道过种间或属间原生质体融合的例子,尽管有一些关于担子菌原生质体形成和再生的报告。因此,我们先由糙皮侧耳和鲑色侧耳的单核菌株分离营养缺陷突变体,然后研究彼此性不相容的这两个侧耳种间原生质体融合。本文报道用聚乙二醇(PEG)处理后分离融合子和融合子的同功酶分析结果。本试验用的单核菌株来自糙皮侧耳909和鲑色侧耳01的野生型双核体。这些菌株保存于PDA培养基上。原生质体形成方法:将菌培养于GMY培养基(10克葡萄糖、10克麦芽抽提物、4克酵母抽提物)上2～3天,收获菌丝用0.7M甘露醇洗     

侧耳属原生质体诱变的研究

为了进行侧耳属种间原生质融合的研究就必须获得稳定的遗传标记菌株.在遗传标记菌株的筛选中,抗药性标记菌株要比营养缺陷型标记菌株的筛选快速、方便而实用.用抗药性标记菌株进行细胞融合,形成的融合子就会具有双重抗性标记.在生产上,这样的菌株除了能高产优质外,还会具有双重抗逆性.为此,我们对侧耳属两个种的原生质体分别进行了紫外线诱变,获得了两株抗多菌灵和一株抗丙硫咪唑的抗药性变菌株.     

略论与食用菌种间融合子鉴定有关的几个问题：与杨国良等先生商榷

近来,我们先后在《食用菌》、《中国食用菌》上拜读了杨国良等先生有关毛木耳(Auricularia polytricha)与黑木耳(A. quricula)原生质体融合育种的科研论文。据悉,这是中国也是世界上有关木耳属种间育种取得成功的首次报道,值得庆贺。但是,该文闸述的某些基本概念和研究方法似欠妥当,同时,作为一项鉴定已逾一年的科研成果,在正式发表时仍对融合子的鉴定只字未提,这就大大削弱了文章的科学性和说服力。下面,仅就有关的主要问题提出几点看法,不妥之处,敬请杨国良先生及广大读者指正。一、“酵母膏缺陷型”不宣作为准确的遗传标记。营养缺陷型是在氨基酸。维生素、碱基一类营养物质的合成上发生缺陷,只有在基本培养基上添加相应营养物之后才能正常生长的一种生化突变型,是原生质体融合中常用的一种遗传标记。为了准确检出融合子并对融合子进行遗传分析,获得在     

诱变筛选平菇标记菌株

诱变产生营养缺陷型菌株是获得遗传标记菌株的常规方法之一,最近国外报导已经成功地进行了平菇原生质体缺陷型突变体的融合,并获得了种间和种内的融合子。为了进行食用菌的细胞融合,我们首先对平菇的孢子和原生质体进行了紫外灯照射诱变,希望获得营养缺陷型标记菌株。一、材料和方法 (一)供试菌株:plf,佛罗里达平菇。引自南京林业化学研究所。 (二)方法: 1.孢子经Tween80分散处理后制成悬液。将制好的孢子悬液在磁力搅拌器搅拌的同时用15w紫外灯照射,距高30cm,被紫外线诱变的孢子于液体基本培养基中进行避光振     

平菇灭活原生质体融合育种研究

干菇种间原生质体融合的成功,使得平菇的遗传育种工作出现了崭新的面貌。但是,在开展原生质体融合时,通常对亲本菌株加入一些遗传标记,以便融合后顺利地挑选融合子。在实践中人们又发现所加的遗传标记,往往会因为干扰了其正常的代谢途径,而降低了亲本菌株的生产能力,对育种的效果不利;同时,做遗传标记又会耗时、费工,消耗大量的人力、物力,增加育种工作的时间和成本。因此,自1977年以来,人们就开始了用灭活原生质体进行微生物融合育种的尝试。美味平菇A76和佛罗里达平菇A95是侧耳属两个不同的种,为了将它们的优良性状结合在一起,人工创造新品种,我们采用灭活原生质体融合技术,经过两年的研究,获得了美味平菇A76和佛罗里达平菇A95种间融合子。对融合子进行了多代选育,获得了性状稳定的高产优质新菌株。现将研究结果报道如下。     

木耳营养缺陷型突变株的诱变与鉴定：兼答林芳灿先生提出的部分问题

营养缺陷型菌株是进行原生质体融合研究的重要材料。梁平彦等(1981)曾报道,以需要酵母膏的营养缺陷型单倍体菌株为融合亲本,成功地获得了产黄青霉菌的营养互补二倍体。我们参考这一技术路线,进行了木耳营养缺陷型菌株的诱变与鉴定。首先顺利的鉴定出黑木耳菌株(A.a—1)是天门冬氨酸缺陷型;毛木耳菌株(A.p—243)由于其突变的遗传背景复杂(后来鉴定为腺嘌呤、脯氨酸和尼克酸三缺陷型),短时间内未能确定其是几种化合物的缺陷。但是做为融合亲本,只要该菌株在基本培养基不生长就基本符合要求,因为融合研究的首要问题是对     

中国主要香菇栽培菌种交配型基因的遗传分析

从我国使用的19个主要香菇栽培菌种中制备了25种原生质体单核体,以此为材料,以交配型基因为标记,在交配反应和RAPD两个水平上对这19个菌株进行了较为详细的遗传相似性分析。25种原生质体单核体两两配以地共300个组合,其中不亲和性反应为110对,占配对总数的36.7％。根据交配反应结果,25个单核体可分为三大类群、7个交配型组。这些结果从交配型角度证明,这19个菌株具有十分狭窄的以交配型基因为标记的遗传背景。RAPD反应和聚类分析中,这三大类群、7个交配型组基本上都能聚为一类,从而在分子水平上验证了交配型折结果,也为交配型基因在菌种鉴定中的作用 提供了依据。     

原生质体融合技术在食用菌遗传育种中的应用概述

原生质体融合在食用菌交配型鉴定、遗传规律研究、新品种选育、菌种复壮、野生菌驯化等方面有非常重要的应用价值。概述原生质体制备、原生质体融合方法以及原生质体融合技术在食用菌菌株改良和新品种选育等方面的应用,展望其未来应用前景,为食用菌遗传育种提供参考。     

以交配型基因为主要标记的香菇菌种鉴定新方法

在香菇交配型基因研究的基础上,提出了以交配型基因为主要标记的香菇菌种鉴定新方法。这一方法以香菇性亲合性理论为基础,以交配型基因的等位性和多型性为依据,以标准菌株原生质体单核体的两种亲本交配型为遗传标记,以待测菌株的原生质体单核体为材料。该方法中使用的原生质体方法和交配型测定方法都是相当成熟的技术,操作方便可靠。     

金针菇与凤尾菇科间原生质体融合研究

金针菇与凤尾菇皆属四极生异宗结合食用菌,其双核异核体菌株都具有锁关联合遗传标记本研究以金针菇和凤尾菇的双核异核菌株为亲本,将热灭活的凤尾菇原生质体,以ＰＥＧ为融合剂,在高下,高ＰＨ值条件下,与金针菇原生质体融合,结果从１３２９个再生菌株中选择出６株双亲细胞质和细胞核都融合的无锁状联合菌株,经融合核分裂技术处理后,融合核分裂成为具有锁状联合的双核菌株。     

凤尾菇抗药性标记技术研究初报

在应用细胞融合技术选育食用菌优良菌株过程中,融合子的选择是很重要的一环。就现在融合成功的几个例子看,融合率都低于10~(-4),可见没有遗传标记是难以选择出融合子的。过去的报道多用营养缺陷型作为融合的标记,而有关抗药性标记尚未见有报道。为准确方便地选择出融合子,我们对凤尾菇抗药性标记技术进行了研究,现初报如下:材料和方法     

毛木耳与黑木耳的原生质体融合育种

本文报道了毛木耳(A. polyiricha)与黑未耳(A.auricula)原生质体融合育种的研究结果。制备毛木耳与黑木耳营养缺陷型单倍体的原生质体。通过电融合及再生筛选,获得了8株在基本培养基上生长的野生型融合子。这一结果对探讨远缘杂交育种具有重要意义。     

蔬菜原生质体培养及融合的研究现状与展望

原生质体培养与融合技术是蔬菜作物遗传改良的重要手段。该文对蔬菜原生质体的分离、培养、融合的研究现状及原生质体培养与融合技术在蔬菜作物上的应用做了综述,同时做出展望。     

分子标记技术在食用菌种质鉴定中的应用

在食用菌种质鉴定中,分子标记技术克服传统生物学鉴定受环境条件和生理状况影响的弊端,能从分子水平上提供菌种特有的遗传标记,而且可以在短时间内对处于菌丝体状态的菌种进行检测,在新开发种质资源的鉴别研究、原生质体融合材料的分析、真假菌种以及疑难菌株的鉴定中都有广泛的应用价值。     

香菇单核原生质体的交配型研究

交配型是四极性异宗结合食用菌杂交育种中的一个重要遗传标记.在制备香菇单核原生质体的基础上,我们测定了7个菌株单核原生质体的交配型比例,研究其交配型等位基因的规律.材料与方法(一)供试材料菌株、原生质体制备及再生均按潘迎捷等的方法(食用菌,1992:4).(二)单核原生质体的交配型的测定每个菌株取10个单核原生质体再生菌落做10×10的交配实验,对峙培养后,以交界处菌丝是否出现锁状联合做为两     

原生质体技术在食用菌育种中的应用研究

原生质体技术在食用菌育种中的应用研究戴秉丽（农学农机系农业微生物室１３００６２）（二）食用菌原生质体变系统另一类原生质体研究是与常规诱变手段相结合的，统称为食用菌原生质体诱变系统。一些研究应用该系统产生营养缺陷型突变株，这类工作大多旨在为原生质体融合...     

原生质体操作在柑桔育种上的应用前景

当前,世界上一些柑桔主产国如美国、日本、以色列和我国的科学家都在致力于培养、融合不同柑桔种属的原生质体。这说明原生质体操作已成为柑桔研究的重要课题。有关专家估计,这方面研究的成果不久将会给柑桔产业带来重大的经济和社会效益。 原生质体培养与原生质体融合统称为原生质体操作。它是近二十年发展起来的一项现代生物技术,也是我国高技术的一个重要     

单核和同核原生质体技术在食用菌遗传育种上的应用

单核和同核原生质体是食用菌原生质体技术中的一个重要研究内容,由于单核和同核原生质体是没有经过减数分裂形成的无性后代,为食用菌遗传和育种研究提供了一个重要的材料。本文阐述了食用菌单核和同核原生质体的发现和作用以及在食用菌遗传研究上的应用前景。     

香菇135菌株特异SCAR标记的分布和遗传特性

用香菇（Lentinula edodes）135菌株的特异SCAR（Sequence Characterized Amplified Region）引物135F／R（扩增601bp的条带）对135菌株的58个原生质体单核体和97个孢子单核体的基因组DNA进行扩增，检验此特异标记在单核体中的分布和遗传规律。原生质体单核体分为两种交配型A1B1和A282，此标记仅存在于后一种核中；另外，此标记在四种交配型的孢子单核体后代中随机分布，显示这个SCAR标记可以稳定遗传到后代，而且与交配型A、B因子之间没有连锁关系。