家畜卵母细胞冷冻保存研究进展

自Whittingham(1977)首次成功的报道冷冻-解冻的小鼠卵母细胞活仔以来，国内外诸多学者对家畜及人的卵母细胞冷冻保存进行了研究。目前，已有小鼠、家兔、牛等动物以及人的卵母细胞冷冻成功，并得到了后代。在国内，山羊、绵羊、猪等家畜的卵母细胞冷冻保存也已有报道。随着胚胎工程技术的不断发展，卵母细胞的冷冻保存越来越受到重视，这将推动卵母细胞的冷冻保存取得更大进展。     

猪卵母细胞玻璃化冷冻保存的研究进展

卵母细胞冷冻保存对于畜牧业生产和人类辅助生殖具有重要意义。随着玻璃化冷冻技术日趋成熟，其现已广泛应用于牛、羊等大家畜的卵母细胞冷冻保存。然而，猪卵母细胞的冷冻保存至今仍处于试验研究阶段，由于猪卵母细胞脂质含量高，对低温敏感，在玻璃化冷冻保存过程中极易受到冷冻保护剂毒性以及渗透胁迫、氧化应激等损伤，造成细胞骨架以及亚细胞器受损，最终导致细胞发育能力降低甚至死亡。近年来，人们在提高猪卵母细胞冷冻保存效率的研究中取得了突破性进展。本文简要介绍了卵母细胞冷冻保存的常见方法及作用机理，总结了猪卵母细胞在玻璃化冷冻过程中造成的细胞损伤类型及影响，概述了人们针对不同类型的冷冻损伤提出的解决方法和取得的成就，并对其应用前景进行展望，为今后提高猪卵母细胞的玻璃化冷冻效率提供新思路。     

牛冻卵体外受精产犊

近年来牛冻胚己商业化应用,如果牛卵母细胞能冷冻保存,则对建立胚胎库及提高遗传改良技术将是很有利的。本试验的目的是建立一种卵母细胞冷冻方法,即一步加入或除去高渗冷冻保护剂来冷冻保存未成熟牛卵母细胞。1 卵母细胞冷冻1.1 未成熟卵母细胞冷冻从屠宰场取回牛卵巢,用生理盐水保存,2小时内带到实验室。从卵巢吸出卵母细胞,用改进的磷酸盐缓冲液(m-PBS)洗两次,在含有 Hepes 缓冲液的 TCM199+10%超排     

家畜卵母细胞冷冻保存研究进展

自Whittingham(1977)首次成功的报道冷冻-解冻的小鼠卵母细胞活仔以来,国内外诸多学者对家畜及人的卵母细胞冷冻保存进行了研究。目前,已有小鼠、家兔、牛等动物以及人的卵母细胞冷冻成功,并得到了后代。在国内,山羊、绵羊、猪等家畜的卵母细胞冷冻保存也已有报道。随着胚胎工程技术的不断发展,卵母细胞的冷冻保存越来越受到重视,这将推动卵母细胞的冷冻保存取得更大进展。1抗冻保护剂在卵母细胞和胚胎的冷冻保存时,需使用抗冻保护剂,它可以改变细胞在冷冻过程中的物理化学环境,减轻或避免冷冻、解冻过程中的冷冻损伤。抗冻保护剂主要为一…     

小鼠卵母细胞冷冻保存技术研究进展

卵母细胞的冷冻保存是动物繁殖技术领域生殖细胞冷冻的研究热点。在此介绍了小鼠卵母细胞冷冻保存的研究进展，阐述了小鼠卵母细胞冷冻保存的原理，探讨了冷冻保护剂的作用机理。最后，对小鼠卵母细胞的冷冻保存方法及其原理进行了概括。     

未成熟牛卵母细胞与成熟牛卵母细胞冷冻保存的比较

试验以OPS玻璃化冷冻为方法,以成熟和未成熟牛卵母细胞为材料,研究冷冻保存效果与卵母细胞成熟度的关系.一组将牛卵母细胞从牛卵巢内取出后直接进行冷冻,另一组将牛卵母细胞从牛卵巢内取出后先置于TCM199 FSH的培养液中培养20～22 h,即进行体外成熟后再进行两步法冷冻,两步法解冻后检测卵母细胞的存活率.结果表明,牛体外成熟卵母细胞冷冻效果较未成熟卵母细胞冷冻效果好,卵母细胞的存活率为48.1%,未成熟牛卵母细胞冷冻效果较成熟卵母细胞冷冻效果差,卵母细胞的存活率为35.1%.     

卵母细胞冷冻保存研究进展

1977年Whittingham首次成功报道冷冻一解冻小鼠MⅡ期卵母细胞产仔,自此许多学者对多种动物及人卵母细胞冷冻保存进行了研究。目前小鼠、家兔、牛、马、山羊、绵羊及猪等动物卵母细胞的冷冻保存均有报道,而世界上已经有100多个冷冻卵母细胞的婴儿出生。卵母细胞的冷冻保存可为体外受精、核移植、转基因动物的研制提供更方便的材料来源;[第一段]     

发育阶段对牛卵泡卵母细胞冷冻效果的影响

研究了用3种不同方法（A法：程序冷冻法：B法：超快速冷冻法；C法：玻璃化冷冻法）冷冻保存的牛GV期和IVM卵母细胞的发育潜力，结果表明，无论采取哪种方法。GV期卵母细胞的发育潜力均显著低于IVM卵母细胞。三种冷冻方法中，以玻璃化冷冻为最佳。     

牛卵母细胞冷冻保存研究进展

通过随时随地提供具有发育能力的卵母细胞，卵母细胞冷冻保存赋予体外受精，核移植，转基因等胚胎工程技术的极大灵活性，还可为珍稀濒危野生动物的保种提供技术参考。综述了牛卵母细胞冷冻保存方法及冷冻保存对牛卵母细胞结构和发育能力的影响。     

牛GV期卵母细胞冷冻保存后发育潜力的研究

二甲基亚砜(DMSO)、丙二醇(PROH)、乙二醇(EG)和甘油(GL)4种冷冻保护剂程序化冷冻牛GV期卵母细胞的结果表明,EG和PROH的保护效果比GL和DMSO好。4种不同冷冻方法冷冻保存牛GV期卵母细胞,比较解冻后卵母细胞的体外成熟率、受精后卵裂率。结果表明,在程序化冷冻法与细管玻璃化法(Straw)之间的差异不显著(P>0.05),在开放式拉管法(OPS)与毛细玻管法(GMP)之间的差异不显著(P>0.05);但OPS和GMP与程序化冷冻法和Straw之间的差异极显著(P<0.01)。玻璃化冷冻效果优于程序化冷冻。说明GMP和OPS玻璃化冷冻优于Straw玻璃化冷冻。说明可以采用GMP方法冷冻保存牛GV期卵母细胞。     

影响猪卵母细胞玻璃化冷冻保存效果的因素

对卵母细胞进行冷冻保存,可以使卵源不再受到时间和空间限制,并能为体外受精、核移植和转基因等胚胎工程技术的研究提供充足的原材料.猪卵母细胞中富含脂滴,且对低温十分敏感,因此,猪卵母细胞冷冻保存的研究进展相对较慢.玻璃化冷冻是有效的卵母细胞冷冻方法之一.综述了卵母细胞发育阶段、冷冻栽体和冷冻保护剂等因素对猪卵母细胞玻璃化冷冻保存效果的影响.     

超低温冷冻引发卵母细胞氧化应激及抗氧化剂的应用

卵母细胞超低温冷冻保存在人工辅助生殖和畜牧业上已有广泛应用。然而，超低温冷冻保存造成卵母细胞活性氧大量累积，引发一系列氧化应激，最终导致卵母细胞体内外发育潜力下降。卵母细胞内源的抗氧化酶无法彻底对抗氧化应激，因此在冷冻过程中常添加外源抗氧化剂来减少氧化损伤。文章着重分析了冷冻诱导卵母细胞产生的各种氧化应激、抗氧化剂对抗氧化损伤的效果及其作用机制，为提高卵母细胞冷冻保存效率提供参考。     

牛羊卵母细胞玻璃化冷冻保存的研究进展

卵母细胞玻璃化冷冻保存对于胚胎生物技术的发展具有重要意义,因其简便、快速、廉价等优点而广泛应用于人类辅助生殖、体外胚胎生产、转基因、克隆等方面.由于受到低温和抗冻保护剂的影响,卵母细胞在冷冻过程中都会造成形态和功能上的损伤,并且存活率和发育能力随之降低.本文以牛、羊卵母细胞玻璃化冷冻保存为例,对卵母细胞玻璃化冷冻保存的...     

3种因素对牛卵母细胞玻璃毛细管玻璃化冷冻效果的影响研究

室温下 ,采用GMP(glassmicropipette)玻璃化法对牛卵母细胞进行冷冻保存。结果表明 :不同发育阶段的牛卵母细胞GMP冷冻、解冻后体外受精卵裂率在 36 .6 7%～ 52 .38%之间 ,其中体外培养 2 2h牛卵母细胞的受精卵裂率最高 ,为 52 .38%,与对照组 (6 8.42 %)差异不显著 (P >0 .0 5) ;采用不同的预处理溶液处理冻前牛GV期卵母细胞 ,其中以 3%的EG稀溶液预处理可获得最高的体外受精卵裂率。结果表明 :牛体外成熟卵母细胞冷冻效果最好 ,采用3%EG稀溶液处理玻璃化前卵母细胞可以提高冷冻效果。     

牛卵母细胞冷冻保存研究进展

通过随时随地提供具有发育能力的卵母细胞,卵母细胞冷冻保存赋予体外受精、核移植、转基因等胚胎工程技术的极大灵活性,还可为珍稀濒危野生动物的保种提供技术参考.综述了牛卵母细胞冷冻保存方法及冷冻保存对牛卵母细胞结构和发育能力的影响.     

家畜卵母细胞冷冻保存的研究进展

本文阐述了卵母细胞冷冻保存对体外受精、转基因动物研究及人类医疗方面的意义,论述了卵母细胞冷冻保存的发展过程、方法与机理及冷冻保护剂种类,通过揭示冷冻、解冻对细胞的作用,进一步探讨了各种冷冻保护剂及冻存方法对保持细胞生命力的功效。在当前卵母细胞冷冻研究中,玻璃化冷冻法发展迅速,并出现超快速玻璃化法。     

绵羊卵母细胞玻璃化冷冻保存实验

采用玻璃化冷冻保存方法，对375个成熟的绵羊卵母细胞进行冷冻，解冻后进行体外受精。结果为：形态完好率94.4％，卵裂114个，36个受精卵达到早期桑葚胚的阶段。实验的目的在于尝试绵羊卵母细胞玻璃化冷冻保存的可能性，相信绵羊卵母细胞冷冻保存问题最终会得到解决。     

猪卵母细胞玻璃化冷冻保存技术的研究进展

卵母细胞冷冻保存技术在动物种质资源保存、濒危动物保护等方面具有独特的作用,猪卵母细胞的冷冻保存仍是一项世界性难题,尚处于摸索阶段。现就猪卵母细胞冷冻保存的现状、冷冻原理与方法及冷冻损伤等问题进行综述。     

哺乳动物卵母细胞低温存活的影响因素

哺乳动物卵母细胞的有效冷冻保存,会大大提高众多繁殖技术的实用性。那些最初用于哺乳动物卵裂期胚胎的平衡和非平衡冷冻保存方法,已经用于卵母细胞,但受精率和发育率显著低于没有冷冻的卵母细胞。在家畜上还未曾有过从冷冻卵母细胞发育到幼畜的研究报导。细胞骨架元素、减数分裂纺锤体和其它卵皮质组分,对遇冷和防冻剂的敏感性,不利于卵母细胞冷冻保存。降温过程中其它物理因素也会影响卵母细胞的存活。那些影响卵母细胞渗透反应和冷冻生物学反应的生物物理参数的估计将日益重要,有助于创造新的冷冻方法。     

牛体外成熟卵母细胞冷冻保存的研究

本实验探讨了用６各不同方法冷冻保存的牛体外成熟卵母细胞体受精后的发育潜力及其冷冻损伤，尽管用不同方法冷冻的牛卵母细胞多数（８６．１％）形态正常，但体外受精后的受精率（３０．０％）和卵裂率（７．４％）明显低于对照组（６９．０％和５２．９％）。卵裂后继续发育的能力严重受损，在６种冷冻方法中，１．６Ｍ丙二醇分步平衡、程序冷冻效果最好，受精率和卵裂率分别达３６．４％和１３．５％，冷冻后卵母细胞发育潜力下降