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利用cDNA-AFLP分析内生解淀粉芽胞杆菌 Fy11诱导辣椒差异表达基因
引用本文:杨瑞先,范晓静,邱思鑫,蔡学清,胡方平. 利用cDNA-AFLP分析内生解淀粉芽胞杆菌 Fy11诱导辣椒差异表达基因[J]. 中国农业科学, 2013, 46(12): 2449-2458. DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2013.12.006
作者姓名:杨瑞先  范晓静  邱思鑫  蔡学清  胡方平
作者单位:1. 福建农林大学植物保护学院,福州,350002
2. 福建省农业科学院作物研究所,福州,350002
基金项目:国家自然科学基金项目(30671463)、福建省发改委项目(KY0030060)
摘    要:【目的】分析内生解淀粉芽胞杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)Fy11诱导辣椒(Capsicum annuum)幼苗差异表达基因,了解辣椒与内生芽胞杆菌互作的分子机制。【方法】利用cDNA-AFLP技术,采用256对引物,分析辣椒幼苗接种内生解淀粉芽胞杆菌Fy11后5个时间点的基因表达谱;利用qRT-PCR分析差异基因表达模式,验证cDNA-AFLP表达谱。【结果】256对引物共产生18 620个转录本(TDF),筛选获得353条差异表达条带,占扩增条带总数的1.89%。经克隆、测序分析,最终获得257个差异TDF,聚类分析得到229个独立基因(EST,unigenes),其中144个基因上调表达,85个基因下调表达。经Blastx比对和功能分类分析,其中65条EST(28.38%)未找到同源性匹配,8条(3.49%)与未知功能蛋白同源性较高。其余156条EST主要涉及基础代谢基因(10.92%);与能量和抗病与防御类相关基因,各占8.73%;信号转导基因占7.42%;转运子或转座子基因占6.99%;与细胞结构相关基因占6.55%;参与转录调控基因占5.68%;细胞生长类基因占3.93%;参与蛋白质运输和储存有8个基因,占3.49%;蛋白质合成类基因占2.18%;次生代谢类和胞间运输类基因,其数量相对较少,各占1.75%。选取与抗病防御、转录调控及信号转导类等相关的10个差异基因,qRT-PCR分析结果显示其表达模式符合cDNA-AFLP表达谱。【结论】内生细菌与植物互作的分子机制涉及植物多方面生理生化反应,包括抗病防御、转录调控、蛋白质代谢、信号转导、以及非生物胁迫等多种途径相关基因的协同控制。

关 键 词:辣椒   内生解淀粉芽胞杆菌   互作   基因表达   cDNA-AFLP   qRT-PCR
收稿时间:2012-12-25

cDNA-AFLP Analysis of Differential Gene Expression in Pepper Inoculated with Endophytic Bacillus amyloliquefaciens Fy11
YANG Rui-Xian,FAN Xiao-Jing,QIU Si-Xin,CAI Xue-Qing,HU Fang-Ping. cDNA-AFLP Analysis of Differential Gene Expression in Pepper Inoculated with Endophytic Bacillus amyloliquefaciens Fy11[J]. Scientia Agricultura Sinica, 2013, 46(12): 2449-2458. DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2013.12.006
Authors:YANG Rui-Xian  FAN Xiao-Jing  QIU Si-Xin  CAI Xue-Qing  HU Fang-Ping
Affiliation:1.College of Plant Protection, Fujian Agriculture and Forestry University, Fuzhou 350002;2.Institute of Crop Sciences, Fujian Academy of Agricultural Sciences, Fuzhou 350002
Abstract:
Keywords:Capsicum annuum  Bacillus amyloliquefaciens  interaction  gene expression  cDNA-AFLP  qRT-PCR
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