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| 叶用莴苣荧光定量PCR体系的优化 | |
| 引用本文： | 李婷 韩莹琰 范双喜 任月. 叶用莴苣荧光定量PCR体系的优化[J]. 中国农学通报, 2013, 29(13): 106-113. DOI: 10.11924/j.issn.1000-6850.2012-3317 |
| 作者姓名： | 李婷 韩莹琰 范双喜 任月 |
| 作者单位： | 北京农学院植物科学技术学院,北京,102206 |
| 基金项目： | 北京市自然科学基金项目“热胁迫下叶用莴苣HSP家族基因协同表达机制的研究”(6112005)；北京市科技新星计划项目“叶用莴苣耐热机理的研究及耐热品种的选育”(2010B020)；现代农业产业技术体系北京市叶类蔬菜创新团队建设专项资金资助-blvt-02；现代农业产业技术体系北京市叶类蔬菜创新团队建设专项资金资助-blvt-02。 |
| 摘 要： | 为建立一套最适合叶用莴苣(Lactuca sativa L.)基因表达量研究的荧光定量PCR技术体系，以叶用莴苣S24为试材，采用SYBR GreenⅠ法，利用叶用莴苣内参基因的2对引物组合18SR1和18SR2，分别在10 μL和20 μL反应体系条件下进行扩增反应。结果表明，分别在10 μL和20 μL反应体系条件下内参基因引物组合18SR1的扩增曲线、标准曲线以及溶解曲线等指标都优于内参基因引物组合18SR2；2对内参基因引物组合18SR1和18SR2在10 μL反应体系中的扩增曲线、标准曲线以及溶解曲线等指标也均优于20 μL反应体系。因此叶用莴苣荧光定量PCR内参基因利用18SR1引物组合，反应体系采用10 μL比较合理。 |
| 关 键 词： | 主成分分析 主成分分析 |
| 收稿时间： | 2012-10-08 |
| 修稿时间： | 2012-11-16 |
Optimization of Lactuca sativa L. Real-time PCR system |
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| Li Ting , Han Yingyan , Fan Shuangxi , Ren Yue. Optimization of Lactuca sativa L. Real-time PCR system[J]. Chinese Agricultural Science Bulletin, 2013, 29(13): 106-113. DOI: 10.11924/j.issn.1000-6850.2012-3317 | |
| Authors: | Li Ting Han Yingyan Fan Shuangxi Ren Yue |
| Abstract: | In order to establish a method Real-time PCR for gene expression quantity study of Lactuca sative L.,with leaves of Lactuca sativa L. (S24) as material, we used SYBR GreenⅠmethod, compared two pairs of primers 18SR1/18SR2 in 10μL and 20μL reaction system related index though the amplification of Real-time PCR，the standard curve of Real-time PCR and the melt curve of Real-time PCR.Choose the optimal Real-time PCR system and house keeping gene primers in Lactuca sativa L. |
| Keywords: | real-time PCR SYBR GreenⅠ the standard curve amplification efficiency the melt curve |
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