| 绵羊胚胎成纤维细胞饲养层用于培养人诱导性多能干细胞的效果研究 |
| |
| 作者姓名： | 张世强 李孟心 韩高链 郭丽荣 赵迪鹏 李俊玲 郭田燕 杜荣 秦健 |
| |
| 作者单位： | 1. 山西农业大学生命科学学院, 太谷 030801;2. 山西农业大学动物科技学院, 太谷 030801;3. 山西农业大学实验教学中心, 太谷 030801 |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金项目（31872438）;国家留学基金（201708140150）;山西省回国留学人员科研资助项目（2016-067）;山西省留学回国人员科技活动择优资助项目;山西省平台基地和人才专项优秀人才科技创新项目（201605D211028）;山西省重点研发计划项目（201803D221022-4）;山西农业大学中青年拔尖创新人才支持计划（BJRC201204） |
| |
| 摘 要： | 试验在体外分离培养1月龄绵羊胚胎成纤维细胞（sheep embryonic fibroblast,SEF）,经丝裂霉素C处理后探讨其作为诱导性多能干细胞（induced pluripotent stem cells,iPSC）体外培养饲养层的可行性。试验以SNL饲养层细胞为对照,人iPSC（hiPSC）为培养对象,通过形态学观察、碱性磷酸酶（AP）染色、以及实时荧光定量PCR和免疫细胞化学对hiPSC标志基因mRNA和蛋白表达的检测,比较了SEF细胞和SNL细胞作为干细胞饲养层的效果。结果表明,在试验期内,与SNL饲养层体外培养的hiPSC相似,SEF饲养层体外培养的hiPSC在形态上呈集落样生长,增殖速度快;AP染色呈蓝紫色,能够维持未分化状态;能正常表达多能性标志基因。两种饲养层细胞培养的hiPSC多能性标志基因c-Myc、Klf4、OCT4和SOX2 mRNA的表达以及OCT4、SOX2、SSEA4和TRA-1-60蛋白的表达并无显著差异（P>0.05）。本研究结果初步表明SEF可作为体外培养iPSC的饲养层细胞,为进一步建立可表达促生长因子的基因修饰SEF细胞系奠定了基础。
|
| 关 键 词： | 绵羊胚胎成纤维细胞(SEF) 饲养层 诱导性多能干细胞(iPSC) 多能性 |
| 收稿时间： | 2019-07-29 |
|
| 点击此处可从《中国畜牧兽医》浏览原始摘要信息 |
|
点击此处可从《中国畜牧兽医》下载全文 |
|
